隐丹参酮对Hepal-6细胞及其小鼠皮下移植瘤的抑制作用与机制的研究

发布时间：2021-06-26 18:56

　　目的研究中药单体隐丹参酮对肝癌Hepa1-6细胞的抑制作用,建立Hepa1-6细胞小鼠皮下移植瘤模型,采用腹腔注射的给药方式来检测隐丹参酮对肝癌移植瘤体的抑制作用。在体外,培养Hepa1-6细胞,采用流式细胞术、蛋白质印迹法及RT-PCR等方法检测隐丹参酮对该细胞的增殖及凋亡的作用。进一步探讨隐丹参酮抗肝癌作用的相关机制。方法1.使用CCK-8法检测隐丹参酮对Hepa1-6细胞增殖活力的影响;流式细胞仪分析隐丹参酮对Hepa1-6细胞凋亡与周期的影响;蛋白质免疫印迹法检测隐丹参酮对Hepa1-6细胞内活化的多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶Cleaved-PARP、Cyclin D1、P21和P53表达的影响;RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因P53、P21及Caspase9的表达。2.Hepa1-6细胞株于37℃,5%CO₂培养箱中培养。18只C57BL/6小鼠右侧背部皮下接种Hepa1-6肿瘤细胞,建立小鼠肝癌皮下移植瘤模型,随机分成3组,每组6只。分别为模型组、隐丹参酮40mg/kg组及隐丹参酮20mg/kg组。皮下移植瘤模型成瘤后,每隔一天给一次药,给药周期是2周,... 

【文章来源】：山西中医药大学山西省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

模型组和给药组小鼠平均体重线性分析图

山西中医药大学2020届硕士学位论文10图1模型组和给药组小鼠平均体重线性分析图3.2隐丹参酮对Hepa1-6肝癌移植瘤的抑制作用给药结束后，对小鼠进行安乐死，取出各组瘤体进行拍照，结果如图2所示：直接观察到隐丹参酮40mg/kg组肿瘤体积明显小于其他组。将各组肿瘤终体积进行组间比较，得出随着给药剂量的增加，肿瘤体积逐渐减小，差异具有显著性（p<0.05）。瘤体体积比较见图3。图2各组瘤体比较图注：隐丹参酮40mg/kg组有一个缺失是瘤体经2周给药后最终消失，并非死亡

隐丹参酮对Hepa1-6细胞及其小鼠皮下移植瘤的抑制作用与机制的研究11图3各组小鼠瘤体终体积比较图注：(A)隐丹参酮20mg/kg组，(B)隐丹参酮40mg/kg组，(C)模型组，*P<0.05vsControl，**P<0.01vsControl如表1所示，采用方差分析检验之后，模型组、隐丹参酮40mg/kg组及隐丹参酮20mg/kg组比较差异具有统计学意义（p<0.05），隐丹参酮40mg/kg组及20mg/kg组抑瘤率分别为55.83%和27.91%，经查阅文献[7]，抑瘤率≥40%，则认为隐丹参酮40mg/kg组对肿瘤具有一定疗效。表1隐丹参酮对各组小鼠肿瘤生长抑制率（XS，n=6）组别n（只）抑瘤率（%）模型组隐丹参酮40mg/kg组隐丹参酮20mg/kg组666-55.8327.91▲注：与模型组相比p<0.05，▲p<0.013.3隐丹参酮对凋亡相关蛋白表达的影响蛋白免疫印迹实验结果如图4所示，隐丹参酮40mg/kg组与模型组比较，隐丹参酮促进CleavedPARP、PARP及Caspase9凋亡蛋白水平的表达，抑制Bcl-2蛋白水平的表达。

【参考文献】：
期刊论文
[1]隐丹参酮诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究[J]. 周南阳,赵虹.  中国现代医生. 2017(34)
[2]肿瘤微环境与免疫治疗研究进展[J]. 陈雪曼,宋尔卫.  生物化学与生物物理进展. 2017(08)
[3]丹参活性成分及药理作用研究进展[J]. 姜雪,史磊.  药学研究. 2017(03)
[4]莪术主要单体成分抗炎、抗肿瘤作用研究进展[J]. 赵志梅,张立杰,夏天,肖志.  药物评价研究. 2017(01)
[5]隐丹参酮抑制恶性神经胶质瘤细胞C6增殖及对JAK2-STAT3信号通路的影响[J]. 唐焕焕,沈晓燕,段小群,徐庆,苑博,张嫦丽,吕良.  安徽医科大学学报. 2016(06)
[6]免疫检查点阻断用于肿瘤治疗的研究进展[J]. 卢伸,苏丹.  实用肿瘤杂志. 2016(01)
[7]隐丹参酮对脂多糖诱导肝硬化大鼠肝性脑病的改善作用研究[J]. 方阅,朱蓓琳,张渊.  现代药物与临床. 2016(01)
[8]隐丹参酮对肾癌干细胞增殖和凋亡的影响[J]. 冯敏,贾明华.  中国组织工程研究. 2016(01)
[9]隐丹参酮对白血病细胞伊马替尼敏感性和P-糖蛋白表达作用的研究[J]. 葛宇清,程汝滨,杨波,黄真,陈喆.  中国中药杂志. 2015(12)
[10]生物信息学方法分析人肾细胞癌中潜在的miRNAs生物标志物和其调控的关键通路[J]. 李伟,李晓宇,黄建华,王光春,彭波,刘敏,许云飞,姚旭东,郑军华.  临床泌尿外科杂志. 2015(06)



本文编号：3251892