非瑟酮对高糖高脂诱导小鼠脑微血管内皮细胞损伤的影响及机制研究

发布时间：2021-03-28 10:14

　　目的 研究非瑟酮对高糖高脂诱导小鼠脑微血管内皮细胞（Mouse brain microvascular endothelial cells,BEND3 cells）损伤的影响及机制。方法 1.建立高糖高脂诱导小鼠脑微血管内皮细胞模型。实验分组为:正常对照组、高糖高脂模型组（25 mmol·L-1葡萄糖+200 μmol·L-1棕榈酸）、非瑟酮治疗组（非瑟酮 0.3 μg·mL-1、1.5 μg·mL-1、7.5 μg·mL-1、37.5 μg·mL-1）、（非瑟酮1.5 μg·mL-1、3 μg·mL-1、6 μg·mL-1、12 μg·mL-1）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）组（20 ng·mL-1）。CCK-8 法检测各组细胞存活率以筛选最佳给药剂量;LDH释放检测法评价非瑟酮细胞毒性;2.免疫蛋白印迹法检测各组细胞凋亡基因蛋白B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）,BCL2-Associated X 的蛋白质（BCL2-Associated X Protein,Bax）表达情况;... 

【文章来源】：山西中医药大学山西省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

非瑟酮对高糖高脂诱导的BEND3细胞存活率及细胞毒性的检测Figure1.EffectsoffisetinonsurvivalrateandcytotoxicityofBEND3cellsinducedbyhighglucoseandpalmiticacid注:与正常对照组相比，高糖高脂模型组***P<0.001；与高糖高脂模型组相比，非瑟酮组#P

非瑟酮对高糖高脂诱导的小鼠脑微血管内皮细胞损伤模型的影响和机制研究13BEND3细胞形态：正常BEND3细胞贴壁生长，上皮样细胞，呈长梭形、多角形；高糖高脂干预后，可观察到细胞数量减少，体积变小，缺少均一性且失去其原有形态，细胞大量死亡；非瑟酮和VEGF组作用于高糖高脂干预后的BEND3细胞，与单纯高糖高脂干预后的细胞相比，细胞数量增多，细胞总体形态虽仍有圆形但相对较规整，细胞形态大多呈长梭形。如图2所示。图2镜下观察细胞形态Fig.2Cellmorphologywasobservedundermicroscope3.2非瑟酮改善高糖高脂诱导BEND3细胞的凋亡为进一步检测高糖高脂干预后是否引起小鼠脑血管内皮细胞凋亡，采用WesternBloting检测典型凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达。结果显示：与Control相比，Model组Bcl-2蛋白表达降低，Bax蛋白表达升高，Bcl-2/Bax比值降低(P<0.001)，与Model组相比，非瑟酮治疗组Bcl-2蛋白表达升高，Bax蛋白表达降低，Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)。如图3所示。图3：非瑟酮对高糖高脂诱导BEND3细胞凋亡基因Bax,Bcl-2蛋白表达影响Fig.3ExpressionofBax,Bcl-2inBEND3cellsinjurymodelinducedbyhighglucoseandpalmiticacidinfisetin注：Control：正常对照组，Model：高糖高脂模型组(25mmol·L-1HG+200μmol·L-1PA)。与Control组相比，Model组***P<0.001；与Model组相比，Fisetin组#P<0.05。Fig.3ExpressionofBcl-2/BaxintheBEND3cellinjurymodelinducedbyhighglucoseandpalmiticacidwasdetectedbyWesternblot.Resultsrepresentthemean±SDofthreeindependent

非瑟酮对高糖高脂诱导的小鼠脑微血管内皮细胞损伤模型的影响和机制研究13BEND3细胞形态：正常BEND3细胞贴壁生长，上皮样细胞，呈长梭形、多角形；高糖高脂干预后，可观察到细胞数量减少，体积变小，缺少均一性且失去其原有形态，细胞大量死亡；非瑟酮和VEGF组作用于高糖高脂干预后的BEND3细胞，与单纯高糖高脂干预后的细胞相比，细胞数量增多，细胞总体形态虽仍有圆形但相对较规整，细胞形态大多呈长梭形。如图2所示。图2镜下观察细胞形态Fig.2Cellmorphologywasobservedundermicroscope3.2非瑟酮改善高糖高脂诱导BEND3细胞的凋亡为进一步检测高糖高脂干预后是否引起小鼠脑血管内皮细胞凋亡，采用WesternBloting检测典型凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达。结果显示：与Control相比，Model组Bcl-2蛋白表达降低，Bax蛋白表达升高，Bcl-2/Bax比值降低(P<0.001)，与Model组相比，非瑟酮治疗组Bcl-2蛋白表达升高，Bax蛋白表达降低，Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)。如图3所示。图3：非瑟酮对高糖高脂诱导BEND3细胞凋亡基因Bax,Bcl-2蛋白表达影响Fig.3ExpressionofBax,Bcl-2inBEND3cellsinjurymodelinducedbyhighglucoseandpalmiticacidinfisetin注：Control：正常对照组，Model：高糖高脂模型组(25mmol·L-1HG+200μmol·L-1PA)。与Control组相比，Model组***P<0.001；与Model组相比，Fisetin组#P<0.05。Fig.3ExpressionofBcl-2/BaxintheBEND3cellinjurymodelinducedbyhighglucoseandpalmiticacidwasdetectedbyWesternblot.Resultsrepresentthemean±SDofthreeindependent

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3105377