雌三醇对乙型肝炎病毒转录和复制水平的影响

发布时间：2021-11-29 04:40

　　目的:研究雌三醇对乙型肝炎病毒（HBV）转录和复制水平的影响。方法:采用不同浓度（从640μmol/L到5μmol/L倍比稀释）的雌三醇作用于体外培养的HepG2. 2. 15和HepG2-NTCP细胞,MTS法检测雌三醇的细胞毒性。用10、20和40μmol/L雌三醇处理HepG2. 2. 15和HepG2-NTCP细胞,以恩替卡韦（25 nmol/L）作为阳性对照,6 d后采用RT-qPCR法检测细胞中HBV DNA和RNA水平,ELISA法检测上清中乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）水平。对雄性HBV转基因小鼠腹腔注射雌三醇（5 mg/kg）,以恩替卡韦（0. 02 mg/kg）作为阳性对照,28 d后取小鼠血清和肝脏,采用ELISA法检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、HBsAg和HBeAg水平,RT-qPCR法检测血清和肝脏中HBV DNA水平及肝脏中HBV RNA水平。结果:与对照组相比,10、20和40μmol/L雌三醇可以显著降低HepG2. 2. 15和HepG2-NTCP细胞分泌的HBsAg和HBeAg水平及细胞中H... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

雌三醇对HepG2.2.15和HepG2-NTCP细胞活力的影响

牛磺胆酸钠共转运多肽（sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP）是HBV感染肝细胞的受体，HepG2-NTCP细胞能够模拟自然状态下HBV的复制过程。进一步，我们利用此模型研究了雌三醇对HBV复制的影响。我们对感染HBV的HepG2-NTCP细胞分别用10、20和40μmol/L雌三醇处理，并以25 nmol/L ETV为阳性对照，6 d后，RT-qPCR结果显示，HepG2-NTCP细胞中HBV core DNA水平分别降低27%、40%和57%（图3A),HBV RNA水平分别降低16%、32%和49%（图3B);ELISA结果显示，HBsAg水平分别降低17%、26%和33%,HBeAg水平分别降低19%、31%和41%（图3C、D）。4 雌三醇在HBV转基因小鼠模型中的抗病毒效能

雌激素及雌激素受体在HBV感染及相关肝病中的作用已比较明确[16-17]。存在于人体中的雌激素有3种，包括雌二醇、雌酮和雌三醇，其中雌二醇可通过上调雌激素受体的表达而抑制HBV的转录活性，发挥抑制HBV复制的作用[18]，而雌三醇作为雌二醇的代谢产物，在HBV复制和转录中的作用目前尚无报道。本研究首先利用HBV稳定表达细胞模型HepG2.2.15细胞和HBV感染细胞模型HepG2-NTCP细胞研究了雌三醇对HBV复制的调控作用。在HBV生活周期中，HBV的复制过程首先由HBV的共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA）转录成不同大小的HBV RNAs，并表达HBV蛋白，HBV RNAs中的3.5 kb RNA可作为模板逆转录形成HBV DNA。我们的细胞研究结果显示，在IC50范围内雌三醇明显下调了HBV RNA和DNA水平以及HBsAg和HBeAg分泌水平，并呈浓度依赖性，表明雌三醇在体外可显著抑制HBV生活周期中的转录和复制过程。为了证实研究结果的可靠性，我们又利用HBV转基因小鼠模型证实了雌三醇在体内也具有较强的抑制HBV转录和复制的作用，这些研究结果充分证实了雌三醇对HBV复制过程发挥负向调控作用。图4 雌三醇在HBV转基因小鼠模型中的抗病毒效能

【参考文献】：
期刊论文
[1]乙型肝炎病毒与性激素相互作用的研究进展[J]. 孙健,王甦.  实用临床医药杂志. 2019(21)
[2]HBV PC区和BCP区变异与Peg-IFNα-2b疗效的关系及治疗前后的变化[J]. 汪波,刘艳艳,李家斌.  中国病理生理杂志. 2018(09)
[3]雌激素在慢性肝病发生发展中的作用研究现状[J]. 赵雷,张玮.  实用肝脏病杂志. 2015(05)



本文编号：3525861