五子衍宗丸对帕金森病模型小鼠的防治作用及机制研究

发布时间：2021-08-06 02:56

　　目的:本研究应用五子衍宗丸（WYP）干预MPTP诱导的帕金森病（PD）小鼠模型,观察WYP对PD的治疗效果及其可能的作用机制,为今后应用WYP治疗PD提供科学的理论依据。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组和WYP治疗组。腹腔注射MPTP（d1:15mg/kg,d2:20mg/kg,d3-d7:30mg/kg）一周诱导建立经典小鼠PD模型。同时,正常组和模型组给予生理盐水50mL/kg/d灌胃,WYP治疗组给予WYP药液16g/kg/d灌胃,2次/d,持续两周。于每次注射MPTP后观察各组动物的一般行为学表现。实验周期第15天,采用步态实验、爬杆实验、胶布移除实验和旷场实验评价动物的运动功能、探索行为及焦虑情绪。通过免疫组化观察中脑黑质TH神经元,计数TH阳性细胞数。微量酶标法检测脑组织GSH、MDA含量。蛋白印迹检测脑组织中SOD和CAT的表达量;检测UPR信号传导通路相关蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4、p-IRE1α、XBP1、ATF6的变化以及ERS介导的凋亡途径相关蛋白CHOP、ASK1、p-JNK、Caspase-12、Caspase-9、Caspa... 

【文章来源】：山西中医药大学山西省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ERS应答启动机制胶质细胞的活化等作用改善PD小鼠运动功能，减少黑质DA能神经元的丢失，增加纹状体DA含量，对PD具有一定的防治作用

山西中医药大学2020届硕士学位论文10显著延长（P<0.001）；与模型组比较，WYP治疗组移除胶布用时明显缩短（P<0.01），前肢更加协调灵活。表4各组小鼠胶布移除时间比较（x±s；n=8）组别胶布移除时间（s）正常组9.42±0.10模型组19.79±1.58***WYP治疗组14.49±0.74△△注：与正常组比较，***P<0.001；与模型组比较，△△P<0.01。3.1.5WYP对PD模型小鼠旷场行为学表现的影响由系统最终生成的活动轨迹图可以看出，在新异环境中，正常小鼠（图2A）行动路线复杂多变且活动量多，遍布整个箱底，中央区活动量大，探究行为明显；与正常小鼠相比，模型组动物行动路线简单明了（图2B），活动量少且多沿敞箱底部四周贴壁运动，中央区运动路线清晰了然，探究行为亦明显减少，提示有明显的焦虑情绪；WYP治疗后小鼠活动量相比模型组增加，箱底轨运动迹分布较为均匀，中央区的自主活动和探究行为明显增多，焦虑情绪得到缓解，见图2C。图2各组小鼠旷场运动轨迹图差异用Smart3.0软件对上述自主活动行为做进一步的量化分析。如表5结果，与正常组比较，模型组小鼠移动总距离显著缩短（P<0.01），穿格次数减少、平均速度减慢、休息时间延长，差异明显（均P<0.05）；与模型组比较，WYP治疗组移动总距离显著增加（P<0.01），穿格次数增多、平均速度提高、休息时间减少，差异明显（均P<0.05）。提示WYP可增强小鼠自发活动能力。

五子衍宗丸对帕金森病模型小鼠的防治作用及机制研究11表5各组小鼠运动总距离、平均速度、休息时间、穿格次数比较（x±s，n=8）组别总距离（cm）平均速度（cm/s）休息时间（s）穿格次数（次）正常组1135±45.973.314±0.1539.83±3.12127±15.48模型组838.70±35.35**2.58±0.17*55.76±5.28*80.94±10.33*WYP治疗组1082±73.04△△3.07±0.14△42.74±2.96△109.6±7.41△注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，△P<0.05，△△P<0.01。3.2WYP对PD模型小鼠中脑黑质TH表达的影响图3A示，正常脑组织中，黑质区TH阳性神经元排列紧密，胞浆被染成棕黄色，颜色较深且染色均匀，MPTP损伤后，神经元呈散在排列，胞质染色较浅且颜色深浅不一；与模型组比较，WYP治疗有效改善了这一现象，其神经元排列相对整齐，胞浆染色亦变深。图3B结果中，与正常组比较，模型组TH阳性细胞数显著减少（P<0.001），神经元缺失严重，模型制备成功；与模型组比较，WYP治疗组TH阳性细胞数明显增多（P<0.01）。提示WYP治疗可明显减少或延缓PD小鼠黑质DA的丢失，可在一定程度上起到保护DA能神经元的作用。图3各组小鼠中脑黑质TH的表达差异注：（A）小鼠中脑黑质TH免疫组织化学染色（50×）。（B）中脑黑质TH阳性细胞计数。（与正常组比较，***P<0.001；与模型组比较，△△P<0.01；x±s；n=3）


本文编号：3324933