过表达CD40L基因对裸鼠M5白血病模型中骨髓细胞凋亡的影响
发布时间：2021-06-14 22:18
目的:通过慢病毒转染构建过表达CD40L基因THP-1白血病细胞株,并采取尾静脉注射法构建过表达CD40L基因的裸鼠M5白血病模型,探讨过表达CD40L基因对裸鼠骨髓细胞凋亡的影响。方法:1、裸鼠M5白血病模型的建立及鉴定:（1）将18只3-4周龄的雌性NOD/SCID小鼠,随机分为3组,每组6只,即对照组、模型A组、模型B组。接种前连续2 d给予每只小鼠腹腔注射环磷酰胺2 mg/（kg·d）,于预处理后24 h内接种细胞。模型组分别经尾静脉接种对数生长期THP-1细胞悬液1×107/只（A组）、5×106/只（B组）,对照组小鼠采用同样方法注射等剂量生理盐水;（2）观察小鼠一般情况,于预处理前、接种细胞后7、14、21和28 d及处死时检测血常规并计数外周血白细胞分类;（3）濒死前处死取材,组织切片病理检查;2、过表达CD40L基因对裸鼠M5白血病模型中骨髓细胞凋亡的影响:（1）通过慢病毒转染方式构建过表达CD40L-THP-1细胞株,用嘌呤霉素进行稳转细胞株筛选,流式细胞术检测其筛选后纯度,采用Q-PCR法验证是否过表达CD40L基因;（...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各小组A.对照组小鼠代表性图片；B.模型A组小
遵义医科大学硕士学位论文廖晓敏16图1各小组小鼠终末期一般情况A.对照组小鼠代表性图片；B.模型A组小鼠代表性图片；C.模型B组小鼠代表性图片。3.2生存时间A组小鼠分别于接种后30和36d各处死2只，32和33d各处死1只，B组小鼠于接种后33和37d各处死1只，35和39d各处死2只。结果见表2。表2三组小鼠处死时间及只数（只，n=6）3.3血常规的变化模型A、B组小鼠于建模7d后出现白细胞数升高，建模14d后与对照组比较，模型组小鼠白细胞数明显升高，差异有统计学意义（P<0.05），其中以1×107/只的模型A组最为显著；此时模型A与模型B组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；21d后血常规提示各模型组白细胞数均降低，考虑此时小鼠处于骨髓抑制期或其他原因引起，具体原因值得以后进一步深入研究；在建模28d后模型组小鼠白细胞数明显高于对照组（P<0.01），各模型组间差异无显著性；模型A组在建模第7d、14d、28d与建模前相比，差异有统计学意义（P<0.05）；模型B组在建模第28d与建模前比较，差异有统计学意义（P<0.05），结果见表3；模型组小鼠与对照组小鼠比较，血红蛋白变化无明显统计学意义且各组小鼠之间血红蛋白随时间变化也无明显统计学意义，结果见表4；建模14d后，模型组血小板开始减低，但与对照组比较无统计学意义，第21d模型B组小鼠血小板与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05），结果见表5。各组小鼠血常规各项分组3031323334353637383940对照组———————————模型组A2112模型组B1212
遵义医科大学硕士学位论文廖晓敏17指标变化曲线图见图2。表3三组小鼠不同时间白细胞变化（×109个/L，±s，n=6）注：同一时间点与对照组比较，*P<0.05,**P<0.01.。▲：与建模前2天比较，P＜0.05；★:与第7天比较，P<0.05；☆：与第14天比较，P<0.05；△：与第21天比较，P<0.05；#：与同一时间点模型组A比较P<0.05。表4三组小鼠不同时间血红蛋白变化（g/L，±s，n=6）表5三组小鼠不同时间血小板变化（×109个/L，±s，n=6）注：与对照组比较，*P<0.05。图2各组小鼠血常规指标变化曲线图A.各组小鼠白细胞变化曲线图；B.各组小鼠血红蛋白变化曲线图；C.各组小鼠血小板变化曲线图。分组建模前2天第7天第14天第21天第28天对照组2.71±0.472.92±0.522.38±0.542.54±0.542.38±0.52模型组A2.67±0.634.41±1.82▲4.84±1.13▲*2.46±0.53☆7.01±0.91▲★☆△**模型组B3.06±1.153.96±1.433.71±0.93*#2.12±0.82★☆6.07±1.00▲★☆△**分组建模前2天第7天第14天第21天第28天对照组144.67±7.50131.17±12.57141.50±11.95139.50±8.50139.00±4.98模型组A153.50±12.57126.50±19.72151.67±22.72139.67±13.64142.00±21.42模型组B150.83±17.31142.33±17.50144.17±5.91132.83±21.28150.33±16.27分组建模前2天第7天第14天第21天第28天对照组1478.67±66.321422.50±178.321426.67±90.161453.17±83.491449.50±87.79模型组A1504.00±78.961464.83±84.401326.83±116.321219.00±253.261435.00±300.65模型组B1508.81±202.971478.72±144.311192.50±219.241098.00±147.57*1202.51±189.85
【参考文献】：
期刊论文
[1]常规剂量DA方案治疗老年急性髓细胞白血病的近期疗效及心血管副作用分析[J]. 黄建清,罗必华,游崇登,上官晓辉. 心血管病防治知识(学术版). 2019(21)
[2]柔红霉素联合阿糖胞苷治疗急性髓系白血病的临床价值分析[J]. 李彩霞,马佳,郭书芳. 四川解剖学杂志. 2019(01)
[3]NOD/SCID免疫缺陷小鼠白血病模型的复制及其鉴定[J]. 叶振策,李渊,韩艳君,周玥,丁继超. 大理大学学报. 2018(08)
[4]CAG预激方案与常规化疗治疗老年初治急性髓性细胞白血病（AML）的疗效[J]. 王晓娜. 中国医药指南. 2018(06)
[5]不同剂量去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷治疗老年初治急性髓系白血病临床分析[J]. 朱雯雯,胡益鹏. 现代实用医学. 2017(09)
[6]嵌合抗原受体T细胞治疗的临床应用[J]. 段轶鋆,李振华. 肿瘤研究与临床. 2017 (07)
[7]NKT细胞激活剂α-Galcer对小鼠红白血病的抑制作用[J]. 孙贺军,王佳骥,王姗,刘遄,陈光,左蓉洁,闫振宇,郑全辉. 华北理工大学学报(医学版). 2017(03)
[8]sCD40L对白血病Kasumi-1细胞的影响及机制[J]. 任明强,陈琦,章莹. 上海交通大学学报(医学版). 2017(01)
[9]可溶性CD40配体对白血病HL-60细胞Caspase-3及Caspase-8表达的影响[J]. 封忠昕,陈琦,王永伦,闵迅,张振东. 中华肿瘤防治杂志. 2016(19)
[10]CAR-T抗肿瘤研究的现状及展望[J]. 郑敏,张岚. 山东大学学报(医学版). 2016(11)
本文编号：3230323
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各小组A.对照组小鼠代表性图片；B.模型A组小
遵义医科大学硕士学位论文廖晓敏16图1各小组小鼠终末期一般情况A.对照组小鼠代表性图片；B.模型A组小鼠代表性图片；C.模型B组小鼠代表性图片。3.2生存时间A组小鼠分别于接种后30和36d各处死2只，32和33d各处死1只，B组小鼠于接种后33和37d各处死1只，35和39d各处死2只。结果见表2。表2三组小鼠处死时间及只数（只，n=6）3.3血常规的变化模型A、B组小鼠于建模7d后出现白细胞数升高，建模14d后与对照组比较，模型组小鼠白细胞数明显升高，差异有统计学意义（P<0.05），其中以1×107/只的模型A组最为显著；此时模型A与模型B组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；21d后血常规提示各模型组白细胞数均降低，考虑此时小鼠处于骨髓抑制期或其他原因引起，具体原因值得以后进一步深入研究；在建模28d后模型组小鼠白细胞数明显高于对照组（P<0.01），各模型组间差异无显著性；模型A组在建模第7d、14d、28d与建模前相比，差异有统计学意义（P<0.05）；模型B组在建模第28d与建模前比较，差异有统计学意义（P<0.05），结果见表3；模型组小鼠与对照组小鼠比较，血红蛋白变化无明显统计学意义且各组小鼠之间血红蛋白随时间变化也无明显统计学意义，结果见表4；建模14d后，模型组血小板开始减低，但与对照组比较无统计学意义，第21d模型B组小鼠血小板与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05），结果见表5。各组小鼠血常规各项分组3031323334353637383940对照组———————————模型组A2112模型组B1212
遵义医科大学硕士学位论文廖晓敏17指标变化曲线图见图2。表3三组小鼠不同时间白细胞变化（×109个/L，±s，n=6）注：同一时间点与对照组比较，*P<0.05,**P<0.01.。▲：与建模前2天比较，P＜0.05；★:与第7天比较，P<0.05；☆：与第14天比较，P<0.05；△：与第21天比较，P<0.05；#：与同一时间点模型组A比较P<0.05。表4三组小鼠不同时间血红蛋白变化（g/L，±s，n=6）表5三组小鼠不同时间血小板变化（×109个/L，±s，n=6）注：与对照组比较，*P<0.05。图2各组小鼠血常规指标变化曲线图A.各组小鼠白细胞变化曲线图；B.各组小鼠血红蛋白变化曲线图；C.各组小鼠血小板变化曲线图。分组建模前2天第7天第14天第21天第28天对照组2.71±0.472.92±0.522.38±0.542.54±0.542.38±0.52模型组A2.67±0.634.41±1.82▲4.84±1.13▲*2.46±0.53☆7.01±0.91▲★☆△**模型组B3.06±1.153.96±1.433.71±0.93*#2.12±0.82★☆6.07±1.00▲★☆△**分组建模前2天第7天第14天第21天第28天对照组144.67±7.50131.17±12.57141.50±11.95139.50±8.50139.00±4.98模型组A153.50±12.57126.50±19.72151.67±22.72139.67±13.64142.00±21.42模型组B150.83±17.31142.33±17.50144.17±5.91132.83±21.28150.33±16.27分组建模前2天第7天第14天第21天第28天对照组1478.67±66.321422.50±178.321426.67±90.161453.17±83.491449.50±87.79模型组A1504.00±78.961464.83±84.401326.83±116.321219.00±253.261435.00±300.65模型组B1508.81±202.971478.72±144.311192.50±219.241098.00±147.57*1202.51±189.85
【参考文献】：
期刊论文
[1]常规剂量DA方案治疗老年急性髓细胞白血病的近期疗效及心血管副作用分析[J]. 黄建清,罗必华,游崇登,上官晓辉. 心血管病防治知识(学术版). 2019(21)
[2]柔红霉素联合阿糖胞苷治疗急性髓系白血病的临床价值分析[J]. 李彩霞,马佳,郭书芳. 四川解剖学杂志. 2019(01)
[3]NOD/SCID免疫缺陷小鼠白血病模型的复制及其鉴定[J]. 叶振策,李渊,韩艳君,周玥,丁继超. 大理大学学报. 2018(08)
[4]CAG预激方案与常规化疗治疗老年初治急性髓性细胞白血病（AML）的疗效[J]. 王晓娜. 中国医药指南. 2018(06)
[5]不同剂量去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷治疗老年初治急性髓系白血病临床分析[J]. 朱雯雯,胡益鹏. 现代实用医学. 2017(09)
[6]嵌合抗原受体T细胞治疗的临床应用[J]. 段轶鋆,李振华. 肿瘤研究与临床. 2017 (07)
[7]NKT细胞激活剂α-Galcer对小鼠红白血病的抑制作用[J]. 孙贺军,王佳骥,王姗,刘遄,陈光,左蓉洁,闫振宇,郑全辉. 华北理工大学学报(医学版). 2017(03)
[8]sCD40L对白血病Kasumi-1细胞的影响及机制[J]. 任明强,陈琦,章莹. 上海交通大学学报(医学版). 2017(01)
[9]可溶性CD40配体对白血病HL-60细胞Caspase-3及Caspase-8表达的影响[J]. 封忠昕,陈琦,王永伦,闵迅,张振东. 中华肿瘤防治杂志. 2016(19)
[10]CAR-T抗肿瘤研究的现状及展望[J]. 郑敏,张岚. 山东大学学报(医学版). 2016(11)
本文编号：3230323
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