SAHA通过调节Kupffer细胞自噬减轻大鼠肝移植后缺血再灌注损伤的机制研究

发布时间：2021-06-11 10:46

　　目的:肝脏缺血再灌注损伤（Ischemia reperfusion injury,IRI）影响肝移植的效果,多种机制参与该过程,其中,库普弗细胞（Kupffer cells,KCs）通过调控肝脏免疫排斥反应在肝脏IRI中发挥重要作用,但其具体机制还有待进一步探讨。辛二酰苯胺异羟肟酸（Suberanilide hydroxamic acid,SAHA）是一种广谱的组蛋白去乙酰化酶抑制剂,研究表明SAHA能够有效抑制巨噬细胞的炎症水平,并能够通过AKT/m TOR通路诱导多种细胞自噬,但其在肝移植诱导的肝脏IRI中的作用尚不清楚。本研究采用SAHA对大鼠肝移植后IRI模型进行干预,探讨SAHA在该模型中的作用,为IRI药物治疗奠定一定的理论基础。方法:1采用雄性Sprague Dawley（SD）大鼠构建肝移植后IRI模型。SD大鼠随机分为6组:1.假手术组（Sham组）;2.缺血再灌注组（IR组）;3.IR+DMSO组;4.IR+SAHA组;5.IR+SAHA+CL组;6.IR+SAHA+CQ组。于再灌注24 h获取各组大鼠外周血及肝脏组织,提取肝组织及KCs总蛋白,检测炎症因子,凋亡相... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

SAHA依赖KCs减轻大鼠肝移植后IRI程度

重庆医科大学硕士研究生学位论文182.2SAHA降低缺血再灌注肝脏的凋亡水平图2.SAHA抑制缺血再灌注肝脏凋亡水平A.WesternBlot检测缺血再灌注肝脏组织中凋亡相关蛋白

重庆医科大学硕士研究生学位论文20LC3B及P62发现，SAHA能够有效促进移植肝ATG5，LC3B的蛋白水平，同时下调P62的水平（P<0.05）（图3A,B）。通过对自噬经典通路AKT/mTOR蛋白水平的检测，我们发现SAHA能够明显抑制该通路活性，这表明SAHA可能通过该通路促进移植肝的自噬水平（P<0.05）（图3A,B）。P65在KCs炎症反应过程中具有重要作用，因此，我们从蛋白水平检测了p-P65及M1型极化相关因子iNOS，IL-1β，TNF-α的表达，结果显示，SAHA能够明显抑制p-P65及M1型相关因子的表达（P<0.05）（图3C,D）。为检测自噬在该过程中的作用，我们使用自噬抑制剂氯喹（Chloroquine，CQ）抑制肝脏自噬后发现，p-P65及M1型相关因子水平有明显回升（图3C,D），因此SAHA可能通过促自噬作用从而抑制KCs的M1型极化来减轻肝脏IRI程度。图3.SAHA在自噬介导下减轻肝移植后IRIA.WesternBlot实验检测肝脏中自噬相关蛋白ATG5，LC3B，P62及AKT/mTOR通

【参考文献】：
期刊论文
[1]Understanding the importance of autophagy in human diseases using Drosophila[J]. Arindam Bhattacharjee,áron Szabó,Tamás Csizmadia,Hajnalka Laczkó-Dobos,Gábor Juhász.  Journal of Genetics and Genomics. 2019(04)



本文编号：3224388