通腑解毒法对脑卒中大鼠胃肠病理变化及Cajal细胞相关性的研究

发布时间：2017-08-11 01:17

  本文关键词：通腑解毒法对脑卒中大鼠胃肠病理变化及Cajal细胞相关性的研究

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【摘要】：目的:本课题主要就急性缺血性脑卒中即急性脑梗死后胃肠功能异常展开讨论。腑气不通是急性缺血性中风的重要并发症,亦是中风的诱发因素。中风的风、火、痰、瘀等致病因素皆可蕴积化毒,毒邪亦可致中风。故应用通腑解毒法是治疗腑气不通兼毒型中风的常用治疗原则。Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)存在于胃肠道之中,具有胃肠电起搏功能。急性缺血性脑卒中后引起胃肠功能改变可能与胃肠Cajal形态及功能的变化成相关性。本课题在中医理论的指导下应用中药大黄干预,了解通腑解毒法改善卒中后胃肠功能障碍的作用机制,及观察Cajal间质细胞的变化情况。1观察急性缺血性脑卒中模型下大鼠胃肠的病理变化。2了解该模型下大鼠胃肠ICC的结构及病理变化,探讨急性缺血性脑卒中合并胃肠功能障碍的潜在的发病机制。3中医理论的指导下应用中药大黄干预,了解通腑解毒法改善卒中后胃肠功能障碍的机制。4讨论运用通腑解毒法治疗急性缺血性脑卒中后胃肠功能紊乱的可行性分析。方法:本研究采用线栓法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型,取以SPF级Wister雄性大鼠108只为实验对象,以通腑解毒法为主要治则,选用中药大黄为主要干预药物,西药以多潘立酮进行药物对比,将实验大鼠随机分为大黄颗粒高剂量组,大黄颗粒中剂量组,多潘立酮组。并建立正常组大鼠、假手术组大鼠及模型组大鼠作为对照。每组6只,对假手术组、模型组、大黄颗粒高剂量组、大黄颗粒中剂量组、多潘立酮组大鼠分别进行24h、4d及7d大鼠神经功能缺损情况(以longa评分为标准)观察,主要探讨应用通腑解毒法观察缺血性脑卒中大鼠胃肠Cajal间质细胞的内部变化情况,观察造模后胃肠粘膜的变化及胃肠激素之P物质(SP)和生长抑素(SS)的状态,以进一步评估通腑解毒法的作用效果及从细胞学角度探讨Cajal细胞的内在作用机理。结果:1.成功的建立大鼠大脑中动脉栓塞模型。中药用大黄干预,将大黄颗粒分高中剂量组,西药用多潘立酮对比,生理盐水用于假手术组、正常组及模型组中,每日灌胃,于24h,4d,7d后成功摘取实验大鼠胃肠组织,及时置于固定液中送检。做好标本进行针对性的观察。2.病理观察结果:2.1.肉眼观察:模型组大鼠胃肠粘膜可出现出血点或溃疡点等损害,有典型的食积表现,7d组重于4d组;大黄颗粒高、中剂量组、正常组,假手术组偶可见溃疡、出血、及糜烂等损害,但从数量上及程度上较模型组少。2.2.光镜观察:在光镜下观察模型组大鼠胃肠粘膜有大量的炎细胞浸润,粘膜及粘膜下层明显充血、水肿;7d组损害较4d组明显。大黄高剂量及大黄中剂量组的胃肠粘膜仍可见上述粘膜损害,但程度较同时间段模型组减轻,改善程度大小依次为大黄高剂量组大黄中剂量组多潘立酮组假手术组模型组。2.3.透射电镜(TEM)观察:在透射电镜下观察Cajal结构变化。药物干预后观察细胞核染色质、线粒体、缝隙连接、细胞膜、细胞器膜的结构变化情况。发现:缝隙连接变化情况依次是多潘立酮组大黄颗粒中剂量组大黄颗粒高剂量组假手术组模型组。2.4.免疫组化组:分别对大黄颗粒高剂量组,大黄颗粒中剂量组,多潘立酮组,假手术组及模型组进行免疫组化,观察胃肠激素之P物质及生长抑素的变化情况。结果发现,胃肠粘膜P物质变化情况:模型组多潘立酮组大黄颗粒中剂量组大黄颗粒高剂量组假手术组正常组。生长抑素变化情况:模型组假手术组多潘立酮组大黄颗粒中剂量组大黄颗粒高剂量组正常组。结论:胃肠道功能障碍是缺血性脑中风急性期的常见并发症之一。中医的通腑解毒法在治疗缺血性脑卒中急性期并发胃肠功能紊乱方面有效,更证明了大黄的独特的作用优势。大黄能够有效干预胃肠道功能损害,疗效与剂量存在相关性。实验中发现Cajal细胞形态及结构的明显变化,说明急性缺血性脑卒中后胃肠功能改变与胃肠起搏细胞Cajal密切相关,其中胃肠激素中的P物质及生长激素也可能是潜在的发病机制。1、急性缺血性脑卒中大鼠存在胃粘膜形态学的病理变化。2、胃肠Cajal间质细胞结构与功能的变化可能是导致急性缺血性脑卒中胃肠功能障碍的发生机制之一。3、大黄对急性缺血性脑卒中后胃肠功能障碍的治疗作用可能与改善胃肠Cajal间质细胞的结构与功能有关。4、运用通腑解毒法治疗急性缺血性脑卒中后胃肠功能紊乱行之有效。
【关键词】：通腑解毒法 大黄 急性缺血性脑卒中 胃肠功能障碍 胃肠Cajal细胞
【学位授予单位】：山东中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R277.7
【目录】：

• 提要3-6
• Abstract6-12
• 引言12-14
• 第一部分 理论研究14-19
• 一 脑肠相通理论的研究14-15
• 二 毒邪致病学说体制15-17
• 三 通腑与解毒联合大法17
• 四 大黄的相关文献研究17-19
• 第二部分 实验研究19-28
• （一）材料19-20
• 1 实验动物19
• 2 实验药品19
• 3 实验试剂19
• 4 实验仪器与器械19-20
• （二）方法20-24
• 1．大鼠急性脑梗死模型的制备方法（即大脑中动脉栓塞模型MCAO模型）20-21
• 2.实验分组21
• 3.给药方法21-22
• 4.动物处死方法及取材22
• 5．标本处理方法22-23
• 5.1 石蜡组织切片制备22
• 5.2 HE染色22-23
• 5.3 免疫组化标本制备23
• 5.4 电镜标本制备23
• 6．大鼠腹腔解剖观察23
• 7．肉眼观察大鼠胃肠粘膜23
• 8．评分标准23-24
• 8.1 HE染色后胃肠粘膜组织形态学观察及评分23-24
• 8.2 免疫组化评分标准24
• （三）数据处理24
• （四）结果24-27
• 1.标本观察24-26
• 2.各组大鼠胃肠组织病理形态学改变的结果评分26-27
• 2.1 各组大鼠胃组织病理形态学变化统计评分26
• 2.2 各组大鼠小肠组织病理形态学变化统计评分26
• 2.3 各组大鼠胃肠生长抑素变化情况统计评分26-27
• 2.4 各组大鼠胃肠P物质变化情况统计评分27
• （五）结论27-28
• 第三部分 讨论28-32
• 一 本实验总结模型制备经验28-29
• 二 对照组药物多潘立酮的选择理由29-30
• 三 胃肠激素之P物质与生长抑素30
• 1．P物质30
• 2．生长抑素（Somatostatin,SS）30
• 四 大黄的现代药理学研究30-31
• 五 本课题的创新点31-32
• 结语32-33
• 参考文献33-36
• 论文综述36-43
• 参考文献40-43
• 附图43-52
• 附录52-53
• 实验表格53-54
• 致谢54-55
• 论文著作55-59
• 详细摘要59-66

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本文编号：653570