不同条件诱导HTR8/SVneo细胞系氧化应激的代谢组学研究
发布时间：2021-03-02 22:49
胎盘的氧化应激存在于整个妊娠期,只有当氧化应激超过正常生理水平时才会出现妊娠并发症。滋养细胞系具有均一的细胞群和易干预等特点,因此常被用于氧化应激研究。然而,当使用不同的氧化应激细胞模型时,常会出现相互矛盾的结果。本研究的目的是描绘妊娠并发症研究中常用的不同氧化应激模型的细胞内和细胞外的代谢谱。HTR8/Svneo细胞,人绒毛外滋养细胞,在5种不同条件下处理诱导氧化应激:缺氧（1%O2）;缺氧（1%O2）复氧（21%O2）;氯化钴（Cobalt chloride,CoCl2;300μmol/l）;硝普钠（Sodium nitroprusside,SNP;2.5mmol/l）和子痫前期孕妇血清（10%v/v）。从细胞中提取细胞内代谢物,从培养基中收集细胞外代谢物,用气相色谱-质谱（Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）法进行代谢组学分析。结果表明,不同细胞模型的胞内和胞外代谢组存在明显差异,外源性药物如氯化钴和硝普纳处理组的结果更相似。这些不同细胞模型代...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：40 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细胞活力测定法测定CoCl2和SNP的处理浓度
重庆医科大学硕士研究生学位论文12看到SNP组与正常8h对照组有明显的分离趋势。同时CoCl2组和HR组与正常24h对照组之间也存在明显差异。与此同时，缺氧组和PE组与正常24h对照组比较，没有明显分离趋势。前两个主成分解释了各实验组细胞内代谢物的58.7%和11.7%的差异。通过与质谱文库相比，共鉴定出了103种代谢物，其中33种在氧化应激细胞模型与正常对照组中均被检测出且存在显著性差异（P<0.05,Q<0.05；图3）。使用CoCl2和SNP处理的氧化应激细胞模型中，细胞内饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸水平均较其相应对照组低。在CoCl2组中，谷胱甘肽、四种氨基酸、两种氨基酸衍生物和所有的三羧酸（tricarboxylicacid，TCA）循环中间产物均较正常24h对照组低。相反地，在接受HR处理的细胞中，九种不饱和脂肪酸、六种饱和脂肪酸、谷胱甘肽、两种氨基酸和两种TCA循环中间产物较对照组有明显升高趋势。当细胞经PE血清培养时，细胞内代谢物水平呈不同的改变趋势（6种代谢物增加，5种代谢物减少）。在缺氧条件下，只有两种代谢物，花生四烯酸和琥珀酸，呈显著性降低（图3）。五种氧化应激细胞模型的细胞内代谢谱差异很大。图2.七种不同条件下HTR8/SVneo细胞代谢谱的主成分分析图。具有相似代谢物特征的样本则更接近。彩色椭圆表示95%置信区间。Figure2.PCanalysisplotofthemetabolicprofilesofHTR8/SVneocellstreatedundersevendifferentconditions.
重庆医科大学硕士研究生学位论文13图3.五种氧化应激细胞模型细胞内代谢谱差异热图。细胞内代谢物与相应对照组的相对水平用log2取对数表示。红色方块表示氧化应激细胞模型组的代谢物浓度高于对照组，而绿色方块表示氧化应激细胞模型组的代谢物浓度低于对照组。（P<0.05，Q<0.05）Figure3.Heatmapdemonstratingdifferencesintheintracellularmetabolomeacrossfiveoxidativestresscellmodels,whencomparedtotheircorrespondingcontrolgroup.2.3五种氧化应激细胞模型的细胞外代谢谱
本文编号：3060099
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：40 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细胞活力测定法测定CoCl2和SNP的处理浓度
重庆医科大学硕士研究生学位论文12看到SNP组与正常8h对照组有明显的分离趋势。同时CoCl2组和HR组与正常24h对照组之间也存在明显差异。与此同时，缺氧组和PE组与正常24h对照组比较，没有明显分离趋势。前两个主成分解释了各实验组细胞内代谢物的58.7%和11.7%的差异。通过与质谱文库相比，共鉴定出了103种代谢物，其中33种在氧化应激细胞模型与正常对照组中均被检测出且存在显著性差异（P<0.05,Q<0.05；图3）。使用CoCl2和SNP处理的氧化应激细胞模型中，细胞内饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸水平均较其相应对照组低。在CoCl2组中，谷胱甘肽、四种氨基酸、两种氨基酸衍生物和所有的三羧酸（tricarboxylicacid，TCA）循环中间产物均较正常24h对照组低。相反地，在接受HR处理的细胞中，九种不饱和脂肪酸、六种饱和脂肪酸、谷胱甘肽、两种氨基酸和两种TCA循环中间产物较对照组有明显升高趋势。当细胞经PE血清培养时，细胞内代谢物水平呈不同的改变趋势（6种代谢物增加，5种代谢物减少）。在缺氧条件下，只有两种代谢物，花生四烯酸和琥珀酸，呈显著性降低（图3）。五种氧化应激细胞模型的细胞内代谢谱差异很大。图2.七种不同条件下HTR8/SVneo细胞代谢谱的主成分分析图。具有相似代谢物特征的样本则更接近。彩色椭圆表示95%置信区间。Figure2.PCanalysisplotofthemetabolicprofilesofHTR8/SVneocellstreatedundersevendifferentconditions.
重庆医科大学硕士研究生学位论文13图3.五种氧化应激细胞模型细胞内代谢谱差异热图。细胞内代谢物与相应对照组的相对水平用log2取对数表示。红色方块表示氧化应激细胞模型组的代谢物浓度高于对照组，而绿色方块表示氧化应激细胞模型组的代谢物浓度低于对照组。（P<0.05，Q<0.05）Figure3.Heatmapdemonstratingdifferencesintheintracellularmetabolomeacrossfiveoxidativestresscellmodels,whencomparedtotheircorrespondingcontrolgroup.2.3五种氧化应激细胞模型的细胞外代谢谱
本文编号：3060099
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