低表达的生物钟基因Per1通过AKT/mTOR信号通路抑制细胞自噬性凋亡从而促进口腔鳞癌发展

发布时间：2021-07-03 05:13

　　背景:目前的研究表明,生物钟基因Per1在多种肿瘤中表达下调,在促进肿瘤进展中发挥重要作用。然而,生物钟基因Per1在肿瘤中的生物学功能和作用机制尚不清楚。目的:研究口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中生物钟基因Per1的表达水平及其表达改变的临床意义,并探索Per1表达在体外和体内的生物学功能。方法:收集有完整随访资料和临床资料的86例OSCC患者癌及癌旁病理组织标本,用免疫组化检测86例OSCC患者癌组织及癌旁组织标本中Per1的表达水平,Per1表达差异对OSCC患者预后的影响采用Kaplan-Meier生存分析和log-rank检验,Per1的表达与OSCC患者临床病理参数的相关性分析采用卡方检验。在OSCC细胞中分别用过表达Per1的慢病毒和Per1-shRNA慢病毒对Per1进行过表达和敲减后,在电镜下观察自噬体形成,用MTT实验和CCK8实验检测细胞增殖,细胞凋亡检测使用Tunel实验和流式细胞实验,LC3B、Beclin1、P62、p-mTOR、mTOR、p-AKT、AKT蛋白的表达水平检测使用western blotting... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

生物钟基因Per1在口腔鳞癌组织和细胞中表达降低

重庆医科大学硕士研究生学位论文41图2.过表达和沉默Per1后，OSCC细胞增殖和凋亡的变化。FIGURE2.ChangesintheproliferationandapoptosisofOSCCcellsaftertheoverexpressionandsilencingofPer1.A-B.稳转过表达和沉默Per1OSCC细胞的效率检测表明，Per1过表达SCC15细胞中，Per1mRNA和蛋白表达水平显著升高；Per1敲减的TSCCA细胞中，Per1mRNA和蛋白表达显著降低。C.流式细胞实验检测结果显示：SCC15细胞中过表达Per1后细胞凋亡指数显著升高，TSCCA细胞中沉默Per1后细胞凋亡指数显著降低。D.TUNEL实验检测发现，在TSCCA细胞中沉默Per1后Tunel阳性率明显降低，而在SCC15细胞中过表达Per1后Tunel阳性率明显升高。E-F.MTT实验和CCK8实验结果显示：在SCC15细胞中过表达Per1后增殖能力明显降低，沉默Per1的TSCCA细胞的增殖能力明显升高。*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；****P<0.0001。

重庆医科大学硕士研究生学位论文42图3.过表达和沉默Per1后，OSCC细胞自噬和AKT/mTOR通路活性的变化。FIGURE3.ChangesinautophagyandAKT/mTORpathwayactivityinOSCCcellsaftertheoverexpressionandsilencingofPer1.A.TEM实验检测结果表明：过表达Per1的SCC15细胞中的自噬小体密度显著增加，沉


本文编号：3261937