地榆鞣质治疗骨髓抑制小鼠血清代谢组学研究

发布时间：2021-08-19 14:37

　　目的:采用代谢组学研究地榆鞣质升高骨髓抑制小鼠白细胞的作用机制。方法:将SPF级KM小鼠随机分为正常组、模型组、地榆鞣质组,每组10只。模型组和地榆鞣质组小鼠按100 mg·kg^-1剂量腹腔注射环磷酰胺诱导骨髓抑制模型。实验第1d,地榆鞣质组按10 mg·kg^-1剂量灌胃给予地榆鞣质水溶液,模型组灌胃等剂量生理盐水,连续5d。实验第6d,各组小鼠眼眶取血,分离骨髓及造血干细胞,检测各组小鼠外周血液中白细胞数量,骨髓细胞DNA含量及造血干细胞数量,并采用LC-MS分析各实验组小鼠血清代谢谱的变化。结果:与模型组比较,地榆鞣质组小鼠白细胞数量显著增加（P<0.05）,骨髓细胞DNA含量显著增加（P<0.05）,造血干细胞数量显著增加（P<0.05）,具有统计学意义;经血清代谢轮廓分析,从模型组和正常组共筛选出35个差异代谢物,模型组和地榆鞣质组共筛选出30个差异代谢物,筛选出VIP>1.0,fold-change≥1.5或≤0.667和p-value≤0.05三者的交集,得到阿糖胞苷、D-葡糖糖-6磷酸、α-酮异戊酸、十二... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

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免疫磁珠法分离原理

遵义医科大学硕士学位论文赵兰兰122.9统计方法用SPSS17.0软件统计分析。其中的计量数据以均数±标准差(sx)表示，组间差异进行单因素检验，方差齐情况下LSD检验，不齐的则进行T2检验，以P<0.05差异有统计学意义。3实验结果3.1地榆鞣质含量干燥得到的纯化地榆鞣质经HPLC含量测定，含量以没食子酸计为85%。3.2HSCs分离鉴定结果3.2.1骨髓细胞计数从每个6周龄、重20～25gKM小鼠的胫骨和股骨骨髓可收集约（3.6±0.26）×107个骨髓细胞。3.2.2MACS分选造血干细胞MACS可富集约（1.3±0.3）×105个HSCs。图2HSCs显微图片（×400）3.2.3HSCs纯度检测结果流式细胞仪检测证实，免疫磁珠纯化前，CD34+Scal+阳性细胞纯度为（36.54±

遵义医科大学硕士学位论文赵兰兰133.28）%，纯化后CD34+Scal+阳性细胞纯度为（92.54±4.26）%。HSCs流式细胞仪检测结果见图3。图3HSCs流式细胞检测图片注：A纯化后CD34+Scal+流式细胞检测图片B纯化前CD34+Scal+流式细胞检测图片3.2.4细胞活力测定结果将分离的HSCs经台盼蓝染色后在显微镜下观察，结果见图4，经检测和计算，HSCs的回收率为87.5%，细胞活力为（95.8±5.29）%。图4HSCs台盼蓝染色图片（×200）3.3骨髓形态学观察结果如图5所示，正常组小鼠股骨骨髓为红色，提示造血机能旺盛；模型组小鼠股骨骨髓为白色，提示小鼠被环磷酰胺作用后，骨髓细胞遭到大量损伤，造血机能严重下降。地榆鞣质组小鼠股骨骨髓显示为红色，与正常组小鼠接近，表明地榆鞣质干预后，小鼠骨髓细胞得到保护，骨髓造血机能得到维持。

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3351598