BDM支架“人工羊膜”的制备及立体培养的初步实验研究
发布时间：2021-03-02 20:45
目的:探索利用人羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs）与生物基质体外预制“人工羊膜”,并对“人工羊膜”进行体外立体培养。方法:采用双酶消化法分离提取hAMSCs,并行贴壁培养、纯化传至P3代,运用流式细胞术对hAMSCs进行鉴定;用于后续与BD基质胶（BD-matrigel,BDM）混合制备“人工羊膜”。用混合法按体积1:1比例将干细胞与BDM结合,制成底面积为2 cm2,厚约3-5 mm,浓度为3×105/mL的圆形薄膜,即“人工羊膜”,将其置于三维的培养体系中培养（实验组）;同期将3×105/mL浓度,不含BDM的hAMSCs置于相同培养体系中（对照组）。在hAMSCs培养的第1、4、7 d时,分别在普通光学显微镜下观察两种不同培养方式下细胞的生长状态及形态变化。使用AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡试剂盒对实验组和对照组中的hAMSCs进行染色,用流式细胞仪（flow cytometer,FCM）上机检测,计算出AnnexinV-FITC/...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：41 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
流式细胞仪检测hAMSCs细胞表面抗原的表达情况
遵义医科大学硕士学位论文李会兴14图2对照组hAMSCs(P1、P2、P3)的形态学观察(×40)2.2“人工羊膜”的整体外观第三代hAMSCs与BDM按体积1：1混合，制作成底面积为2cm2、厚度为3-5mm、细胞浓度为3×105cells/mL的圆形均匀薄膜，即“人工羊膜”(见图3)。图3“人工羊膜”的整体外观形态观察2.3实验组间充质干细胞的形态学观察实验组hAMSCs在不同倍镜下表现为均匀分布，呈不规则球形生长(图4)。细胞在三维状态下生长状态良好。
遵义医科大学硕士学位论文李会兴14图2对照组hAMSCs(P1、P2、P3)的形态学观察(×40)2.2“人工羊膜”的整体外观第三代hAMSCs与BDM按体积1：1混合，制作成底面积为2cm2、厚度为3-5mm、细胞浓度为3×105cells/mL的圆形均匀薄膜，即“人工羊膜”(见图3)。图3“人工羊膜”的整体外观形态观察2.3实验组间充质干细胞的形态学观察实验组hAMSCs在不同倍镜下表现为均匀分布，呈不规则球形生长(图4)。细胞在三维状态下生长状态良好。
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同方法预防宫腔粘连分离术后再粘连的效果观察[J]. 周翠娟,钟柳育,孙燕,袁媛,蒲桃. 微创医学. 2019(06)
[2]宫腔镜下宫腔粘连分离术为主导的综合疗法治疗重度宫腔粘连30例临床分析[J]. 李淑红,翟妍,张震宇,王淑珍. 中国微创外科杂志. 2019(12)
[3]雌孕激素联合透明质酸钠凝胶辅助治疗宫腔镜下重度宫腔粘连分离术患者效果观察[J]. 张红. 实用妇科内分泌电子杂志. 2019(25)
[4]干细胞在子宫内膜损伤后修复的研究进展[J]. 韩笑,黄晓武. 国际妇产科学杂志. 2019(04)
[5]PPCNg介导人羊膜间充质干细胞治疗大鼠宫腔粘连的研究[J]. 陈芯培,张文文,毛艳华,阳媛,吴本媛,李长江,勾亚婷,于结,孙聪聪,张应凤,王佳. 重庆医科大学学报. 2019(08)
[6]大鼠骨髓间充质干细胞对子宫内膜的损伤修复[J]. 林彤,李冬宏,张鲁榕,郭玉佳,陈丽红,陈杏婷,连梅,林晨. 中国妇产科临床杂志. 2019(03)
[7]宫腔粘连诊治的研究进展[J]. 莫翔. 实用妇科内分泌电子杂志. 2019(11)
[8]羊膜移植预防重度宫腔粘连TCRA术后再粘连的随机对照研究[J]. 严文娟,卫书香. 中外医学研究. 2018(35)
[9]重度宫腔粘连电切术后羊膜移植羊膜放置方式临床研究[J]. 吴本媛,王佳. 现代医药卫生. 2018(20)
[10]宫腔镜冷刀技术在宫内疾病治疗中的应用和优势[J]. 周静,陈静,翁同芳,程芳,朱可安,潘琼,徐大宝. 中国内镜杂志. 2019(01)
博士论文
[1]经血干细胞以旁分泌途径抑制受损子宫内膜纤维化并促进修复的作用机制研究[D]. 竺海燕.浙江大学 2016
[2]月经血源性子宫内膜干细胞移植治疗重度宫腔粘连的临床前期研究[D]. 郑圣霞.安徽医科大学 2015
硕士论文
[1]剪刀和电切宫腔粘连分离术的临床效果比较及后续体外受精-胚胎移植妊娠结局分析[D]. 李晓.山东大学 2019
[2]人羊膜间充质干细胞在短肽水凝胶中的三维培养研究[D]. 张玲.遵义医学院 2018
[3]宫腔粘连电切术后羊膜移植羊膜放置方式的临床研究[D]. 吴本媛.重庆医科大学 2018
本文编号：3059920
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：41 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
流式细胞仪检测hAMSCs细胞表面抗原的表达情况
遵义医科大学硕士学位论文李会兴14图2对照组hAMSCs(P1、P2、P3)的形态学观察(×40)2.2“人工羊膜”的整体外观第三代hAMSCs与BDM按体积1：1混合，制作成底面积为2cm2、厚度为3-5mm、细胞浓度为3×105cells/mL的圆形均匀薄膜，即“人工羊膜”(见图3)。图3“人工羊膜”的整体外观形态观察2.3实验组间充质干细胞的形态学观察实验组hAMSCs在不同倍镜下表现为均匀分布，呈不规则球形生长(图4)。细胞在三维状态下生长状态良好。
遵义医科大学硕士学位论文李会兴14图2对照组hAMSCs(P1、P2、P3)的形态学观察(×40)2.2“人工羊膜”的整体外观第三代hAMSCs与BDM按体积1：1混合，制作成底面积为2cm2、厚度为3-5mm、细胞浓度为3×105cells/mL的圆形均匀薄膜，即“人工羊膜”(见图3)。图3“人工羊膜”的整体外观形态观察2.3实验组间充质干细胞的形态学观察实验组hAMSCs在不同倍镜下表现为均匀分布，呈不规则球形生长(图4)。细胞在三维状态下生长状态良好。
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同方法预防宫腔粘连分离术后再粘连的效果观察[J]. 周翠娟,钟柳育,孙燕,袁媛,蒲桃. 微创医学. 2019(06)
[2]宫腔镜下宫腔粘连分离术为主导的综合疗法治疗重度宫腔粘连30例临床分析[J]. 李淑红,翟妍,张震宇,王淑珍. 中国微创外科杂志. 2019(12)
[3]雌孕激素联合透明质酸钠凝胶辅助治疗宫腔镜下重度宫腔粘连分离术患者效果观察[J]. 张红. 实用妇科内分泌电子杂志. 2019(25)
[4]干细胞在子宫内膜损伤后修复的研究进展[J]. 韩笑,黄晓武. 国际妇产科学杂志. 2019(04)
[5]PPCNg介导人羊膜间充质干细胞治疗大鼠宫腔粘连的研究[J]. 陈芯培,张文文,毛艳华,阳媛,吴本媛,李长江,勾亚婷,于结,孙聪聪,张应凤,王佳. 重庆医科大学学报. 2019(08)
[6]大鼠骨髓间充质干细胞对子宫内膜的损伤修复[J]. 林彤,李冬宏,张鲁榕,郭玉佳,陈丽红,陈杏婷,连梅,林晨. 中国妇产科临床杂志. 2019(03)
[7]宫腔粘连诊治的研究进展[J]. 莫翔. 实用妇科内分泌电子杂志. 2019(11)
[8]羊膜移植预防重度宫腔粘连TCRA术后再粘连的随机对照研究[J]. 严文娟,卫书香. 中外医学研究. 2018(35)
[9]重度宫腔粘连电切术后羊膜移植羊膜放置方式临床研究[J]. 吴本媛,王佳. 现代医药卫生. 2018(20)
[10]宫腔镜冷刀技术在宫内疾病治疗中的应用和优势[J]. 周静,陈静,翁同芳,程芳,朱可安,潘琼,徐大宝. 中国内镜杂志. 2019(01)
博士论文
[1]经血干细胞以旁分泌途径抑制受损子宫内膜纤维化并促进修复的作用机制研究[D]. 竺海燕.浙江大学 2016
[2]月经血源性子宫内膜干细胞移植治疗重度宫腔粘连的临床前期研究[D]. 郑圣霞.安徽医科大学 2015
硕士论文
[1]剪刀和电切宫腔粘连分离术的临床效果比较及后续体外受精-胚胎移植妊娠结局分析[D]. 李晓.山东大学 2019
[2]人羊膜间充质干细胞在短肽水凝胶中的三维培养研究[D]. 张玲.遵义医学院 2018
[3]宫腔粘连电切术后羊膜移植羊膜放置方式的临床研究[D]. 吴本媛.重庆医科大学 2018
本文编号：3059920
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