高分辩质谱法检测小鼠粪便胆汁酸代谢轮廓的方法学研究及应用

发布时间：2025-01-17 09:04

　　目的1.建立一种检测小鼠粪便胆汁酸代谢轮廓的超高液相色谱-三重四级杆飞行时间质谱（ultra performance liquid chromatography-triple quadrupole time-of-flight mass spectroscopy,UPLC-Triple TOF-MS/MS）方法。2.采用UPLC-Triple TOF-MS/MS方法对低脂饮食（low fat diet,LFD）组、高脂饮食肥胖抵抗（high fat diet-induced obesity resistance,DIR）组和高脂饮食肥胖（high fat diet-induced obesity,DIO）组小鼠粪便及小肠胆汁酸代谢轮廓进行分析,发现三组粪便及小肠胆汁酸代谢轮廓的差异,探索成分胆汁酸与肥胖的相关性。方法1.粪便及小肠内容物样本经固相萃取处理后,采用UPLC-Triple TOF-MS/MS法进行检测。待测物经Kinetex XB-C18反相色谱柱进行梯度洗脱分离,流动相条件:15 mmol/L乙酸铵（流动相A）和乙腈（流动相B）。通过电喷雾离子源（electrospray ...

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图2在不同的预处理条件下，粪便胆汁酸与IS峰面积比的直方图

重庆医科大学硕士研究生学位论文19图2在不同的预处理条件下，粪便胆汁酸与IS峰面积比的直方图（A）淋洗条件，（B）洗脱条件（n=3）Fig.2ThehistogramofthepeakarearatiooffecalbileacidstoISindifferentpretreat....

图320个质控样本的PCA得分图

3.6.小鼠粪便的胆汁酸代谢轮廓分析3.6.1.质控结果质控样本中BAs峰面积的变异系数在2.5-19.4%之间。采用主成份分析（principalcomponentanalysis，PCA），观察20个QC样本的BAs代谢轮廓分布（图3）....

图465种胆汁酸的提取离子色谱图（A）胆汁酸混标溶液（2μmol/L），（B）小鼠小肠内容物和（C）小鼠粪便Fig.4Theextractionionchromatogramsof65bileacids(A)Amixturestandardsolutionofbileacids(2μmol/L),(B)micesmallintestinalcontentsand(C)micefecal

重庆医科大学硕士研究生学位论文25图465种胆汁酸的提取离子色谱图（A）胆汁酸混标溶液（2μmol/L），（B）小鼠小肠内容物和（C）小鼠粪便Fig.4Theextractionionchromatogramsof65bileacids(A)Amixturestandardsol....

图7LFD、DIR、DIO组小鼠胆汁酸代谢轮廓PLS-DA得分图（A）粪便，（B）小肠内容物Fig.7ScoreplotsofPLS-DAmodelforbileacidsprofilinginLFD,DIRandDIOgroupsof

重庆医科大学硕士研究生学位论文34粪便BAs代谢轮廓具有一定的区分趋势（图7A），模型参数分别为：R2Y=0.418，Q2=0.149；R2Y=0.332，Q2=0.244；R2Y=0.223，Q2=0.068。说明模型拟合程度一般，预测能力较差。LFD与DIR组、LFD与DIO....

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