北五味子多糖的提取工艺优化及抗炎性衰老作用的研究

发布时间：2022-08-04 12:26

　　目的:炎性衰老是指在衰老过程中促炎细胞因子水平增加的慢性炎性状态,随衰老的加剧进行性升高,被视为决定机体衰老进程的重要因素,与多种疾病密切相关,是当今医学研究热点。氧化应激-炎症-衰老学说被认为是目前炎性衰老的主要发生机制之一,而北五味子是中国传统中药,其多糖成分（Fructus Schisandrae Chinensis Polysacchard,FSCP）具有保肝、抗氧化、抗炎、抗衰老等多种药理作用,但目前FSCP抗炎性衰老作用机制的研究较少,为此本研究旨在优化FSCP的提取工艺,构建细胞炎性衰老模型及小鼠衰老模型,通过体内、体外实验检测炎性细胞因子、活性氧、线粒体膜电位、抗氧化酶、衰老基因及衰老相关表型等,从细胞及整体水平探讨FSCP对炎性衰老的影响;通过检测p65、I-κBα蛋白探索FSCP可否参与调控NF-κB信号通路,明确FSCP抗炎性衰老的分子机制,以期为FSCP抗炎性衰老的研究提供理论依据。方法:（1）热水浸提法提取FSCP;通过反复冻融、sevag及透析法对FSCP进行纯化;在单因素实验的基础上,利用四因素三水平正交分析法优化FSCP的提取工艺,研究提取温度、提取时间... 

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第1章 引言
    1.1 文献综述
        1.1.1 五味子多糖的药理作用
        1.1.2 炎性衰老与疾病
    1.2 研究背景与目的
第2章 实验研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验主要试剂
        2.1.2 实验主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 北五味子多糖(FSCP)的提取
        2.2.2单因素实验
        2.2.3 四因素三水平L9(3~4)正交分析优化FSCP提取工艺
        2.2.4 FSCP的定量分析
        2.2.5 FSCP体外抗氧化能力检测
        2.2.6 FSCP体外抗炎性衰老活性检测
        2.2.7 FSCP体内抗炎性衰老活性检测
        2.2.8 统计分析
第3章 实验结果
    3.1 FSCP的提取与纯化
        3.1.1 单因素分析法检测多糖得率
        3.1.2 四因素三水平正交分析法得到FSCP的最佳提取方案
    3.2 FSCP的理化性质
        3.2.1 FSCP的总糖及葡萄糖含量
        3.2.2 FSCP的蛋白含量
    3.3 FSCP的体外抗氧化能力检测
    3.4 FSCP的体外抗炎性衰老活性
        3.4.1 巨噬细胞炎性增殖的检测
        3.4.2 FSCP对 LPS刺激的巨噬细胞产生促炎细胞因子的抑制作用
        3.4.3 FSCP对 LPS刺激的巨噬细胞产生SA-β-gal的抑制作用
        3.4.4 FSCP对 LPS刺激的巨噬细胞SAHF的抑制作用
        3.4.5 FSCP对 LPS刺激的巨噬细胞产生ROS的抑制作用及对线粒体膜电位的保护作用
    3.5 FSCP的体内抗炎性衰老活性
        3.5.1 FSCP对小鼠体重、肝重及肝指数的影响
        3.5.2 FSCP对 D-gal诱导小鼠SOD、GSH-Px活性及MDA水平的影响
        3.5.3 FSCP对 D-gal诱导小鼠肝组织产生促炎细胞因子的抑制作用
        3.5.4 FSCP对 D-gal诱导小鼠肝组织损伤的保护作用
        3.5.5 FSCP对 D-gal诱导小鼠肝组织SAHF的抑制作用
        3.5.6 FSCP对细胞及小鼠肝组织中p53、p16 蛋白及磷酸化p53、p16蛋白表达的抑制作用
        3.5.7 FSCP抑制炎性衰老的分子机制
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
作者简介及科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]金耳多糖的提取、分离和纯化及抗氧化活性的研究[D]. 王宣东.聊城大学 2018
[2]五味子多糖对疲劳的改善作用以及其代谢机制的探究[D]. 郭欢欢.陕西师范大学 2016
[3]四种中药多糖及两种中药油脂的免疫调节作用[D]. 佟彤.北京协和医学院 2016
[4]过氧化氢诱导的丝氨酸磷酸化修饰对p16蛋白功能的影响[D]. 马文龙.东北师范大学 2015



本文编号：3669537