洛铂、卡铂抑制裸鼠视网膜母细胞瘤对比疗效体内体外研究

发布时间：2021-11-11 20:14

　　研究目的视网膜母细胞瘤（RB）是最常见的婴幼儿原发性眼内恶性肿瘤之一,化疗是治疗视网膜母细胞瘤的一种常规疗法,本研究旨在比较洛铂和卡铂对视网膜母细胞增殖、凋亡和肿瘤生长的疗效影响。研究方法通过视网膜母细胞Y79建立体外细胞模型,并通过MTT法检测洛铂、卡铂对视网膜母细胞（RB）增殖的影响,使用流式细胞术分析洛铂、卡铂对RB细胞周期的影响,Annexin v-FITC/碘化丙啶（PI）测定细胞凋亡比例,RNA-seq检测使用洛铂、卡铂后RB细胞中关键转录分子的表达分析,并对其基因表达数据进行差异性表达分析。进一步通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测洛铂、卡铂对RB细胞中E2F1/Cdc25a/Cdk2基因表达的影响。利用视网膜细胞系Y79细胞构建裸鼠视网膜母细胞瘤模型,将动物荷瘤模型随机分为4组,分别给予不同的给药方案:第1组是对照组,第2组小鼠注射PBS,第3组小鼠注射卡铂,第4组小鼠注射洛铂,于第1/2/3/4周观察肿瘤生长曲线,并在第4周后行病理检查。研究结果体外试验中,卡铂（80ug/ml）和洛铂（40ug/ml）在体外能够明显抑制RB细胞的增殖;与卡铂相比,洛铂在早期... 

【文章来源】：广州医科大学广东省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

卡铂和洛铂引起Y79细胞不同程度的凋亡和细胞周期变化

广州医科大学硕士学位论文18图1.卡铂和洛铂引起Y79细胞不同程度的凋亡和细胞周期变化。卡铂组（0、20、40、60和80μg/ml）（A）和洛铂组（0、5、10、20和40μg/ml）在处理后第1、2、3天细胞活性评估（B）图1C-E和G-I分别为NC组、卡铂组和洛铂组的流式代表性图像。图1F和J显示，卡铂组和洛铂组细胞凋亡、S期细胞比例低于NC组。*，P<0.05;**,P<0.01;和***,P<0.0014.2卡铂组和洛铂组视网膜母细胞基因表达变化为了研究和探讨洛铂和卡铂对RBY79细胞的影响，我们对不同组的mRNA进行了RNA-seq测定(图2A-C)。聚类分析显示了三组之间的差异，因此我们能够确认，我们的RNA-seq数据证明了差异表达分析的条件是正确的（图2D）。我们以差异转录本为研究对象进行进一步研究两组样本的差异，使用Ballgown对两组样本进行比较，得到显著的P值；在本分析中，两组相比较进行差异转录本筛选，筛选条件为p值<0.05和Foldchange大于1.2倍及小于0.83333倍，如对卡铂组（图3Aa）进行对照组分析时，共鉴定出2525个表达上调的基因和1172个表达下调的基因，对洛铂组（图3Ab）进行对照组分析时，共鉴定出2582个表达上调的基因和2971个表达下调的基因，对洛铂组（图3Ac）进

4.结果19行对照组分析时，共鉴定出3724个表达上调的基因和2190个表达下调的基因。在基因本体论（GO）富集分析的帮助下，对这三组重要的生物学功能进行了评估（图3Ba-Bc），结果显示E2F1/IGF1/CACNA1F/TNNC1/TGFB3CACNG6/MYBPC3CACNA2D3/ADCY1/PLN,E2F1/IGF1/NUPR1/HIST1H3J/HIST2H3CHIST2H3A/HIST1H3B/HIST1H3E/HIST1H3H/HIST1H3D和E2F1/MYC/CDKN2BHIPK4/CALML6组。在这份结果中值得我们关注的是E2F1蛋白在三组中表达均有显著差异。图2.卡铂和洛铂处理组的基因表达变化。NC组、卡铂组和洛铂组(A至C)相关基因的正常表达的热图。对每个样本的基因表达水平(FPKM)进行聚类分析的结果（D）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Lobaplatin inhibits growth of gastric cancer cells by inducing apoptosis[J]. Chu-Yang Yin,Xiao-Lin Lin,Lei Tian,Ming Ye,Xin-Ying Yang,Xiu-Ying Xiao.  World Journal of Gastroenterology. 2014(46)



本文编号：3489461