咔唑类生物碱衍生物CZ-7改善CPZ导致髓鞘损伤的药效学评价及机制研究

发布时间：2021-11-12 03:56

　　目的明确咔唑类生物碱衍生物CZ-7对中枢神经系统髓鞘损伤的神经保护作用,探究CZ-7对髓鞘损伤中清除髓鞘碎片及促进髓鞘再生作用的影响及相关机制,阐明CZ-7在中枢神经系统髓鞘损伤中的保护作用,为治疗髓鞘损伤的药物开发和基于黄皮的咔唑类生物碱衍生物的药物开发提供有力的理论依据。方法1.将6-8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组（Control组）、模型组（CPZ组）、给药组（CPZ+CZ-7组）。每天CPZ灌胃（给药剂量为300mg/kg）进行髓鞘损伤造模,造模同时CZ-7灌胃给药（给药剂量为20mg/kg）。造模4周后,对小鼠进行爬杆、抓力和平衡木行为学检测,随后对动物进行取材。2.用LFB染色和MBP免疫组化染色检测髓鞘的脱失情况;用QPCR检测与髓鞘形成相关的基因（MBP、MOG、PLP1和MOBP）的mRNA表达水平。3.通过dMBP免疫荧光染色和油红O染色检测CZ-7对髓鞘损伤特异部位胼胝体脱落的髓鞘碎片的清除作用。4.通过Iba1免疫荧光染色检测各组小鼠胼胝体中小胶质细胞的形态和数量,通过QPCR以及Iba1和MBP免疫荧光共染验证小胶质细胞对髓鞘碎片的吞噬作用。5... 

【文章来源】：山西中医药大学山西省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略词表
引言
第一节 咔唑类生物碱衍生物CZ-7对髓鞘损伤的药效评价
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药品和试剂
        1.3 实验仪器
    2 实验方法
        2.1 药物的配制
        2.2 溶液的配制
        2.3 动物分组、造模及给药
        2.4 行为学检测
        2.5 组织制备
        2.6 固蓝(Luxol Fast Blue, LFB)染色
        2.7 免疫组化染色
        2.8 荧光定量核酸扩增检测(Quantitative Polymerase Chain Reaction, QPCR)
        2.9 统计学方法
    3 实验结果
        3.1 CZ-7 可以显着改善CPZ诱导的体重减轻和行为学障碍
        3.2 CZ-7 可明显改善CPZ诱导的髓鞘损伤
    4 小结
    5 讨论
第二节 咔唑类生物碱衍生物CZ-7对髓鞘损伤的机制研究
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药品和试剂
        1.3 实验仪器
    2 实验方法
        2.1 药物的配制
        2.2 溶液的配制
        2.3 免疫荧光染色
        2.4 油红O染色
        2.5 荧光定量核酸扩增检测(Quantitative Polymerase Chain Reaction, QPCR)
        2.6 原代少突胶质前体细胞分离培养、给药及检测
        2.7 CCK-8 法检测细胞活力
        2.8 Western blot
        2.9 统计学方法
    3 实验结果
        3.1 CZ-7 促进脱落的髓鞘碎片清除
        3.2 CZ-7 增强小胶质细胞对髓鞘碎片的吞噬
        3.3 CZ-7 促进小胶质细胞向M2 型转变
        3.4 CZ-7 促进少突胶质前体细胞的招募
        3.5 CZ-7 促进少突胶质前体细胞的分化成熟
    4 小结
    5 讨论
总结
参考文献
附录 文献综述
    参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3490117