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禾谷镰刀菌Rho族蛋白功能研究

发布时间:2018-02-21 15:43

  本文关键词: 禾谷镰刀菌 Rho蛋白 分生孢子 有性发育 致病性 出处:《福建农林大学》2016年博士论文 论文类型:学位论文


【摘要】:由禾谷镰刀菌引起的小麦赤霉病是世界范围内重要的小麦病害,然而,对于禾谷镰刀菌的致病机理仍有许多未知的地方。已有研究表明,Rho族小GTP酶蛋白作为信号分子参与了诸多细胞学过程,包括囊泡的运输以及致病的过程。因此,我们推论Rho族蛋白可能参与了禾谷镰刀菌类似的过程,分析禾谷镰刀菌中Rho族蛋白的功能有助于进一步了解禾谷镰刀菌的生理过程及其致病机制。为了探究Rho族蛋白的功能,本研究通过基因敲除的方法对禾谷镰刀菌的6个Rho族蛋白编码基因进行了分析。结果显示,FgRHO1基因是禾谷镰刀菌生存所必需的,而FgRho3仅对菌株的营养生长和无性发育有一定的作用。其它4个FgRho蛋白,FgRho2、FgRho4、FgCdc42和FgRac1,在许多方面都起着作用,例如,它们都是有性发育和致病性所需的。不仅如此,FgRho2和FgRho4都还与细胞壁完整性相关,且FgRho4还调控着细胞核分裂和隔膜的形成。FgRho4. FgCdc42和FgRac1还在禾谷镰刀菌的菌丝生长和无性发育方面起着重要作用。它们各自的缺失突变体相对于野生型菌株都显示出了显著的生长缺陷以及它们都产生了形态异常的分生孢子。FgRac1的缺失还导致分生孢子的提前萌发与多位点萌发以及产生多分枝的菌丝。此外,FgRac1和FgRho4在DON毒素的生成方面起着相反的作用,它们分别起着负调节和正调节的作用。进一步通过酵母双杂交与免疫共沉淀实验,鉴定了FgRac1蛋白的两个下游互作靶标——FgCla4和FgNoxR,并且分析了它们的功能。FgRac1通过FgCla4来主要调控禾谷镰刀菌的营养生长和无性发育;通过FgNoxR和FgNoxl来调控雌性发育。FgCla4或FgNoxR的缺失都会使致病性显著下降,说明FgRac1很可能通过这两个下游靶标共同调控着禾谷镰刀菌的致病性。综上,Rho族蛋白在禾谷镰刀菌生活周期中发挥着多样化的功能,其中4个FgRho蛋白还参与了对致病性的调控,FgRac1可以通过与两个下游靶标FgCla4和FgNoxR的互作来发挥功能。
[Abstract]:Wheat scab caused by Fusarium graminearum is an important disease in the world. The pathogenicity of Fusarium graminearum is still unknown. It has been shown that Rho small GTP protein is involved in many cytological processes, including vesicle transport and pathogenicity. We infer that Rho family proteins may be involved in a similar process of Fusarium graminearum. Analysis of the function of Rho family proteins in Fusarium graminearum may contribute to further understanding the physiological process and pathogenesis of Fusarium graminearum. In this study, six Rho family protein coding genes of Fusarium graminearum were analyzed by gene knockout. The results showed that FG RHO1 gene was necessary for the survival of Fusarium graminearum. The other four FgRho proteins, FgRho2FgRho2, FgRho4FgCdc42 and FgRac1, play a role in many aspects, for example, FgRho2FgRho2, FgRho4FgCdc42 and FgRac1. They are both necessary for sexual development and pathogenicity. Not only that, FG Rho2 and FgRho4 are also associated with cell wall integrity. FgRho4 also regulates nuclear division and membrane formation. FgCdc42 and FgRac1 also play an important role in mycelium growth and asexual development of Fusarium graminearum. Significant growth defects and the absence of morphologically abnormal conidia. FgRac1 also led to early germination of conidia and multiple loci germination, as well as the production of multiple branching hyphae. In addition, FgRac1 and FgRho4 were found to produce DON toxin. The face has the opposite effect. They play the roles of negative regulation and positive regulation respectively. Further, through yeast two-hybrid and immunoprecipitation experiments, The two downstream targets of FgRac1 protein FgCla4 and FgNoxRwere identified, and their functions. FgRac1 mainly regulated the vegetative growth and asexual development of Fusarium graminearum through FgCla4. The absence of FgNoxR and FgNoxl to regulate female development. FgCla4 or FgNoxR can significantly decrease pathogenicity. It is suggested that FgRac1 may jointly regulate the pathogenicity of Fusarium graminearum through these two downstream targets, and Rho family proteins play a diverse role in the life cycle of Fusarium graminearum. Four of the FgRho proteins were also involved in the pathogenicity regulation of FG Rac1 by interacting with two downstream target FgCla4 and FgNoxR.
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S435.121.45

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