TET2/SDHB在低剪切应力诱导HUVECs焦亡中的作用及其机制研究

发布时间：2022-01-19 08:04

　　[背景]低剪切应力诱导的血管内皮细胞（vascular endothelial cells,VECs）炎症在动脉粥样硬化（atherosclerosis,As）的发生发展过程中起着重要作用,但其调节机制尚不清楚。新近研究表明,细胞焦亡是一种炎性、程序性的细胞死亡形式,与As的发生和发展密切相关。我们前期的研究表明,Tet甲基胞嘧啶双加氧酶2（Tet methylcytidine dioxygenase 2,TET2）是剪切应力敏感基因,低剪切应力下调TET2的表达,TET2 shRNA上调血管内皮细胞琥珀酸脱氢酶复合体B亚基（Succinic acid dehydrogenase complex B,SDHB）的表达。在本文中,我们将探讨TET2/SDHB在低剪切应力诱导VECs焦亡中的作用及其机制。[目的]探讨低剪切应力诱导VECs焦亡的调节机制。[方法]1、采用平行平板流动腔系统,从细胞水平观察低剪切应力和生理剪切应力下人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）焦亡相关蛋白NLRP3、GSDMD、Caspase-1... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

低剪切力促进血管内皮细胞焦亡相关基因表达并下调TET2的表达A-B.低剪切力上调血管内皮细胞NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-18以及IL-1β蛋白的

163.2TET2shRNA促HUVECs焦亡为了进一步观察TTE2低表达与血管内皮细胞焦亡之间的关系，于是我们使用了绿色荧光蛋白（Greenfluorescentprotein，GFP）标记的TET2shRNA慢病毒转染HUVECs株，转染72h后采用荧光显微镜观察其转染效率并采用Westernblot检测其TET2的蛋白表达水平，结果表明TET2shRNA明显下调TET2表达（图3.2A-C），提示已成功构建TET2低表达HUVECs。Westernblot检测TET2shRNA组、空白对照组、阴性对照组组中焦亡相关蛋白NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-18以及IL-1β的表达水平，结果提示与阴性对照相比，TET2shRNA组上调了NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-18以及IL-1β的表达，表明TET2shRNA促进HUVECs焦亡(图3.2D,E)。图3.2TET2shRNA促HUVECs焦亡A,采用TET2shRNA慢病毒转染HUVECs72h，荧光显微镜检测TET2shRNA慢病毒转染

18图3.3过表达TET2抑制低剪切应力诱导的HUVECs焦亡A,过表达TET2的慢病毒转染72h后采用荧光显微镜检测TET2转染效率；B-C,过表达TET2慢病毒转染96h后，采用Westernblot检测TET2蛋白的表达。***P<0.001vsControl组。D-E,过表达TET2慢病毒转染96h后予以灌流6h处理,westernblot检测血管内皮细胞焦亡相关蛋白NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-18以及IL-1β的表达。**P<0.01，***P<0.001vs5dyne/cm2组，n=3。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3596507