西藏高原红景天遗传多样性与质量分析比较

发布时间：2017-12-13 18:17

  本文关键词：西藏高原红景天遗传多样性与质量分析比较

  更多相关文章： 西藏高原红景天 遗传多样性 化学成分定性定量分析 药效和毒性比较

【摘要】：红景天在我国西藏自治区有32种,2个变种,约占全世界1/3。因其药用价值高,红景天属亦于可用于保健食品的物品。因此西藏大花红景天在临床、保健食品、美容、化工等方面被大量作为主要原材料。对于西藏高原红景天的关注程度极高,被誉为“高原人参”。同时经常作为高原特产,作为馈赠亲朋好友的佳品,更重要的是可以用于国防集训、高原生产建设、高原旅游等方面,以缓解人体对高原缺氧的不适。但由于西藏高原处于低温、缺氧、紫外线强、昼夜温差大的气候下,因此,红景天生长周期缓慢,2009年被西藏自治区列为藏药濒危物种。如何破解需求量大,供求不足问题,本课题从以下几个方面进行了相关研究。遗传多样性的研究：在红景天遗传多样性方面,该课题首先对西藏拉萨市、山南地区、那曲地区、林芝地区、日喀则地区进行了资源调查、样品采集。发现红景天植物分布正在逐年改变生长区域,呈现动态分布。自然环境对红景天生长起决定性的制约,本课题通过对西藏高原红景天遗传多样性分析研究,对于今后红景天资源分布的确定提供宏观上的指导,另一方面也呼吁人们加强对自然环境的保护。本课题对采集自林芝地区长鞭红景天(R.fastigiata)、山南地区齿叶红景天(R.serrata H.Ohba)、日喀则地区喜马红景天(R.himalensis)的红景天离体枝条在昆明的室温条件下进行了新梢生长,将采集的红景天地上枝条样品,取茎端部约10cm大小的茎尖,置1000ml烧杯中,加入100ml自来水培养,新梢提取不同个体的基因组DNA,使用通用引物ITS1进行PCR扩增,结果四种红景天存在较高的遗传多样性。同时进行了ITS序列测序,进行了分子鉴定,对获得3个植株的完整片段的大花红景天进行分析,表明分布于该区域的大花红景天群体中有很高的遗传多样性。另外,本文发现的多样性位点为进一步深入分析大花红景天的遗传多样性提供了技术基础和有效引物,也为今后设计区分大花红景天与其它种类的特异的PCR引物提供了基础。质量评价方面：在红景天化学成分定性定量分析中,采用HS-GC-MS对红景天10个样品进行挥发性成分分析,从中共分析鉴定了30个化合物,结果发现同种不同产地大花红景天总离子流图相似度在0.9以上；长鞭红景天相似度接近大花红景天,齿叶红景天与大花红景天相似度差异大。采用HPLC法测定红景天样品中红景天苷和没食子酸的含量,结果发现同种不同产地红景天苷含量差异较大,有一个样品没有检测到红景天苷；没食子酸含量每个样品中均检测到,但含量高低没有规律性。采用LC-MS/MS法对大花红景天主要化学成分进行分析。结果表明,不同产地大花红景天药材之间化学成分存在着差异。对不同产地大花红景天中6个活性成分,建立定量分析方法,为其进一步利用提供依据。方法：采用30%乙醇提取样品；Diamonsil C18色谱柱(250-4.6mm)；以乙腈(A)-0.3%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱；检测波长275nm,柱温25℃。结果：没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸分别在0.0382μg.ml-1～ 0.382μg.ml-1 (r=0.9998)、0.301μg.ml-1～3.01μg·ml-1 (r=0.9999)、0.0198μg.ml-1～ 0.198μg·ml-1(r=0.9996)、0.0171μg.ml-1～0.171μg.ml-1 (r=0.9996)、0.0045μg.ml-1～ 0.045μg.ml-1 (r= 0.9998)、0.00638μg.ml-1～0.0638μg.ml-1 (r= 0.9994)呈良好的线性关系,加样回收率均符合含量测定要求。结论：该方法简便,快速,准确,可用于同时对西藏高原大花红景天中6个活性成分的含量测定。对青藏高原不同产地大花红景天用紫外分光光度法测定多糖的含量。方法：采用硫酸-蒽酮法。检测波长617nm。结果：线性范围为1.0μg·ml-1～200.0μg·ml-1 (R= 0.9999).结论：本法方便快捷、准确可靠,可做为红景天类药材多糖的测定方法。药效毒性是评价药物质量的重要指标之一,在红景天药效学和毒性比较研究中,对血栓形成及血流变的影响、耐缺氧试验、对老年小鼠免疫及抗氧化功能的影响、对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响进行了比较研究,结果发现,在改善血流变、对免疫功能的方面,长鞭红景天可以作为大花红景天代用品；增强机体耐缺氧能力方面,齿叶红景天可以作为大花红景天替代品；三种红景天的急性毒性研究结果,三种红景天均属无明显毒性药物或者药物安全范围较大药物。
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S567.239;R29

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王强,阮晓,方兰,颜启传;资源植物红景天研究综述[J];新疆农业大学学报;2002年04期

2 成玉怀,李鹏,王琪,相颖;红景天引种及栽培试验[J];中药材;2003年11期

3 李君;陈志;李建民;王慧春;;红景天的研究进展[J];云南农业大学学报;2007年01期

4 许剑英;;浅谈红景天的开发利用[J];内蒙古农业科技;2009年03期

5 张秀莲,董万超;红景天保健饮品加工技术[J];中国林副特产;1997年02期

6 秦佳梅,张卫东;红景天开发及人工种植[J];北京农业;1999年09期

7 谭舒心;;浅谈红景天的研究方向[J];农业与技术;2013年11期

8 揣冰洁,张甲生;红景天园栽与野生根中化学成分研究[J];农业与技术;2000年06期

9 王强;阮晓;李荷迪;王国军;;珍稀药用资源植物红景天研究现状、问题与对策[J];自然资源学报;2007年06期

10 邱远金;谭勇;王绍明;成玉怀;;红景天植物化学成分及资源利用研究进展[J];中国农学通报;2008年12期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 罗达尚;;论西藏红景天的开发前景[A];中国民族医药学会首届研讨会论文汇编[C];1996年

2 来吉祥;何聪芬;董银卯;赵华;;红景天水提物抗氧化性能研究[A];第八届中国化妆品学术研讨会论文集[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库 前6条

1 刘青;西藏高原红景天遗传多样性与质量分析比较[D];北京中医药大学;2016年

2 刘海军;红景天组织和细胞培养及药用有效成分提取研究[D];北京林业大学;2006年

3 马令法;红景天抗冻性和外源物质对其低温胁迫下生长影响的研究[D];甘肃农业大学;2014年

4 马天翔;红景天中苷（苷元）类成分的抗辐射活性及其在Caco-2模型中的转运机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2013年

5 王强;红景天种子休眠生理与蛋白质HPLC生化标记鉴定技术的研究[D];浙江大学;2003年

6 雷一东;大花红景天的ISSR遗传多样性与精油化学成分多样性研究[D];复旦大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 郭婷婷;红景天抗氧化活性内生真菌对宿主化学成分积累的影响[D];山西大学;2015年

2 张娜莎;红景天内生真菌及其对宿主生长发育影响的初步研究[D];山西大学;2014年

3 林颖慧;用彗星分析方法研究红景天对紫外辐射的防护作用[D];中央民族大学;2009年

4 戈延茹;复方红景天运动保健品的研制[D];延边大学;2001年

5 罗晓;大花红景天的标准化研究[D];河南大学;2006年

6 邵岩;红景天软胶囊的研究[D];吉林大学;2012年

7 王建元;红景天有效成分提取工艺及微量元素研究[D];西南交通大学;2013年

8 董礼;柴胡红景天化学成分的研究[D];西南大学;2008年

9 向进乐;红景天有效成分的提取与分离工艺研究[D];西南农业大学;2005年

10 王莉;小丛红景天药用有效成分提取与分析[D];甘肃农业大学;2013年

，

本文编号：1286114