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RNA-seq揭示骨髓间充质干细胞调控蛛网膜下腔出血后小胶质细胞介导的神经炎症的潜在机制

发布时间:2024-02-07 03:35
  蛛网膜下腔出血(Subarachnoid Hemorrhage,SAH)是一种具有高致死率和高致残率特点的脑血管疾病。小胶质细胞作为中枢神经系统的(Central Nervous System,CNS)固有免疫细胞,在SAH后通过释放多种炎症因子参与炎症反应,因此,调节活化小胶质细胞介导的神经炎症成为SAH的潜在治疗策略。最新研究表明,骨髓间充质干细胞(Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells,BM-MSCs)在SAH后可以调节小胶质细胞活化、抑制炎症因子的产生,因此对SAH具有潜在治疗作用。然而,BM-MSCs在SAH后调节小胶质细胞活化的具体机制尚不明确。因此,本研究采用氧合血红蛋白(Oxyhemoglobin,OxyHb)刺激小鼠来源的BV2小胶质细胞模拟SAH体外模型。第一部分研究BM-MSCs对OxyHb诱导的BV2小胶质细胞活化的影响;第二部分探索BM-MSCs调节OxyHb诱导的BV2小胶质细胞活化的具体机制。为BM-MSCs在将来SAH治疗的临床转化提供实验依据。一.BM-MSCs对OxyHb诱导的BV2小胶质细胞活化的影响研...

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1BM-MSCs培养和鉴定Fig.1IsolationandCharacterizationofBM-MSCs

图1BM-MSCs培养和鉴定Fig.1IsolationandCharacterizationofBM-MSCs

西南医科大学硕士学位论文-20-结果1BM-MSCs培养和鉴定BM-MSCs从C57BL/6J小鼠骨髓中分离培养后,镜下观察可见第四代的BM-MSCs为贴壁状态、外观呈成纤维细胞样(图1A)。采用流式细胞术通过细胞表面抗原鉴定BM-MSCs纯度,结果显示,BM-MSCs阳性标记物....


图2BM-MSCs共培养对OxyHb诱导的BV2细胞NO产生的影响

图2BM-MSCs共培养对OxyHb诱导的BV2细胞NO产生的影响

西南医科大学硕士学位论文-21-状态[22-24]。结果表明,NO的释放量同OxyHb对BV2细胞的刺激呈现时间依赖性的关系,且于24h时达到顶峰(图2A),重要的是,相较于OxyHb组,OxyHb+BM-MSCs组可降低约30%的NO释放量(图2B)。此外,细胞形态观察可见,c....


图3BM-MSCs共培养调节OxyHb诱导的炎症因子基因表达以及小胶质细胞的极化

图3BM-MSCs共培养调节OxyHb诱导的炎症因子基因表达以及小胶质细胞的极化

西南医科大学硕士学位论文细胞M1型标记物CD16/32及M2型标记物CD206免疫荧光共染得到验证。以上结果表明,BM-MSCs主要调节小胶质细胞M1极化,而非M2极化。


图4GO分析与KEGG分析OxyHb组与OxyHb+BM-MSCs组差异表达基因

图4GO分析与KEGG分析OxyHb组与OxyHb+BM-MSCs组差异表达基因

西南医科大学硕士学位论文-31-结果1BM-MSCs共培养对OxyHb刺激的BV2小胶质细胞内炎症反应相关的转录组表达的影响本研究进一步采用RNA-seq测序方法,深入探索BM-MSCs调节OxyHb诱导的BV2小胶质细胞活化的潜在机制,进而确定OxyHb组和OxyHb+BM-M....



本文编号:3896693

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