AMPK抑制剂对老龄小鼠脑缺血再灌注神经元凋亡的影响

发布时间：2017-07-04 13:06

  本文关键词：AMPK抑制剂对老龄小鼠脑缺血再灌注神经元凋亡的影响

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【摘要】：目的:通过应用磷酸腺苷活化蛋白激酶抑制剂Compound C调控单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的活性,观察并探讨AMPK抑制剂对老龄小鼠脑缺血再灌注海马神经元凋亡及相关凋亡蛋白Caspase-3表达情况的调控。方法:健康SPF级雄性C57/BL6老年小鼠96只,18-20月龄,体重34-36g,采用随机数字表法将其分为3个大组:假手术(S)组,缺血再灌注(I/R)组,缺血再灌注药物处理(T)组,每组均32只。采用夹闭双侧颈总动脉法建立脑缺血再灌注模型。先脑缺血15分钟然后再灌注,再灌注药物处理组于夹闭双侧颈总动脉时向小鼠腹腔注射AMPK抑制剂Compound C(20mg/kg),再灌注组于相同时间点给予同等剂量的生理盐水。分别于再灌注4h,48h后,HE染色法观察海马CA1区锥形细胞病理学结果,TUNEL法检测神经元凋亡,PCR法测AMPKα2m RNA的表达,western blot法测定p AMPKα,凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果:与S组比较,I/R组、T组再灌注各时间点海马CA1区正常神经元计数减少,凋亡神经元计数增多(P0.05),与S组比较,IR组、T组在再灌注48h时,p AMPKα、Caspase-3表达量增多(P0.05);与I/R组相比,T组在再灌注48h时海马CA1区凋亡神经元计数没有统计学意义(P0.05),p AMPKα的表达量明显减少(P0.05),Caspase-3的表达量没有统计学意义(P0.05)。各组间AMPKα2m RNA的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:磷酸腺苷活化蛋白激酶抑制剂对老龄小鼠脑缺血再灌注无明显的神经保护作用。
【关键词】：AMPK 抑制剂 脑缺血/再灌注损伤 老龄 凋亡
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614
【目录】：

• 摘要7-8
• Abstract8-9
• 前言9-11
• 材料和方法11-18
• （一）材料11-12
• 1.1 主要药品及试剂11-12
• 1.2 主要的仪器及设备12
• （二）方法12-18
• 2.1 实验对象与分组12
• 2.2 前脑缺血模型的建立12-13
• 2.3 实时荧光定量PCR13-14
• 2.4 Western Blot14-16
• 2.5 脑组织取材及处理16
• 2.6 HE染色16
• 2.7 TUNEL法检测神经元凋亡16-17
• 2.8 统计学处理17-18
• 结果18-23
• 1.1 HE染色18-21
• 1.2 TUNEL法检测神经元凋亡21
• 1.3 实时荧光定量PCR测AMPKα2mRNA21
• 1.4 Western Blot法检测蛋白pAMPK、caspase-3 的表达水平21-23
• 讨论23-26
• 结论26-27
• 参考文献27-31
• 综述31-37
• 参考文献35-37
• 病例分析37-39
• 攻读学位期间发表文章情况39-40
• 致谢40-41

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本文编号：517861