异丙酚预处理通过NLRP3/caspase-1信号通路减轻大鼠肠缺血再灌注损伤作用及机制
发布时间：2021-06-16 15:51
目的:探讨异丙酚预处理是否能通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路激活,进而减轻肠缺血再灌注损伤。方法:选取48只雄性成年SD大鼠随机分为三组:假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）和异丙酚组（P组）,每组16只,体重210-250g。使用无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉90min,再灌注2h,建立肠I/R模型。P组在夹闭肠系膜上动脉前30 min,经腹腔注射异丙酚100mg/kg;Sham组和I/R组腹腔注射等体积脂肪乳（异丙酚的溶剂）。通过苏木素-伊红染色（hematoxylin and eosin,HE）观察小肠粘膜的形态学变化,并进行肠组织Chiu’s评分;采用蛋白质印迹法（Western Blot）检测NLRP3、caspase-1 p20、occludin、cleaved caspase-3、bax和bcl-2蛋白表达水平;通过免疫荧光（Immunofluorescence）染色观察肠道NLRP3、caspase-1 p20蛋白的表达情况;采用原位末端标记法（terminal dexynucleotidyl transferase-mediated dUTP n...
【文章来源】：西南医科大学四川省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠小肠缺血再灌注模型
西南医科大学硕士学位论文-27-图3.WesternBlot检测各组大鼠小肠组织蛋白表达情况。与Sham组比较，**P＜0.01；与I/R组比较，##P＜0.01。Figure3.Theproteinexpressioninsmallintestinaltissuesofratsineachgroup.Datawereexpressedasmean±SD.**P＜0.01vs.Shamgroup,##P＜0.01vs.I/Rgroup.4免疫荧光检测大鼠小肠相关蛋白表达为了进一步验证异丙酚能否通过抑制肠道NLRP3/caspase-1信号通路激活，从而减轻肠I/R所致的肠损伤，我们运用免疫荧光技术对小肠组织的冰冻切片进行了荧光染色，检测肠道NLRP3和caspase-1p20的蛋白表达情况。如图4可见，免疫荧光结果进一步提示，与Sham组比较，I/R组肠道NLRP3和caspase-1p20的表达明显增强，平均荧光强度显著提高（P＜0.01）。与I/R组比较，P组的NLRP3和caspase-1p20的表达明显减弱，平均荧光强度显著下降（P＜0.01）。与Sham组比较，P组NLRP3和caspase-1p20的表达有所增强，平均荧光强度有所提高（P＜0.01）。
西南医科大学硕士学位论文-28-图4.A和B分别表示大鼠肠缺血再灌注后小肠组织NLRP3和caspase-1p20（绿色）的免疫荧光染色（×200）。C和D分别表示NLRP3和caspase-1p20的平均荧光强度。与Sham组比较，**P＜0.01；与I/R组比较，##P＜0.01。Figure4.AshowedtheimmunofluorescencestainingofNLRP3(green)insmallintestinaltissuesofratsafterischemia-reperfusionandBshowedtheimmunofluorescencestainingofcaspase-1p20(green).CandDrespectivelyrepresentedtheaverageintensityoffluorescenceofNLRP3andcaspase-1p20.Magnification:×200.Scalebar=50um.Datawereexpressedasmean±SD.**P＜0.01vs.Shamgroup,##P＜0.01vs.I/Rgroup.5TUNEL检测大鼠肠道细胞凋亡情况为了了解各组大鼠肠I/R后肠道细胞凋亡情况，我们运用TUNEL检测了小肠粘膜上皮，用蓝色荧光标记细胞核，用红色荧光标记肠道
【参考文献】：
期刊论文
[1]缺血再灌注条件下BMP2/4参与肠黏膜屏障损伤的研究[J]. 陈康,陈应果,王洪波,张朝军,罗彬予,李科. 局解手术学杂志. 2019(02)
[2]肠缺血再灌注损伤研究进展[J]. 陈诗哲,王涌钢,林春水. 现代医药卫生. 2017(13)
[3]异丙酚对肠缺血再灌注大鼠脑损伤的影响[J]. 冼东锋,周军,张涛,郭俊英,李偲,黄文起. 中华麻醉学杂志. 2016 (02)
[4]bcl-2、bax、caspase-3在细胞凋亡中的作用及其关系[J]. 董雅洁,高维娟. 中国老年学杂志. 2012(21)
[5]异丙酚对大鼠肠缺血再灌注时肠粘膜细胞凋亡的影响[J]. 刘克玄,冯霞,柳垂亮,吴伟康,黄文起. 中华麻醉学杂志. 2007 (07)
本文编号：3233354
【文章来源】：西南医科大学四川省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠小肠缺血再灌注模型
西南医科大学硕士学位论文-27-图3.WesternBlot检测各组大鼠小肠组织蛋白表达情况。与Sham组比较，**P＜0.01；与I/R组比较，##P＜0.01。Figure3.Theproteinexpressioninsmallintestinaltissuesofratsineachgroup.Datawereexpressedasmean±SD.**P＜0.01vs.Shamgroup,##P＜0.01vs.I/Rgroup.4免疫荧光检测大鼠小肠相关蛋白表达为了进一步验证异丙酚能否通过抑制肠道NLRP3/caspase-1信号通路激活，从而减轻肠I/R所致的肠损伤，我们运用免疫荧光技术对小肠组织的冰冻切片进行了荧光染色，检测肠道NLRP3和caspase-1p20的蛋白表达情况。如图4可见，免疫荧光结果进一步提示，与Sham组比较，I/R组肠道NLRP3和caspase-1p20的表达明显增强，平均荧光强度显著提高（P＜0.01）。与I/R组比较，P组的NLRP3和caspase-1p20的表达明显减弱，平均荧光强度显著下降（P＜0.01）。与Sham组比较，P组NLRP3和caspase-1p20的表达有所增强，平均荧光强度有所提高（P＜0.01）。
西南医科大学硕士学位论文-28-图4.A和B分别表示大鼠肠缺血再灌注后小肠组织NLRP3和caspase-1p20（绿色）的免疫荧光染色（×200）。C和D分别表示NLRP3和caspase-1p20的平均荧光强度。与Sham组比较，**P＜0.01；与I/R组比较，##P＜0.01。Figure4.AshowedtheimmunofluorescencestainingofNLRP3(green)insmallintestinaltissuesofratsafterischemia-reperfusionandBshowedtheimmunofluorescencestainingofcaspase-1p20(green).CandDrespectivelyrepresentedtheaverageintensityoffluorescenceofNLRP3andcaspase-1p20.Magnification:×200.Scalebar=50um.Datawereexpressedasmean±SD.**P＜0.01vs.Shamgroup,##P＜0.01vs.I/Rgroup.5TUNEL检测大鼠肠道细胞凋亡情况为了了解各组大鼠肠I/R后肠道细胞凋亡情况，我们运用TUNEL检测了小肠粘膜上皮，用蓝色荧光标记细胞核，用红色荧光标记肠道
【参考文献】：
期刊论文
[1]缺血再灌注条件下BMP2/4参与肠黏膜屏障损伤的研究[J]. 陈康,陈应果,王洪波,张朝军,罗彬予,李科. 局解手术学杂志. 2019(02)
[2]肠缺血再灌注损伤研究进展[J]. 陈诗哲,王涌钢,林春水. 现代医药卫生. 2017(13)
[3]异丙酚对肠缺血再灌注大鼠脑损伤的影响[J]. 冼东锋,周军,张涛,郭俊英,李偲,黄文起. 中华麻醉学杂志. 2016 (02)
[4]bcl-2、bax、caspase-3在细胞凋亡中的作用及其关系[J]. 董雅洁,高维娟. 中国老年学杂志. 2012(21)
[5]异丙酚对大鼠肠缺血再灌注时肠粘膜细胞凋亡的影响[J]. 刘克玄,冯霞,柳垂亮,吴伟康,黄文起. 中华麻醉学杂志. 2007 (07)
本文编号：3233354
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/3233354.html
最近更新
教材专著
