PDE9-cGMP-PKG在天麻素促进脑缺血后海马神经发生中的作用
发布时间：2021-09-22 08:45
目的:探讨磷酸二酯酶9（PDE9）-环磷酸鸟苷（cGMP）-cGMP依赖性蛋白激酶（PKG）信号通路在脑缺血后海马神经发生中的作用,并观察天麻素（GAS）的作用及其可能机制。方法:用78周龄雄性C57BL/6小鼠,采用双侧颈总动脉夹闭（BCCAO）方法建立小鼠脑缺血模型,而后给予不同剂量GAS（50 mg/kg/d和100mg/kg/d,i.p.）治疗14 d。于造模后d 8用H.E.染色观察海马CA1区锥体神经元病理形态;d 15利用BrdU和DCX免疫荧光染色观察海马齿状回神经干细胞（NSCs）的增殖和迁移,d 29 BrdU/NeuN双标免疫荧光染色检测海马齿状回NSCs分化整合,用ELISA分析PDE9活性和cGMP水平,并用Western blot检测PKG和脑源性神经营养因子（BDNF）的蛋白表达;d 29开始至d 34结束,利用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力。为进一步确定信号通路的作用,采用悬浮培养法分离纯化新生1日龄SD大鼠的海马NSCs,利用氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）法模拟建立脑缺血模型,观察GAS（0.01μmol/L,0.1μmo...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
动物实验方案
重庆医科大学硕士研究生学位论文28AB图1-2小鼠脑缺血后空间学习记忆的变化(x±s,n=6)Fig.1-2Changesoflearningandmemoryaftercerebralischemiainmice.A：Learningabilitytestingbytheescapelatencytoplatform.B：Memoryabilitytestingbythefrequencyofcrossingplatform.Dataarepresentedasthemean±S.D.ofsixindependentexperiments.*P<0.05,**P<0.01vsSham.2.2脑缺血后小鼠海马病理变化Sham组小鼠海马CA1区锥体神经元结构清晰，排列紧密，核圆形，染色清晰，胞核呈深蓝色；而Model组神经元结构不规则，出现明显核固缩，排列松散，神经细胞数目显著减少（P<0.01）（图1-3）。2.3脑缺血后小鼠海马神经发生的变化脑缺血15d后，Model组小鼠海马齿状回颗粒下层BrdU和DCX阳性细胞与Sham组对比，其数量均有显著增加（P<0.01）（图1-4A、B、C和D）；脑缺血29d后，Model组小鼠海马齿状回颗粒下层BrdU/NeuN阳性细胞与Sham组对比，其数量也显著增加（P<0.01）（图1-4E、F）。
重庆医科大学硕士研究生学位论文29ABShamModel图1-3小鼠脑缺血后海马CA1区病理变化(x±s,n=4)Fig.1-3ChangesofpathologicalinjuryinhippocampusCA1regionaftercerebralischemiainmice.A：RepresentativemicrophotographsofHEstainedhippocampusslices(scalebar=20μm).B：QuantitativeanalysisofthenumbersofCA1neuronsinhippocampal.Dataarepresentedasthemean±S.D.offourindependentexperiments.**P<0.01vsSham.
【参考文献】：
期刊论文
[1]中医外治法治疗失眠的研究进展[J]. 刘爽,陈智慧,刘彤,张宏. 辽宁中医杂志. 2020(05)
[2]天麻素对氧糖剥夺模型中小鼠少突胶质前体细胞的保护作用[J]. 郭艳吉,郭家智,钟莲梅,陶俊,姚玥伊,艾明达,陆地,艾青龙. 神经解剖学杂志. 2019(06)
[3]天麻素对神经系统保护作用及其机制的研究进展[J]. 张枫弋,洪仕君,赵丽萍,李利华. 河南科技大学学报(医学版). 2019(03)
[4]NO-cGMP-PKG信号通路在天麻素促进脑缺血后海马神经发生中的作用[J]. 校欢,马晓娇,承欧梅,邱红梅,蒋青松. 中国中药杂志. 2019(24)
[5]天麻的主要成分及体内代谢机制研究进展[J]. 柳立新,单锋,季婷婷,蒋长顺. 北方药学. 2019(08)
[6]天麻素、对羟基苯甲醇对中枢神经系统作用机制研究进展[J]. 张志龙,郜玉钢,臧埔,顾沛沛,赵岩,何忠梅,祝洪艳. 中国中药杂志. 2020(02)
[7]天麻素神经保护效应的研究进展[J]. 魏恩韬,张琪. 辽宁中医杂志. 2019(11)
[8]缺血性脑血管病的治疗现状及进展研究[J]. 何玉涛. 临床医药文献电子杂志. 2019(40)
[9]天麻素在心脑血管疾病中的研究进展[J]. 李爽,夏豪,刘浙波,梁桂诚. 现代中药研究与实践. 2019(01)
[10]原发性肝癌并发抑郁症的发病机理及中西医治疗研究进展[J]. 程金来,冷静,夏猛. 广西医学. 2018(24)
本文编号：3403474
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
动物实验方案
重庆医科大学硕士研究生学位论文28AB图1-2小鼠脑缺血后空间学习记忆的变化(x±s,n=6)Fig.1-2Changesoflearningandmemoryaftercerebralischemiainmice.A：Learningabilitytestingbytheescapelatencytoplatform.B：Memoryabilitytestingbythefrequencyofcrossingplatform.Dataarepresentedasthemean±S.D.ofsixindependentexperiments.*P<0.05,**P<0.01vsSham.2.2脑缺血后小鼠海马病理变化Sham组小鼠海马CA1区锥体神经元结构清晰，排列紧密，核圆形，染色清晰，胞核呈深蓝色；而Model组神经元结构不规则，出现明显核固缩，排列松散，神经细胞数目显著减少（P<0.01）（图1-3）。2.3脑缺血后小鼠海马神经发生的变化脑缺血15d后，Model组小鼠海马齿状回颗粒下层BrdU和DCX阳性细胞与Sham组对比，其数量均有显著增加（P<0.01）（图1-4A、B、C和D）；脑缺血29d后，Model组小鼠海马齿状回颗粒下层BrdU/NeuN阳性细胞与Sham组对比，其数量也显著增加（P<0.01）（图1-4E、F）。
重庆医科大学硕士研究生学位论文29ABShamModel图1-3小鼠脑缺血后海马CA1区病理变化(x±s,n=4)Fig.1-3ChangesofpathologicalinjuryinhippocampusCA1regionaftercerebralischemiainmice.A：RepresentativemicrophotographsofHEstainedhippocampusslices(scalebar=20μm).B：QuantitativeanalysisofthenumbersofCA1neuronsinhippocampal.Dataarepresentedasthemean±S.D.offourindependentexperiments.**P<0.01vsSham.
【参考文献】：
期刊论文
[1]中医外治法治疗失眠的研究进展[J]. 刘爽,陈智慧,刘彤,张宏. 辽宁中医杂志. 2020(05)
[2]天麻素对氧糖剥夺模型中小鼠少突胶质前体细胞的保护作用[J]. 郭艳吉,郭家智,钟莲梅,陶俊,姚玥伊,艾明达,陆地,艾青龙. 神经解剖学杂志. 2019(06)
[3]天麻素对神经系统保护作用及其机制的研究进展[J]. 张枫弋,洪仕君,赵丽萍,李利华. 河南科技大学学报(医学版). 2019(03)
[4]NO-cGMP-PKG信号通路在天麻素促进脑缺血后海马神经发生中的作用[J]. 校欢,马晓娇,承欧梅,邱红梅,蒋青松. 中国中药杂志. 2019(24)
[5]天麻的主要成分及体内代谢机制研究进展[J]. 柳立新,单锋,季婷婷,蒋长顺. 北方药学. 2019(08)
[6]天麻素、对羟基苯甲醇对中枢神经系统作用机制研究进展[J]. 张志龙,郜玉钢,臧埔,顾沛沛,赵岩,何忠梅,祝洪艳. 中国中药杂志. 2020(02)
[7]天麻素神经保护效应的研究进展[J]. 魏恩韬,张琪. 辽宁中医杂志. 2019(11)
[8]缺血性脑血管病的治疗现状及进展研究[J]. 何玉涛. 临床医药文献电子杂志. 2019(40)
[9]天麻素在心脑血管疾病中的研究进展[J]. 李爽,夏豪,刘浙波,梁桂诚. 现代中药研究与实践. 2019(01)
[10]原发性肝癌并发抑郁症的发病机理及中西医治疗研究进展[J]. 程金来,冷静,夏猛. 广西医学. 2018(24)
本文编号：3403474
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