ADSCs-HA纳米微球复合物治疗兔膝关节创伤性软骨缺损的实验研究
发布时间：2022-01-19 09:11
目的:研究脂肪干细胞（Adipose-derived stem cells,ADSCs）联合缓释转化生长因子-β1（Transforming growth factor-beta1,TGF-β1）的羟基磷灰石（Hydroxyapatite,HA）纳米微球/明胶海绵复合支架构建ADSCs-HA纳米微球复合物修复兔膝关节创伤性软骨缺损的效果。方法:（1）制备载有细胞因子TGF-β1的HA纳米微球,电镜分析其微观形貌,通过模拟体液的浸泡实验检测TGF-β1的缓释浓度及持续时间。（2）从3月龄新西兰大白兔的脂肪组织提取ADSCs,传代培养,观察细胞形态及流式细胞仪鉴定。（3）将HA纳米微球附着可吸收明胶海绵内构建HA纳米微球/明胶海绵复合支架,取第3代ADSCs以1×105个细胞/mL的浓度接种HA纳米微球/明胶海绵复合支架共培养,构建ADSCs-HA纳米微球复合物,行MTT检测及电镜观察。（4）选用18只3月龄的雌性新西兰大白兔制作兔膝关节创伤性软骨缺损动物模型:用电钻在股骨髁间滑车...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
纳米微球扫描电镜结果
遵义医科大学硕士学位论文王哲203.1.2纳米微球体外缓释将TGF-β1放于二氯甲烷，充分搅拌至完全溶解配制成标品溶液中，把上文提到的5个梯度用酶标仪，在450nm波长处测定其吸光度值，OD值(Y)与浓度(X)呈良好线性关系（见图2）。求得回归方程为：Y=0.11+0.0019X,R2=0.999。图2TGF-β1浓度与吸光度值的标准曲线将待测定的上清液加到ELISA检测板中，测定其450nm处OD值，代入上述回归方程，得出样品中释放的TGF-β1浓度。由图3可见，TGF-β1仅在第1天内出现一过性释放量大，考虑为微球表面的生长因子快速溶解所致。3天之后微球内TGF-β1进入缓释状态，到15天后释药速度逐渐趋于平稳，缓释时间至少可持续29天。图3HA纳米微球体外释放TGF-β1浓度曲线
遵义医科大学硕士学位论文王哲203.1.2纳米微球体外缓释将TGF-β1放于二氯甲烷，充分搅拌至完全溶解配制成标品溶液中，把上文提到的5个梯度用酶标仪，在450nm波长处测定其吸光度值，OD值(Y)与浓度(X)呈良好线性关系（见图2）。求得回归方程为：Y=0.11+0.0019X,R2=0.999。图2TGF-β1浓度与吸光度值的标准曲线将待测定的上清液加到ELISA检测板中，测定其450nm处OD值，代入上述回归方程，得出样品中释放的TGF-β1浓度。由图3可见，TGF-β1仅在第1天内出现一过性释放量大，考虑为微球表面的生长因子快速溶解所致。3天之后微球内TGF-β1进入缓释状态，到15天后释药速度逐渐趋于平稳，缓释时间至少可持续29天。图3HA纳米微球体外释放TGF-β1浓度曲线
【参考文献】：
期刊论文
[1]运动性软骨损伤的问题及潜在性治疗方案[J]. 石松源,彭志辉. 中国组织工程研究. 2019(31)
[2]体外分离兔脂肪间充质干细胞多向诱导分化及鉴定的实验研究[J]. 许颖捷,宋志强,邵博,胡露露,曾雪敏,龚忠诚. 新疆医科大学学报. 2019(07)
[3]珊瑚羟基磷灰石负载含BMP-2纳米缓释微球体系促进人间充质干细胞骨形成的研究[J]. 于鹏,纪志华,贾丙申,周立义,付昆. 中国骨质疏松杂志. 2019(02)
[4]兔膝关节力学有限元分析及软骨缺损模型的建立[J]. 檀臻炜,汪丙昂,姚一民,陈家磊,段鑫,刘明,项舟. 西南国防医药. 2018(12)
[5]组织工程用纳米微球的研制[J]. 崔小平,常保国,张鹏,张宇明,荆志振,崔竹笑. 中国药物与临床. 2018(06)
[6]关节软骨损伤的外科治疗进展[J]. 陈志豪,沈磊,赵静婷,李欣,盛梦超,陈永佳,李柳炳,董启榕. 医学综述. 2018(01)
[7]生长因子在关节软骨损伤修复中的应用进展[J]. 曹一汀,杨文裕,李学敏,张其清. 国际生物医学工程杂志. 2017 (04)
[8]羟基磷灰石微结构调控的研究进展[J]. 赵宏霞. 功能材料. 2017(01)
[9]组织工程支架材料修复关节软骨缺损[J]. 方洪松,周建林,彭昊,邓爽,翁金清,刘丰,陈森,周观金. 中国组织工程研究. 2016(52)
[10]Cytodext-3微载体/藻酸钠水凝胶作为可注射性支架构建组织工程软骨的可行性[J]. 尹合勇,孙振,李盼,余晓明,徐亦驰,孙逊,肖波,王玉,汪爱媛,郭全义,徐文静,卢世璧,彭江. 中国组织工程研究. 2016(34)
博士论文
[1]富含BMP-2的PLGA材料制备及对兔关节软骨缺损修复的应用研究[D]. 曹豫江.重庆医科大学 2017
硕士论文
[1]TGF-β1对大鼠脂肪干细胞体外软骨形成能力影响的研究[D]. 李强.中南大学 2010
本文编号：3596601
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
纳米微球扫描电镜结果
遵义医科大学硕士学位论文王哲203.1.2纳米微球体外缓释将TGF-β1放于二氯甲烷，充分搅拌至完全溶解配制成标品溶液中，把上文提到的5个梯度用酶标仪，在450nm波长处测定其吸光度值，OD值(Y)与浓度(X)呈良好线性关系（见图2）。求得回归方程为：Y=0.11+0.0019X,R2=0.999。图2TGF-β1浓度与吸光度值的标准曲线将待测定的上清液加到ELISA检测板中，测定其450nm处OD值，代入上述回归方程，得出样品中释放的TGF-β1浓度。由图3可见，TGF-β1仅在第1天内出现一过性释放量大，考虑为微球表面的生长因子快速溶解所致。3天之后微球内TGF-β1进入缓释状态，到15天后释药速度逐渐趋于平稳，缓释时间至少可持续29天。图3HA纳米微球体外释放TGF-β1浓度曲线
遵义医科大学硕士学位论文王哲203.1.2纳米微球体外缓释将TGF-β1放于二氯甲烷，充分搅拌至完全溶解配制成标品溶液中，把上文提到的5个梯度用酶标仪，在450nm波长处测定其吸光度值，OD值(Y)与浓度(X)呈良好线性关系（见图2）。求得回归方程为：Y=0.11+0.0019X,R2=0.999。图2TGF-β1浓度与吸光度值的标准曲线将待测定的上清液加到ELISA检测板中，测定其450nm处OD值，代入上述回归方程，得出样品中释放的TGF-β1浓度。由图3可见，TGF-β1仅在第1天内出现一过性释放量大，考虑为微球表面的生长因子快速溶解所致。3天之后微球内TGF-β1进入缓释状态，到15天后释药速度逐渐趋于平稳，缓释时间至少可持续29天。图3HA纳米微球体外释放TGF-β1浓度曲线
【参考文献】：
期刊论文
[1]运动性软骨损伤的问题及潜在性治疗方案[J]. 石松源,彭志辉. 中国组织工程研究. 2019(31)
[2]体外分离兔脂肪间充质干细胞多向诱导分化及鉴定的实验研究[J]. 许颖捷,宋志强,邵博,胡露露,曾雪敏,龚忠诚. 新疆医科大学学报. 2019(07)
[3]珊瑚羟基磷灰石负载含BMP-2纳米缓释微球体系促进人间充质干细胞骨形成的研究[J]. 于鹏,纪志华,贾丙申,周立义,付昆. 中国骨质疏松杂志. 2019(02)
[4]兔膝关节力学有限元分析及软骨缺损模型的建立[J]. 檀臻炜,汪丙昂,姚一民,陈家磊,段鑫,刘明,项舟. 西南国防医药. 2018(12)
[5]组织工程用纳米微球的研制[J]. 崔小平,常保国,张鹏,张宇明,荆志振,崔竹笑. 中国药物与临床. 2018(06)
[6]关节软骨损伤的外科治疗进展[J]. 陈志豪,沈磊,赵静婷,李欣,盛梦超,陈永佳,李柳炳,董启榕. 医学综述. 2018(01)
[7]生长因子在关节软骨损伤修复中的应用进展[J]. 曹一汀,杨文裕,李学敏,张其清. 国际生物医学工程杂志. 2017 (04)
[8]羟基磷灰石微结构调控的研究进展[J]. 赵宏霞. 功能材料. 2017(01)
[9]组织工程支架材料修复关节软骨缺损[J]. 方洪松,周建林,彭昊,邓爽,翁金清,刘丰,陈森,周观金. 中国组织工程研究. 2016(52)
[10]Cytodext-3微载体/藻酸钠水凝胶作为可注射性支架构建组织工程软骨的可行性[J]. 尹合勇,孙振,李盼,余晓明,徐亦驰,孙逊,肖波,王玉,汪爱媛,郭全义,徐文静,卢世璧,彭江. 中国组织工程研究. 2016(34)
博士论文
[1]富含BMP-2的PLGA材料制备及对兔关节软骨缺损修复的应用研究[D]. 曹豫江.重庆医科大学 2017
硕士论文
[1]TGF-β1对大鼠脂肪干细胞体外软骨形成能力影响的研究[D]. 李强.中南大学 2010
本文编号：3596601
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