珊瑚真菌OUCMDZ-3658的次生代谢产物研究

发布时间：2017-05-21 21:07

  本文关键词：珊瑚真菌OUCMDZ-3658的次生代谢产物研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：海绵和珊瑚属于海洋低等无脊椎腔肠动物,在海洋生态系统中分布广泛且在生存竞争中能够产生独特的化学防御物质,是抗菌、抗污、抗肿瘤、防附着、拒捕食等生物活性分子的重要来源,构成现代医药研发的重要资源。海绵和珊瑚具有独特的双层结构及海水过滤的捕食策略,提供给微生物巨大的栖息系统以形成共附生关系,微生物的聚集体积可占海绵生物量的50-60%；而且研究发现海绵珊瑚的共附生微生物可能是那些生物活性分子的来源而并非是其宿主；海绵珊瑚的代谢产物研究虽然取得许多重大进展但仍受其药源问题的制约；基于以上事实科学家们逐渐将目光转移到其共附生微生物的研究上来。地跨亚热带及热带的中国南海是海绵珊瑚的主要聚集地,而且珊瑚礁数量众多类型齐全,具有很高的研究价值,因此,为获得具有研究意义的次级代谢产物本论文选定中国南海的海绵和珊瑚样品进行研究。对来源于西沙永兴岛及七连屿的15个海绵和珊瑚样品进行微生物的分离主要包括真菌和放线菌。选用梯度稀释法对上述样品进行真菌及放线菌的分离,最终得到海绵和珊瑚的共附生真菌115株和放线菌72株。将分离得到的共附生微生物通过不同的培养方式将其发酵获得代谢产物,然后进行TLC特征显色分析挑选出具有生物碱或卤素特征显色的菌株,然后对这些具有特殊显色的菌株进行HPLC指纹分析观察其紫外吸收,根据特呈异性和系列性吸收原则进行菌株的挑选。接着对挑选出的株菌测定其抗菌(Candida albicans和Staphylococcus aureus)活性和细胞毒(MCF-7.A549和K562)活性并关注其中表现出较高活性的菌株。综合以上各个方面的考察最终确定1株"Talented Strains"作为目标菌株以发酵进行进一步的次级代鲥产物研究。根据本论文的研究指导方法挑选出真菌OUCMDZ-3658作为目标菌株进行最优发酵条件的摸索,主要评价依据为发酵效价、生物活性以及化学特异性；优化方式主要通过改变其培养基成分、培养方式、培养基的pH以及盐度等。在最优条件下进行规模化发酵并获得发酵产物,综合利用薄层色谱、硅胶和凝胶柱色谱、制备型高效液相色谱等分离手段对发酵产物进行单体化合物的分离与纯化,获得14个化合物单体(1-14)。利用NMR(核磁共振谱)、MS(质谱)、UV(紫外光谱)、OR(比旋光)、CD(圆二色谱)等现代波谱学方法确定了这14个化合物的结构,包括5个喹唑啉酮类生物碱(1-5)、3个二酮哌嗪类生物碱(8-10)。对所得的单体化合物进行活性评价包括抗肿瘤活性、抑菌活性以及糖苷酶抑制活性,结果表明：化合物10具有抑制白色念珠菌的活性,化合物8、9和11具有微弱的抑制产气杆菌的活性；化合物5对K562细胞株有抑制活性,化合物3对MCF-7细胞株有一定的抑制活性；化合物3和4对α-糖苷酶有与阳性药相当的抑制活性,为α-糖苷酶抑制剂的发现提供了新的结构类型。
【关键词】：珊瑚 共附生 次级代谢产物 化学丰富度 生物活性
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R915
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 前言12-29
• 参考文献24-29
• 第一章 共附生真菌的分离及筛选29-57
• 第一节 菌株的分离与纯化29-38
• 第二节 “Talented Strains”的筛选38-45
• 第三节 目标菌株的发酵条件的摸索45-55
• 第四节 小结与讨论55-57
• 第二章 珊瑚真菌OUCMDZ-3658的次生代谢产物研究57-75
• 第一节 菌株次生代谢产物的提取分离57-60
• 第二节 单体化合物的结构鉴定60-72
• 第三节 化合物的活性评价72-73
• 第四节 小结与讨论73-75
• 第三章 实验部分75-79
• 第一节 实验材料、试剂与材料75-77
• 第二节 实验用溶液的配制77-79
• 参考文献79-80
• 结语与创新点80-81
• 个人简历及本论文相关研究成果81-82
• 致谢82-83
• 附录83-94

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1 王文玲;珊瑚真菌OUCMDZ-3658的次生代谢产物研究[D];中国海洋大学;2015年

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本文编号：384821