放线菌素V抗肿瘤活性及其作用机制研究

发布时间：2022-12-10 16:26

　　癌症的发生发展是对人类健康和生命的主要威胁之一。根据有关国家权威癌症数据机构的报导,全球将近四分之一到三分之一的每年新增恶性癌症患者和每年新增的死亡癌症患者均发生中国,且其所患者占的癌症死亡比率仍在不断增加和上升。因此,癌症的早期治疗目标靶点、治疗方法手段以及抗癌药物的发现和应用已成为了我国肿瘤科学家的重要努力和研究方向。运用手术治疗、化学药物疗法和放射疗法都是现如今我国临床上最常使用的三种治疗癌症方案,在这之中,化学药物疗法被广泛认为在临床上是重要、有效且最为普遍的一种治疗癌症方法。先导药物或新药的发现途径有许多种,从天然的植物微生物中分离、提取出高生理活性的化合物则是其中一种有效途径。放线菌素是一类从微生物中分离出来的色素肽内酯类天然抗生素。其中,放线菌素D是率先被批准作为抗癌药物用于临床治疗,尤其是对儿童肾母细胞瘤有理想的疗效,总体治愈率高达80%。不足的是,放线菌素D在临床治疗中表现出的严重肝毒性,极大程度上限制了其的使用。放线菌素V是放线菌素D的结构类似物,由L-4-酮脯氨酸替代L-4-脯氨酸。有研究表明,放线菌素V对多种肿瘤细胞的抑制作用均优于放线菌素D,但仍未对放线菌素V... 

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词汇总表
第一章 绪论
    1.1 肿瘤及抗肿瘤药物
    1.2 放线菌素v的研究进展
    1.3 P53信号通路及其功能
        1.3.1 p53与细胞周期
        1.3.2 p53与细胞程序性死亡
        1.3.3 p53与非小细胞肺癌
第二章 放线菌素V诱导人非小细胞肺痛细胞A549凋亡
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 化合物及实验试剂
        2.1.3 试剂配制
        2.1.4 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞复苏、培养及冻存
        2.2.2 MTT实验检测化合物的细胞毒性
        2.2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡
        2.2.4 DAPI染色实验
        2.2.5 细胞全蛋白的提取及定量
        2.2.6 Western Blot检测
    2.3 实验结果
        2.3.1 MTT实验结果
        2.3.2 放线菌素V诱导肺癌A549细胞凋亡
        2.3.3 DAPI实验结果
        2.3.4 放线菌素V对Bcl-2家族蛋白影响
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 放线菌素V诱导人非小细胞肺癌A549细胞G2/M期阻滞
    3.1 实验材料
        3.1.1 细胞株
        3.1.2 化合物和实验试剂
        3.1.3 试剂配置
    3.2 实验方法
        3.2.1 细胞培养
        3.2.2 流式细胞仪检测细胞周期分布
        3.2.3 Western Blot检测
    3.3 实验结果
        3.3.1 放线菌素V诱导肺癌A549细胞G2/M期阻滞
        3.3.2 放线菌素V对M-期促进因子的影响
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 P53信号通路介导放线菌素V诱导的凋亡及G2/M期阻滞
    4.1 实验材料
        4.1.1 细胞株
        4.1.2 化合物和实验试剂
        4.1.3 试剂配置
        4.1.4 实验仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 细胞培养
        4.2.2 Western Blot检测
        4.2.3 mRNA提取及real-time PCR检测
        4.2.4 流式细胞仪检测细胞周期分布
        4.2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡
        4.2.6 MTT实验检测化合物的细胞毒性
    4.3 实验结果
        4.3.1 放线菌素V诱导p53 mRNA的转录和蛋白的表达
        4.3.2 P53的抑制削弱了放线菌素V的诱导凋亡和周期阻滞
        4.3.3 P53的抑制降低放线菌素V的细胞毒性
    4.4 讨论
    4.5 总结
参考文献
致谢
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学位论文评阅及答辩情况表


【参考文献】：
期刊论文
[1]p53基因相关的细胞非经典死亡[J]. 孙鹏,赵云富.  中国肿瘤生物治疗杂志. 2019(05)
[2]肿瘤靶向药物的分类与研究进展[J]. 叶佳丹,余克富,朱斌,司延斌,赵志刚.  药学进展. 2018(05)
[3]抗肿瘤抗生素药物制剂的研究进展[J]. 刘薇,陈丽青,辛欣,黄伟,高钟镐.  药学学报. 2018(06)
[4]抗肿瘤抗生素的作用机制研究进展[J]. 邓卫宁,赵力挥,王璐.  现代药物与临床. 2018(02)
[5]p53表达对老年晚期非小细胞肺癌化疗效果的影响研究[J]. 王阳,张黎黎,卢颖,苗小青,李淑华,刘堃,张佩.  中国全科医学. 2015(09)
[6]晚期非小细胞肺癌的药物治疗进展[J]. 胡毅,陶海涛.  中国药物应用与监测. 2014(06)
[7]细胞凋亡途径及其机制[J]. 李敏,林俊.  国际妇产科学杂志. 2014(02)
[8]p53基因及其功能研究进展[J]. 李文娟,潘庆杰,李美玉.  生物技术通讯. 2014(02)
[9]局部晚期非小细胞肺癌p53蛋白表达与同步放化疗疗效的关系研究[J]. 汪宏斌,杨俊泉.  中国全科医学. 2014(03)
[10]植物生物碱抗肿瘤的研究进展[J]. 叶友进,王春雷,芦柏震.  医药导报. 2012(07)

博士论文
[1]P53与细胞衰老、自噬和凋亡[D]. 雷岳山.武汉大学 2013

硕士论文
[1]两株泥蜂共生链霉菌次级代谢产物及其生物活性研究[D]. 宋亚洁.山东大学 2018
[2]海洋放线菌素X2的抗肿瘤和抗病毒研究[D]. 施珊珊.暨南大学 2009



本文编号：3717101