烟草烟雾诱发小鼠模拟干眼模型的病理变化
发布时间：2021-08-11 17:30
目的:探讨烟草烟雾诱发小鼠模拟干眼模型的病理改变。方法:选取18雄性无特定病原体c57BL小鼠（18-22g）,随机分为对照组、4周组和12周组,每组6只小鼠,其中6只进行4周的烟草烟雾干预,6只进行12周烟草烟雾干预。按每天20支香烟的设计进行烟草烟雾中毒,小鼠置于中毒柜,每天传输3次烟气（30分钟/次）。造模成功后,对每组进行泪膜破裂时间（BUT）实验、活体染色、炎症指数评分,荧光素染色和共聚焦显微镜观察。分别在第4周和第12周安乐死小鼠,取眼睛组织进行Western Blot检测、免疫荧光染色、TUNEL染色、过碘酸-希夫染色（PAS）和苏木精-伊红染色（HE）。结果:干预前三组间BUTs,FL评分,共聚焦显微镜观察无差异。干预后与其他两组相比12周组的BUTs相比其他两组显著下降,FL评分显著升高,角膜上皮细胞密度降低,基底上皮细胞密度增加,角膜上皮、结膜厚度增加,差异有统计学意义（P<0.05）。对照组和4周组角膜荧光素钠染色、共聚焦显微镜检查呈阴性,HE染色未发生显著改变。12周组呈阳性。12周组共聚焦显微镜观察显示角膜上皮细胞出现坏死和脱落,强烈反射,细胞间隙扩大,...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
应用激光共聚焦显微镜检测小鼠角膜神经纤维分布
第3章实验结果16第3章实验结果3.1泪膜稳定性和上皮损伤干预前三组间BUTs，FL评分比较差异无统计学意义（图1B，1C）。与对照组和4周干预组相比，12周组的BUTs和荧光素钠染色评分显着下降，差异有统计学意义（*P<0.05，图1B，1C）。4周组与对照组相比，的BUTs和荧光素钠染色评分差异不存在统计学意义（P>0.05，图1B，1C）。在烟草烟雾干预后，4周组和对照组的角膜荧光素钠染色呈阴性（图1A），12周组的角膜荧光素钠染色表现为阳性（图1A）。在12周组中出现泪膜/上皮损伤，可能是由于烟草烟雾的毒性（*P<0.05，图1A-C）图1.对照组、4周组和12周组实验前后眼表改变情况。A三组经荧光素钠染色后眼表情况：对照组和4周组未出现明显着染，仅出现极少点状染色，12周组小鼠角膜的上、下、鼻、颞四个象限均着染，且出现斑块状染色。B三组在实验前和实验后BUTs时间改变情况：对照组和4周组BUTs时间在实验前后未发生显著变化，12周组BUTs时间在进行烟草烟雾干预实验后出现明显的下降。C三组在实验前和实验后FL评分改变情况：对照组和4周组FL评分在实验前后未发生显著变化，12周组FL评分在实验后出现明显的上升。*表示实验后与实验前相比差异具有统计学意义（p<0.05）。
第3章实验结果18图2.对照组、4周组和12周组小鼠角膜上皮共聚焦显微镜下观察的改变情况代表性图像。A三组共聚焦显微镜下表层上皮细胞观察情况：对照组和4周组表层上皮细胞未出现明显异常。在12周组中，观察图像显示病灶出现坏死和角膜上皮细胞脱落（红色箭头），并且其细胞出现强烈反射（绿色箭头）。B三组共聚焦显微镜下基底上皮细胞观察情况：对照组和4周组基底上皮细胞未出现明显异常。在12周组中，观察图像显示出现具有超反射核的局灶性基底上皮细胞（绿色箭头）。C三组表层上皮细胞数目比较：对照组和4周组的表层上皮细胞密度差异不明显，而在12周组中表层上皮细胞密度则相对对照组和4周组均明显更低。D三组基底上皮细胞数目比较：对照组和4周组的基底上皮细胞密度差异不明显，而12周组的基底上皮细胞密度则相对对照组和4周组均明显更低。平均细胞密度是通过计算各组中的每层4张图片来确定的。*表示12周组与对照组、4周组细胞数目相比差异有统计学意义（p<0.05）。3.3角膜上皮HE染色情况我们通过光学显微镜观察每组的角膜上皮。对照组的角膜上皮由4至6层整齐排列的细胞组成。且其表层上皮相对完整，基底细胞排列成单层，细胞核呈椭圆形（图3A）。在烟草烟雾干预4周后，4周组的HE染色情况未发生显著变化（图3A）。在烟草烟雾干预12周后，角膜上皮HE染色显示角膜上皮厚度增加，各层细胞排列紊乱，浅表上皮细胞局部缺损和脱落，角膜表面不光滑（图3A）。对照组与4周组之间未表现出显著差异（P>0.05，图3D），但12周组与其他两组之间均存在显著差异（*P<0.05，图3D）
【参考文献】：
期刊论文
[1]搭建交流平台 推动务实合作 实现共同发展 世界律师大会在广州召开[J]. 医学与法学. 2019(06)
[2]民用飞机维修性的适航符合性验证的研究[J]. 陶欢. 科技视界. 2017(09)
本文编号：3336585
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
应用激光共聚焦显微镜检测小鼠角膜神经纤维分布
第3章实验结果16第3章实验结果3.1泪膜稳定性和上皮损伤干预前三组间BUTs，FL评分比较差异无统计学意义（图1B，1C）。与对照组和4周干预组相比，12周组的BUTs和荧光素钠染色评分显着下降，差异有统计学意义（*P<0.05，图1B，1C）。4周组与对照组相比，的BUTs和荧光素钠染色评分差异不存在统计学意义（P>0.05，图1B，1C）。在烟草烟雾干预后，4周组和对照组的角膜荧光素钠染色呈阴性（图1A），12周组的角膜荧光素钠染色表现为阳性（图1A）。在12周组中出现泪膜/上皮损伤，可能是由于烟草烟雾的毒性（*P<0.05，图1A-C）图1.对照组、4周组和12周组实验前后眼表改变情况。A三组经荧光素钠染色后眼表情况：对照组和4周组未出现明显着染，仅出现极少点状染色，12周组小鼠角膜的上、下、鼻、颞四个象限均着染，且出现斑块状染色。B三组在实验前和实验后BUTs时间改变情况：对照组和4周组BUTs时间在实验前后未发生显著变化，12周组BUTs时间在进行烟草烟雾干预实验后出现明显的下降。C三组在实验前和实验后FL评分改变情况：对照组和4周组FL评分在实验前后未发生显著变化，12周组FL评分在实验后出现明显的上升。*表示实验后与实验前相比差异具有统计学意义（p<0.05）。
第3章实验结果18图2.对照组、4周组和12周组小鼠角膜上皮共聚焦显微镜下观察的改变情况代表性图像。A三组共聚焦显微镜下表层上皮细胞观察情况：对照组和4周组表层上皮细胞未出现明显异常。在12周组中，观察图像显示病灶出现坏死和角膜上皮细胞脱落（红色箭头），并且其细胞出现强烈反射（绿色箭头）。B三组共聚焦显微镜下基底上皮细胞观察情况：对照组和4周组基底上皮细胞未出现明显异常。在12周组中，观察图像显示出现具有超反射核的局灶性基底上皮细胞（绿色箭头）。C三组表层上皮细胞数目比较：对照组和4周组的表层上皮细胞密度差异不明显，而在12周组中表层上皮细胞密度则相对对照组和4周组均明显更低。D三组基底上皮细胞数目比较：对照组和4周组的基底上皮细胞密度差异不明显，而12周组的基底上皮细胞密度则相对对照组和4周组均明显更低。平均细胞密度是通过计算各组中的每层4张图片来确定的。*表示12周组与对照组、4周组细胞数目相比差异有统计学意义（p<0.05）。3.3角膜上皮HE染色情况我们通过光学显微镜观察每组的角膜上皮。对照组的角膜上皮由4至6层整齐排列的细胞组成。且其表层上皮相对完整，基底细胞排列成单层，细胞核呈椭圆形（图3A）。在烟草烟雾干预4周后，4周组的HE染色情况未发生显著变化（图3A）。在烟草烟雾干预12周后，角膜上皮HE染色显示角膜上皮厚度增加，各层细胞排列紊乱，浅表上皮细胞局部缺损和脱落，角膜表面不光滑（图3A）。对照组与4周组之间未表现出显著差异（P>0.05，图3D），但12周组与其他两组之间均存在显著差异（*P<0.05，图3D）
【参考文献】：
期刊论文
[1]搭建交流平台 推动务实合作 实现共同发展 世界律师大会在广州召开[J]. 医学与法学. 2019(06)
[2]民用飞机维修性的适航符合性验证的研究[J]. 陶欢. 科技视界. 2017(09)
本文编号：3336585
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/3336585.html
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