天门冬氨酸氨基转移酶（AST）参考方法的建立及临床应用
发布时间：2021-08-21 14:24
目的:建立37℃天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的改良参考方法（不含磷酸吡哆醛）,优化实验条件并对其最佳测定模式进行探讨,对最终建立的参考方法进行方法学评价,探讨AST改良参考方法在室间质评靶值中的应用。方法:根据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）公布的第五部分参考测量程序,即AST参考测量程序,建立我室的37℃ AST改良参考方法并对其实验条件进行优化;依据读点时间周期及延迟期混匀时间对以上建立的AST参考方法设计A～I共9种不同的测定模式,检测时间段均选取延迟反应时间90 s后连续读点180 s,对样本进行测定,每种模式每天重复测定2次,连续测定20天,分别计算不同测定模式下的AST测量结果总不精密度;按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）文件对上述建立的我室AST改良参考方法进行精密度、准确度、线性范围的方法学性能评价,其中精密度评价参考NCCLS EP-5A文件、准确度评价参照NCCLS EP-15A文件、线性范围评价参考NCCLS EP-6A文件,判断是否符合方法学要求;在建立的参考方法符合方法学评价要求的基础上,用建立的参考方法对2017年山西省临床检验中心的10...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
升温曲线图
山西医科大学硕士学位论文122结果2.1AST催化活性的浓度依据动力学反应曲线（见图2-1）对每次测定的吸光度数据进行记录，整理所记录数据后进行回归分析，计算AST吸光度在每分钟内的变化，通过以下公式计算AST的测定结果。AST催化活性浓度=Kmin(:线性回归计算方法）化单位时间内吸光度的变minALvVK610其中：K：酶活性浓度定量系数；ε：NADH在340nm处的摩尔吸光系数，为6.22×103L/mol*cm；V：反应体系的总体积（ml）；v：所加样本体积（ml）；L：比色杯光径距离（cm）。图2-1AST动力学反应曲线2.2不同测定模式下的精密度9种不同测定模式下的AST测定结果见表2-2。测定模式B即读点时间周期为
山西医科大学硕士学位论文192.3.2计算比例误差（CVr）根据公式r=[计算本实验的CVr为0.68%，符合本实验的批内不精密度要求(1%)，可继续进行以下多项式回归分析。2.3.3多项式回归分析统计分析结果见表3-4，可见二次多项式的b2与三次多项式的b2、b3与0均无显著性差异（P>0.05）,其中三次多项式回归统计的回归标准误差最小，即三次多项式分析为本线性范围验证的最适多项式模型。最适多项式在每个浓度处的不确定度见表3-5，可见最大的偏差比（DLi%）为6.35%，仍在规定要求范围内。故本实验所建立的参考方法在所涉及的浓度范围内呈线性。表3-3AST线性范围的实验数据稀释点实际浓度（U/L）实测浓度1（U/L）实测浓度2（U/L）实测均值（U/L）14.004.204.34.25271.271.4071.371.353138.4138.6138.9138.754205.6205.7205.5205.65272.8272.6272.4272.506340339.00338.70338.85图3-1实测浓度平均值与实际浓度的散点图
【参考文献】：
期刊论文
[1]血清转氨酶在腹部闭合伤后肝损伤诊断及分级中的临床应用[J]. 甘华,陈劲霜,聂志红,徐俊,熊军辉. 中国当代医药. 2019(21)
[2]肝损伤酶活性联合检测在肝胆疾病诊断中的临床意义[J]. 李芳. 检验医学与临床. 2018(12)
[3]室间质评中ALT公议靶值与参考方法测定值的比较[J]. 杨泽华,申彬,杜怡青,胡敏,杜建明. 山西医科大学学报. 2018(06)
[4]转氨酶水平检验在脂肪肝诊断中的应用价值分析[J]. 张淑花,朱宗林. 中外医学研究. 2018(16)
[5]全自动生化分析仪检测系统精密度和准确度性能验证[J]. 周龙,谭玉洁. 中国医药指南. 2018(10)
[6]系统测量程序评价校准模式和样品复融对血糖等26个临床生化项目测量结果精密度的影响[J]. 孙慧颖,邵燕,刘淑明,胡滨,陈宝荣. 中华检验医学杂志. 2018 (02)
[7]血清钾、钠联合肝转氨酶在钝性肝损伤中的临床价值研究[J]. 黄超,张坤,江艺. 创伤外科杂志. 2017(12)
[8]天冬氨酸转氨酶与中性粒细胞比值对肝癌患者TACE治疗预后的影响[J]. 邹伟婕,陈立,黄学卿,王黎洲,蒋天鹏,宋杰,周石. 介入放射学杂志. 2017(08)
[9]医学参考实验室的计量学特性研究[J]. 全灿,徐蓓,李红梅,史光华,吴佳佳. 国际检验医学杂志. 2015(17)
[10]利用参考方法定靶值评价23家临床实验室血清丙氨酸转氨酶测量结果的质量[J]. 邹伟民,庄俊华,黄宪章,林增文,李云,王建兵,利嘉琦. 中华检验医学杂志. 2015 (05)
硕士论文
[1]改良ALT和AST参考方法的建立、评价及应用[D]. 梁淑慧.广州医学院 2009
[2]天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）37℃参考测定程序的建立及其临床应用[D]. 齐志宏.中国协和医科大学 2006
本文编号：3355773
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
升温曲线图
山西医科大学硕士学位论文122结果2.1AST催化活性的浓度依据动力学反应曲线（见图2-1）对每次测定的吸光度数据进行记录，整理所记录数据后进行回归分析，计算AST吸光度在每分钟内的变化，通过以下公式计算AST的测定结果。AST催化活性浓度=Kmin(:线性回归计算方法）化单位时间内吸光度的变minALvVK610其中：K：酶活性浓度定量系数；ε：NADH在340nm处的摩尔吸光系数，为6.22×103L/mol*cm；V：反应体系的总体积（ml）；v：所加样本体积（ml）；L：比色杯光径距离（cm）。图2-1AST动力学反应曲线2.2不同测定模式下的精密度9种不同测定模式下的AST测定结果见表2-2。测定模式B即读点时间周期为
山西医科大学硕士学位论文192.3.2计算比例误差（CVr）根据公式r=[计算本实验的CVr为0.68%，符合本实验的批内不精密度要求(1%)，可继续进行以下多项式回归分析。2.3.3多项式回归分析统计分析结果见表3-4，可见二次多项式的b2与三次多项式的b2、b3与0均无显著性差异（P>0.05）,其中三次多项式回归统计的回归标准误差最小，即三次多项式分析为本线性范围验证的最适多项式模型。最适多项式在每个浓度处的不确定度见表3-5，可见最大的偏差比（DLi%）为6.35%，仍在规定要求范围内。故本实验所建立的参考方法在所涉及的浓度范围内呈线性。表3-3AST线性范围的实验数据稀释点实际浓度（U/L）实测浓度1（U/L）实测浓度2（U/L）实测均值（U/L）14.004.204.34.25271.271.4071.371.353138.4138.6138.9138.754205.6205.7205.5205.65272.8272.6272.4272.506340339.00338.70338.85图3-1实测浓度平均值与实际浓度的散点图
【参考文献】：
期刊论文
[1]血清转氨酶在腹部闭合伤后肝损伤诊断及分级中的临床应用[J]. 甘华,陈劲霜,聂志红,徐俊,熊军辉. 中国当代医药. 2019(21)
[2]肝损伤酶活性联合检测在肝胆疾病诊断中的临床意义[J]. 李芳. 检验医学与临床. 2018(12)
[3]室间质评中ALT公议靶值与参考方法测定值的比较[J]. 杨泽华,申彬,杜怡青,胡敏,杜建明. 山西医科大学学报. 2018(06)
[4]转氨酶水平检验在脂肪肝诊断中的应用价值分析[J]. 张淑花,朱宗林. 中外医学研究. 2018(16)
[5]全自动生化分析仪检测系统精密度和准确度性能验证[J]. 周龙,谭玉洁. 中国医药指南. 2018(10)
[6]系统测量程序评价校准模式和样品复融对血糖等26个临床生化项目测量结果精密度的影响[J]. 孙慧颖,邵燕,刘淑明,胡滨,陈宝荣. 中华检验医学杂志. 2018 (02)
[7]血清钾、钠联合肝转氨酶在钝性肝损伤中的临床价值研究[J]. 黄超,张坤,江艺. 创伤外科杂志. 2017(12)
[8]天冬氨酸转氨酶与中性粒细胞比值对肝癌患者TACE治疗预后的影响[J]. 邹伟婕,陈立,黄学卿,王黎洲,蒋天鹏,宋杰,周石. 介入放射学杂志. 2017(08)
[9]医学参考实验室的计量学特性研究[J]. 全灿,徐蓓,李红梅,史光华,吴佳佳. 国际检验医学杂志. 2015(17)
[10]利用参考方法定靶值评价23家临床实验室血清丙氨酸转氨酶测量结果的质量[J]. 邹伟民,庄俊华,黄宪章,林增文,李云,王建兵,利嘉琦. 中华检验医学杂志. 2015 (05)
硕士论文
[1]改良ALT和AST参考方法的建立、评价及应用[D]. 梁淑慧.广州医学院 2009
[2]天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）37℃参考测定程序的建立及其临床应用[D]. 齐志宏.中国协和医科大学 2006
本文编号：3355773
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