齐墩果酸拮抗赭曲霉毒素A诱导HK-2细胞凋亡的作用机制

发布时间：2021-12-24 05:49

　　目的:探讨赭曲霉毒素A（OTA）诱导人肾小管上皮（HK-2）细胞凋亡的过程;齐墩果酸（OA）拮抗OTA诱导HK-2细胞凋亡的作用;以及（肿瘤坏死因子相关受体1）TRAP1在OA拮抗OTA诱导HK-2细胞凋亡信号传导的机制。方法:1.本实验以人肾小管上皮（HK-2）细胞为实验模型,用不同浓度OTA处理细胞24 h后,使用CCK-8方法测定细胞存活率,确定OTA的工作浓度。设置对照组（C组,0μmol/L OTA处理24 h）、低剂量组（L组,0.2μmol/L OTA处理24 h）、中剂量组（M组,1μmol/L OTA处理24 h）和高剂量组（H组,5μmol/L OTA处理24 h）。使用OTA处理细胞所需时间后,用Annexin V-FITC/PI双染法测定细胞凋亡率,同时用Western blot方法测定凋亡相关蛋白TRAP1、Lonp1、CYPD、Cyt-C、Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4和CHOP的表达。2.用不同浓度OA预处理细胞2 h后,使用CCK-8方法测定细... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同浓度OTA对HK-2细胞凋亡率的影响

遵义医科大学硕士论文李晨26图4-A不同浓度OTA对凋亡相关蛋白表达的影响Fig.4-AApoptosis-relatedproteinexpressionsinresponsetodifferentconcentrationsofOTAtreatmentNote：Westernblotanalysisresultsinresponsetothetreatmentof0μmol/LOTAfor24h(controlgroup,groupC);0.2μmol/LOTAfor24h(groupL);1μmol/LOTAfor24h(groupM);5μmol/LOTAfor24h(groupH).mPTP的开放和MOMP可以引起Cyt-C的释放。CYPD可以调节mPTP的开放[44]，而线粒体外膜的透化主要受到Bcl-2蛋白家族的影响[22]。基于此，通过Westernblot方法检测OTA对线粒体途径凋亡相关蛋白CYPD、胞质Cyt-C、Bax、Bcl-2、CleavedCaspase9和CleavedCaspase3表达情况的影响。结果如图4-A和图4-C所示，与C组相比，L组、M组和H组CYPD和胞质Cyt-C的表达逐渐增加，其中M组和H组CYPD和胞质Cyt-C的表达显著增加（P＜0.05）。与C组相比，L组、M组和H组Bcl-2的表达显著降低（P＜0.05）。此外，与C

遵义医科大学硕士论文李晨32图7-AOA和OTA处理对HK-2细胞凋亡率的影响Fig.7-AApoptosisrateofHK-2cellsinresponsetoOAand/orOTAtreatmentNote：Cellapoptoticrateinresponsetothetreatmentof0μmol/LOTAfor24h(controlgroup,groupCK);5μmol/LOTAfor24h(groupOT);2μmol/LOAfor2h(groupOA);2μmol/LOApre-treatmentfor2hand5μmol/LOTAfor24h(groupOO).

【参考文献】：
期刊论文
[1]齐墩果酸拮抗赭曲霉毒素A诱导的HEK293T细胞自噬性死亡[J]. 廖忻,陈文莹,李逸舟,李晨,刘鑫淼,谌小立.  食品工业科技. 2019(03)
[2]齐墩果酸的来源及护肾作用研究进展[J]. 廖忻,陈文莹,杨杰也琦,李晓红,李晨,谌小立.  安徽农学通报. 2018(06)
[3]TRAP1 Shows Clinical Significance and Promotes Cellular Migration and Invasion through STAT3/MMP2 Pathway in Human Esophageal Squamous Cell Cancer[J]. Yunwei Ou,Lingyan Liu,Liyan Xue,Wei Zhou,Zitong Zhao,Bainan Xu,Yongmei Song,Qimin Zhan.  Journal of Genetics and Genomics. 2014(10)



本文编号：3549931