ETBR过表达调节T细胞归巢相关分子治疗大鼠自身免疫性心肌炎及机制探讨
发布时间：2021-07-11 11:34
目的:建立实验性自身免疫性心肌炎大鼠模型。经大鼠尾静脉注射内皮素B受体（endothelin B receptor,ETBR）过表达慢病毒干预自身免疫性心肌炎,观察ETBR过表达对自身免疫性心肌炎的影响。在此基础上,探讨ETBR过表达调控ICAM-1等T淋巴细胞归巢相关分子治疗自身免疫性心肌炎的相关机制。方法:制备ETBR基因过表达慢病毒。从购买的24只雄性Lewis大鼠中随机选出6只正常大鼠（NC组）,剩余18只大鼠在第0天（免疫注射当天）及第7天分别注射猪心肌肌球蛋白,建立实验性自身免疫性心肌炎大鼠模型。初次注射心肌肌球蛋白的18只大鼠随机分为3组:实验性自身免疫性心肌炎组（EAM组）,ETBR基因过表达慢病毒自身免疫性心肌炎组（ETBR-oe组）和空载慢病毒自身免疫性心肌炎对照组（GFP组）。ETBR-oe组大鼠在初次免疫当天,将1×108 TU慢病毒/只（200μL）注入大鼠尾静脉内,GFP组大鼠注入相同剂量的空载慢病毒,NC组和EAM组注入相同剂量的生理盐水。大鼠初次免疫后第21天,进行心脏超声心动图检测评价心功能变化;当天处死大鼠取血和心脏标本;ELI...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠心肌组织病理学检查（HE染色，×200）
第3章实验结果18表2第21天大鼠心肌组织炎症评分情况（均数±标准差）组别NCEAMETBR-oeGFP炎症评分03.28±0.46*1.56±0.41**3.17±0.49△注：NC：正常对照组；EAM：实验性自身免疫性心肌炎组；ETBR-oe：ETBR基因过表达慢病毒组；GFP：空载慢病毒对照组。*：与正常对照组比较，P<0.05；**：与实验性自身免疫性心肌炎组比较，P<0.05；△：与实验性自身免疫性心肌炎组比较，P>0.05。3.4免疫组化法检测蛋白分布情况免疫组化阳性染色结果显示为在细胞膜、细胞浆及部分间质中可见棕黄色颗粒，蓝色为细胞核，特定蛋白表达越多，棕黄色颗粒颜色越深。初次免疫后第21天，免疫组化示内皮素B受体主要表达于心肌细胞膜、细胞浆中。内皮素B受体蛋白表达在EAM组心肌组织中染色深度高于正常对照组，但ETBR-oe组又明显高于EAM组，GFP组与EAM组颜色深度无明显差异。细胞间黏附分子-1在EAM组的心肌组织中染色深度明显高于正常对照组，相比于EAM组ETBR-oe组明显降低，GFP组与EAM组颜色深度无明显差异。连接黏附分子-C、E-选择素在EAM组、ETBR-oe组、GFP组三组心肌炎大鼠心肌组织中的染色无明差异，但棕黄色颗粒颜色深度均高于正常对照组。图2大鼠心肌组织免疫组化（IHC×400）
本文编号：3278017
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠心肌组织病理学检查（HE染色，×200）
第3章实验结果18表2第21天大鼠心肌组织炎症评分情况（均数±标准差）组别NCEAMETBR-oeGFP炎症评分03.28±0.46*1.56±0.41**3.17±0.49△注：NC：正常对照组；EAM：实验性自身免疫性心肌炎组；ETBR-oe：ETBR基因过表达慢病毒组；GFP：空载慢病毒对照组。*：与正常对照组比较，P<0.05；**：与实验性自身免疫性心肌炎组比较，P<0.05；△：与实验性自身免疫性心肌炎组比较，P>0.05。3.4免疫组化法检测蛋白分布情况免疫组化阳性染色结果显示为在细胞膜、细胞浆及部分间质中可见棕黄色颗粒，蓝色为细胞核，特定蛋白表达越多，棕黄色颗粒颜色越深。初次免疫后第21天，免疫组化示内皮素B受体主要表达于心肌细胞膜、细胞浆中。内皮素B受体蛋白表达在EAM组心肌组织中染色深度高于正常对照组，但ETBR-oe组又明显高于EAM组，GFP组与EAM组颜色深度无明显差异。细胞间黏附分子-1在EAM组的心肌组织中染色深度明显高于正常对照组，相比于EAM组ETBR-oe组明显降低，GFP组与EAM组颜色深度无明显差异。连接黏附分子-C、E-选择素在EAM组、ETBR-oe组、GFP组三组心肌炎大鼠心肌组织中的染色无明差异，但棕黄色颗粒颜色深度均高于正常对照组。图2大鼠心肌组织免疫组化（IHC×400）
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