双氢青蒿素对人增生性瘢痕成纤维细胞体外作用及其机制的研究

发布时间：2017-09-16 23:24

  本文关键词：双氢青蒿素对人增生性瘢痕成纤维细胞体外作用及其机制的研究

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【摘要】：目 的：本实验旨在探究双氢青蒿素在体外对人增生性瘢痕成纤维细胞的作用并探讨其相关的作用机制为临床上使用双氢青蒿素治疗人增生性瘢痕提供一定的理论基础。材料与方法：使用噻唑蓝(MTT)实验检测双氢青蒿素作用24h和48h的细胞毒性。通过台盼蓝染色计数活细胞检测双氢青蒿素作用24h和48h后对细胞增殖的影响。划痕实验用来检测双氢青蒿素对人增生性瘢痕成纤维细胞迁移能力的作用。对双氢青蒿素作用24h后的细胞进行AV-PI双染色通过流式细胞仪检测细胞凋亡。双氢青蒿素作用24h后细胞周期变化则通过试剂盒染色后用流式细胞仪检测。应用Western blot对转化生长因子-β1 (TGF-β1)、半胱天冬蛋白酶3(caspase3)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和Ⅰ型胶原的蛋白表达进行定量。TGF-β 1 mRNA的表达则通过实时定量PCR (Real time RT-PCR)来检测。结 果：1.双氢青蒿素呈时间依赖性和剂量依赖性地对人增生性瘢痕成纤维细胞表现出明显的细胞毒性(24h的IC50值为14.0u M,48h的IC50值为9.3 μ M)并能显著抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。2.双氢青蒿素可以剂量依赖性地抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的迁移。3.双氢青蒿素可以剂量依赖性地激活caspase3来增加人增生性瘢痕成纤维细胞的凋亡还可以通过抑制Cyclin D1表达将人增生性瘢痕成纤维细胞周期阻滞在G0-G1期。4.双氢青蒿素可以剂量依赖性地抑制人增生性瘢痕成纤维细胞内TGF-β 1和Ⅰ型胶原的表达。结论：1.双氢青蒿素通过激活caspase3来增加人增生性瘢痕成纤维细胞的凋亡并通过抑制Cyclin D1诱导人增生性瘢痕成纤维细胞周期阻滞在G0-G1期从而对人增生性瘢痕成纤维细胞表现出细胞毒性和增殖抑制作用。2.双氢青蒿素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的迁移。3.双氢青蒿素通过下调TGF-β1基因和蛋白的表达而减少Ⅰ型胶原的表达可能是双氢青蒿素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的机制之一。
【关键词】：双氢青蒿素 人增生性瘢痕成纤维细胞 转化生长因子-β1 Ⅰ型胶原
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R622
【目录】：

• 摘要4-6
• abstract6-8
• 英文缩略语8-9
• 前言9-12
• 材料与方法12-27
• 实验结果(附论文图片)27-35
• 讨论35-40
• 结论40-41
• 本研究创新性的自我评价41-42
• 参考文献42-46
• 附录 综述46-56
• 参考文献51-56
• 在学期间科研成绩56-57
• 致谢57-58
• 个人简介58

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本文编号：865906