慈菇多糖对小鼠免疫功能及mTOR信号通路的影响

发布时间：2017-05-18 07:00

  本文关键词：慈菇多糖对小鼠免疫功能及mTOR信号通路的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的通过观察慈菇多糖干预免疫力低下模型和S180肿瘤模型小鼠的实验,验证其调节免疫和抗肿瘤的功效。通过观察慈菇多糖干预巨噬细胞的实验,验证其调节巨噬细胞的免疫功能并初步探讨其作用机制与m TOR信号通路相关的可能性。方法(1)、慈菇多糖对免疫力低下小鼠的干预:将ICR雄性小鼠50只按体重随机分为5组:对照组、模型组、慈菇多糖不同剂量组(100、200、300mg/kg),连续灌胃慈菇多糖28天,对照组和模型组灌胃等量蒸馏水;第21天,对照组皮下注射等量生理盐水,其余4组小鼠皮下注射氢化可的松25mg/kg,连续6天制备免疫功能低下模型,观察各组小鼠脏器指数、巨噬细胞碳廓清吞噬指数和荧光微球指数等指标。慈菇多糖对S180荷瘤小鼠的干预:将ICR雄性小鼠56只按体重随机分为7组:对照组、模型组、慈菇多糖不同剂量组(100、200、300mg/kg·d)、环磷酰胺组(20 mg/kg·d)和香菇多糖组(0.577 mg/kg每周2次)。第1到11天,慈菇多糖剂量组灌胃,其余组灌胃等量蒸馏水,第12天用S180细胞给除对照组以外的6组小鼠构造肿瘤模型,并且连续11天按上述剂量全部灌胃,对照组灌胃等量蒸馏水。第23天测定小鼠脏器指数、抑瘤率和血清IL-2、TNF-α、SOD、MDA。(2)、慈菇多糖对RAW264.7巨噬细胞的干预:分别用ELISA和Griess法检测不同剂量慈菇多糖(5、50、500μg/m L)和香菇多糖(100μg/m L)对巨噬细胞分泌细胞因子的影响;用RT-PCR和Western Blot检测上述剂量组对巨噬细胞m TOR/PTEN基因表达变化的影响。结果(1)慈菇多糖各剂量组免疫低下小鼠脏器指数和巨噬细胞吞噬指数均高于模型组小鼠(P0.05),慈菇多糖低剂量组小鼠巨噬细胞荧光微球指数高于模型组小鼠(P0.05)。与模型组S180荷瘤小鼠相较,慈菇多糖中、高剂量组小鼠的脾脏指数升高(P0.05);慈菇多糖各剂量组的IL-2、TNF-α水平均有所提高(P0.05);慈菇多糖高剂量组瘤重降低,抑瘤率为0.684(P0.05);慈菇多糖高剂量组SOD值增高、MDA值下降(P0.05)。(2)慈菇多糖对RAW264.7体外干预:与对照组比较,慈菇多糖各剂量组巨噬细胞分泌的IL-2、TNF-α增多;慈菇多糖高剂量组巨噬细胞内产生NO增多(p0.05)。在RT-PCR实验中,慈菇多糖中、高剂量组m TOR m RNA表达下调至对照组的0.578倍和0.391倍(p0.05);在Western Blot实验中,与对照组相比,慈菇多糖高剂量组m TOR蛋白表达下降(p0.05)。而慈菇多糖各剂量组PTEN m RNA和蛋白表达与对照组相比均无统计学意义(p0.05)。结论(1)慈菇多糖在一定程度上能够提高小鼠非特异性免疫力,既可以提高巨噬细胞的吞噬能力、促进细胞因子的分泌,又可以间接抑制S180荷瘤小鼠实体瘤的生长。(2)慈菇多糖会促进m TOR基因的表达下降,其与m TOR信号通路有一定的关系,可以抑制通路并促进免疫功能的提高。因其对PTEN基因没有预期的效果,所以其不是通过PI3K/AKT/PTEN/m TOR这条通路产生作用,可能通过m TOR其他信号通路产生作用。
【关键词】：慈菇多糖 免疫调节 巨噬细胞 mTOR
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 中英文对照表4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 引言11-14
• 第一部分 慈菇多糖对模型小鼠的免疫调节作用14-28
• 1 材料与方法14-19
• 2 结果19-25
• 3 讨论25-27
• 4 结论27-28
• 第二部分 慈菇多糖对巨噬细胞和m TOR信号通路的影响28-44
• 1 材料与方法28-37
• 2 结果37-41
• 3 讨论41-43
• 4 结论43-44
• 参考文献44-49
• 致谢49-50
• 综述50-59
• 参考文献55-59
• 附录：攻读学位期间发表的论文59

【参考文献】

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本文编号：375338