机械敏感性通道蛋白Piezo1在大鼠肺内外动脉平滑肌细胞的表达及功能研究

发布时间：2021-06-20 16:12

　　[研究背景]肺动脉高压是严重的不可逆的致死性疾病,而血管重塑是肺动脉高压发生发展过程中的重要病理生理过程——肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs）的增殖和迁移可导致肺动脉中层肌层增厚以及平滑肌向非肌性毛细血管内延伸。细胞内钙稳态在肺动脉平滑肌细胞的收缩、增殖和迁移中有重要意义[31][32]。Piezo1机械敏感性通道作为非选择性阳离子通道蛋白之一,对Ca2+有透过性,而Ca2+在血管的生理病理中有着非常关键的调节作用。同时已有研究证实,Piezo1参与血管内皮细胞及平滑肌细胞的生理病理过程,现如今对Piezo1与血管的研究大多聚焦在血管内皮上,在动脉平滑肌方面,已有证实其参与小动脉的结构重塑。除此以外,Piezo1还参与了压力感受反射过程,直接参与人体血压的调控[7]。另外,在高血压患者中,Piezo1开放增加对动脉平滑肌细胞的增殖作用,进而影响其直径和血管壁厚度。既往有学者认为,肺动脉高压的重塑仅在中小动脉显著,是因为SOCC及ROCC在近心和末梢肺动脉动脉平滑肌上的表达有差异,进而对钙离子调控的能力有差异,特... 

【文章来源】：广州医科大学广东省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．１．７＾０７基因在肺内外动脉平滑肌层及原代平滑肌细胞中的表达情况柱状图

达???２．大鼠肺动脉平滑肌层及原代平滑肌细胞Ｐｉｅｚｏｌ的表达??２．１．大鼠肺动脉平滑肌层及原代平滑肌细胞ｍＲＮＡ的表达??为确定肺内外动脉平滑肌层及原代细胞户ｉｅｚｏ？基因表达情况，首先在体式显微??镜下将大鼠肺动脉肺剥离，取平滑肌层，分别进行组织ｍＲＮＡ提取及原代细胞培养后??的细胞ｍＲＮＡ提取，而后利用实时荧光定量ＰＣＲ实验检测肺内、肺外动脉平滑肌层及??肺内、肺外动脉平滑肌细胞Ｐｉｅｚｏｉ基因表达水平，结果显示肺内外动脉平滑肌层??Ｐｉｅｚｏｉ基因表达无显著差异（图２．１Ａ），原代平滑肌细胞结果亦类似（图２．１Ｂ）。??Ａ?Ｂ??ｍＲＮＡ?ｏｆ?Ｐｉｅｚｏｌ?ｉｎ?ＰＡ?ｍＲＮＡ?ｏｆ?Ｐｉｅｚｏｌ?ｉｎ?ＰＡＳＭＣｓ??０．００００１?〇１??１．５ｘ１〇－？－，?——??＞?ｍ?０．０００００８－?？??ａ＞?＂ｖ）?■??？?－ｉ?〇??」。１ｘ１〇ｔ?＾?０．０００００６－?——?１?＾??｜ｉ?冬?■丨丨■??Ｅ?｜?????＾?？?０．０００００４－?１１??ｏ?１?５，１０７－?？?Ｓ?ｉ?－ｒ？－?—??ｌｉ?＾?ｉ００００００２－?＿??０?－Ｉ??．???１??〇．〇〇〇〇〇〇?－Ｉ??１????１?１???图２．１．７＾０７基因在肺内外动脉平滑肌层及原代平滑肌细胞中的表达情况柱状图。??ＥＰ：Ｅｘｔｒａ?ｐｕｌｍｏｎａｒｙ；?ＩＰ：?Ｉｎｔｒａ?ｐｕｌｍｏｎａｒｙ．??（Ａ）肺内外动脉平滑肌组织Ｐ／ｍｉ?ｍＲＮＡ相对表达情况（ｎ＝６）；??（Ｂ）肺内外动脉原代平滑肌细胞Ｐ／ｅｚｏＪｍＲＮＡ相对表达

?广州医科大学硕士学位论文???ＥＰ：Ｅｘｔｒａ?ｐｕｌｍｏｎａｒｙ；?ＩＰ：?Ｉｎｔｒａ?ｐｕｌｍｏｎａｒｙ．肺内外动脉平滑肌层Ｐｉｅｚｏｌ蛋白表达情况（Ａ）及灰度分??析柱状图（Ｂ），ｎ＝４，叩＜０．０５。??２．３．大鼠肺动脉原代平滑肌细胞Ｐｉｅｚｏｌ蛋白的表达??在血管组织上确定Ｐｉｅｚｏｌ蛋白在肺内动脉平滑肌层表达高于肺外，现确定在离??体细胞上两者表达是否也具有差异性，为此，首先在体式显微镜下将大鼠肺动脉剥??离，取平滑肌层进行肺动脉原代平滑肌细胞培养，提取细胞总蛋白后，利用免疫印??迹实验定量肺内、肺外原代动脉平滑肌细胞Ｐｉｅｚｏｌ蛋白表达量，结果显示肺内动脉??原代平滑肌细胞Ｐｉｅｚｏｌ蛋白表达高于肺外。??

【参考文献】：
期刊论文
[1]机械敏感离子通道Piezo1在心血管系统中的作用[J]. 黄鹏,尚画雨,李顺昌,苏全生.  生命的化学. 2020(03)
[2]Piezo机械敏感性离子通道研究现状及其在骨与关节组织的研究进展[J]. 闫亮,姜金,万浪,马崇文,杨信信,夏亚一.  中国医学物理学杂志. 2018(08)
[3]Piezo机械敏感性离子通道研究进展[J]. 宋朋飞,蒋诗超,程艳彬,林志刚,张昊,房敏.  中华中医药杂志. 2017(04)



本文编号：3239521