脂联素改善Aβ31-35所致小鼠海马神经细胞Bmal1异常表达及其机制研究

发布时间：2021-10-17 15:55

　　阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种常见的神经退行性疾病,近年来患病人数逐年增加,已经成为重大的公共卫生问题。AD早期出现的昼夜节律紊乱可在一定程度上加重AD的其他症状如学习记忆与认知功能缺陷等,其在AD的发展过程中至关重要。大量研究证实,AD核心病理特征—脑组织中异常沉积的β淀粉样蛋白（Amyloid-βprotein,Aβ）与AD昼夜节律紊乱的发生密切相关。Bmal1作为昼夜节律的核心组分,在昼夜节律的调控和维持中发挥重要作用。我们课题组前期研究发现Aβ的核心片段Aβ31-35可诱导HT22海马神经细胞Bmal1异常表达。然而,针对Aβ31-35所致Bmal1异常表达目前尚无有效的防治措施。2型糖尿病（T2DM）和AD在发病上具有相关性,胰岛素抵抗是T2DM和AD的共同病理生理特征。脂联素（Adiponectin,APN）是由脂肪细胞分泌的细胞因子,具有胰岛素敏化作用。临床研究表明,AD患者血清中脂联素水平降低。另有研究揭示,脂联素信号传导缺陷可诱导小鼠出现AD样病理改变,如Aβ沉积,Tau蛋白高度磷酸化,神经炎症等,而激活脂联素信号可改善APP/PS... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

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【学位级别】：硕士

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APN-KO小鼠基因型鉴定结果

山西医科大学硕士学位论文14图1-2APN-KO小鼠海马组织中Aβ异常沉积(n=6,Scalebar：20μm)2.3APN-KO小鼠存在昼夜节律紊乱选取4月龄C57BL/6小鼠和APN-KO小鼠分为Control组、APN-KO组进行跑轮行为学实验以明确脂联素缺乏对于昼夜节律的影响。结果显示，Control组小鼠跑轮活动节律规则，运动相与休息相分界清晰，运动多集中于主观夜晚且起始时间较为固定（图1-3A），主观白天活动量/总活动量比值为（27.34±9.36）%，小鼠自由运转周期为（25.04±0.39）h。而APN-KO小鼠出现昼夜节律紊乱现象，表现为每日跑轮活动起始时间的变异性增大，主观白天活动量增多，主观夜晚活动量减少（图1-3A），主观白天活动量/总活动量比值显著升高（66.40±7.42）%（图1-3B），小鼠自由运转周期显著延长（26±0.09）h（P<0.05）（图1-3C）。以上结果表明脂联素缺乏可诱导小鼠昼夜节律紊乱。

山西医科大学硕士学位论文15图1-3APN-KO小鼠存在昼夜节律紊乱（A）Control组和APN-KO组小鼠自主跑轮运动原始图，显示DD环境中连续14天小鼠实时跑轮情况，黑色部分代表运动期，白色部分代表休息期。（B）Control组和APN-KO组小鼠主观白天和主观夜晚活动量与总活动量比值的统计图。（C）Control组和APN-KO组小鼠自由运转周期统计图。“*”表示与Control组相比有统计学差异（P<0.05）（n=6）2.4APN-KO小鼠海马组织Bmal1基因/蛋白表达异常采用实时荧光定量PCR法及WesternBlotting印迹法检测4月龄C57BL/6小鼠（Control组）和APN-KO小鼠（APN-KO组）海马组织于CT4、CT8、CT12、CT16、CT20、CT24六个时间点的Bmal1mRNA及BMAL1蛋白表达情况以明确脂联素缺乏对Bmal1mRNA及其蛋白表达的影响。结果发现，Control组小鼠海马组织Bmal1mRNA在CT4、CT12、CT20、CT24时间点表达相对较高，于CT20时间点表达水平最高，在CT8、CT16时间点表达相对较低，于CT8时间点表达水平最低；而APN-KO小鼠Bmal1mRNA在CT4、CT8、CT20、CT24时间点表达相对较高，于CT24时间点表达水平最高，在CT12、CT16时间点表达相对较低，于CT12时间点表达水平最低，且CT12时间点Bmal1mRNA表达水平与Control组相比显著降低（0.95±0.11vs0.72±0.04,P<0.05）（图1-4A,B）。同时检测了各组小鼠海马组织在CT4、CT8、CT12、CT16、CT20、CT24时间点BMAL1蛋白的表达，结果显示：Control组小鼠海马组织BMAL1蛋白于CT24时间点表达水平最高，而APN-KO小鼠BMAL1蛋白于CT4时间点表达水平最高，且APN-KO小鼠BMAL1蛋白的表达与Control组相比显著升高，于CT4、CT12、CT16、CT20时间点的升高具有统计学意义（1.00±0.08vs1.65±0.14;0.92±0.11vs1.27±


本文编号：3442022