MicroRNA-199a-3p调控PI3K/Akt/mTOR信号通路对HELF细胞表型转化的作用及机制

发布时间：2021-07-30 19:27

　　研究目的:探讨microRNA-199a-3p（miR-199a-3p）通过调控PI3K/Akt/m TOR信号通路参与Human Embryonic Lung Fibroblasts（HELF）细胞表型转化。研究方法:1.实验分Control组和TGF-β1组,TGF-β1组单独使用TGF-β1诱导HELF细胞表型转化模型,Control组给予等量含10%FBS（fetal bovine serum）的DMEM培养基。Western Blot检测α-SMA蛋白在两组细胞中表达的变化。2.对HELF细胞表型转染mi R-199a-3p inhibitors NC及miR-199a-3p inhibitors。实验分6组:空白对照（control）组、TGF-β1组、miR-199a-3p inhibitors NC组、miR-199a-3p inhibitors NC+TGF-β1组、miR-199a-3p inhibitors组、miR-199a-3p inhibitors+TGF-β1组。3.qRT-PCR技术检测以上6组细胞中miR-199a-3p的表达。4.Western Bl... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

WesternBlot检测α-SMA在2组HELF细胞中的表达（*为P值缩写）

第3章结果16细胞中mi-199a-3p表达升高。见图3.2。图3.2qRT-PCR检测6组HELF细胞中miR-199a-3p的表达（*为P值缩写）3.3WesternBlot法检测6组HELF细胞中目标蛋白的表达经TGF-β1处理后HELF细胞的α-SMA、CollagnI蛋白与正常对照组相比表达明显增加，差异具统计学意义（分别为P＜0.01，P＜0.001），再次证明HELF细胞表型转化模型成功建立。miR-199a-3pinhibitors+TGF-β1组的HELF细胞α-SMA、CollagnI蛋白表达较miR-199a-3pinhibitorsNC+TGF-β1组明显减低，差异有统计学意义（分别为P＜0.05，P＜0.001）。见图3.3。表明：转染miR-199a-3pinhibitors能逆转TGF-β1的促α-SMA、CollagenI蛋白表达作用，miR-199a-3p参与HELF细胞表型转化并发挥重要作用。miR-199a-3p能通过调节TGF-β1诱导作用调节HELF细胞表型转化。

WesternBlot法检测6组HELF细胞中α-SMA、CollagnI蛋白的表达（*为P值缩写）

【参考文献】：
期刊论文
[1]TGF-β信号通路与肺纤维化治疗的研究进展[J]. 李俸敏,王火.  武警后勤学院学报(医学版). 2017(02)

博士论文
[1]基于自噬相关PTEN/mTOR信号通路探讨补阳还五汤对博来霉素所致小鼠肺纤维化干预机制研究[D]. 潘怡.成都中医药大学 2019

硕士论文
[1]脂多糖诱导的ALI/ARDS小鼠肺组织microRNA表达谱的初步研究[D]. 卿娣.南方医科大学 2013



本文编号：3311989