烟草赤星病抗性遗传分析及主效抗性基因的定位研究
烟草赤星病是危害烟叶生产的主要真菌病害之一,近年来,情况愈发严重。培育优质抗赤星病品种是最主要的防治措施。本研究通过烟草赤星病抗源筛选,对其主要抗源净叶黄和Beinhart1000-1进行抗性遗传分析。并以净叶黄为母本,与赤星病感病品种NC82杂交,构建的F2、F2:3群体,对主效抗赤星病基因进一步精细定位,同时通过回交、自交结合分子标记辅助选择的方法构建携带目标区段的近等基因系。具体研究结论如下:1、烟草赤星病抗性遗传分析:分别以烟草赤星病抗病品种净叶黄、Beinhart1000-1与感病品种NC82杂交,配置2个杂交组合,并获得其四世代群体P1、P2、F1、F2,得到表型数据后采用“主基因+多基因”混合遗传模型对赤星病抗性进行遗传分析。结果表明净叶黄和Beinhart1000-1对赤星病的抗性均符合E-5模型,即两对加性-完全显性主基因+加性-显性多基因遗传模型。净叶黄的加性效应以第1主基因为主,为0.869,且多基因的加性效应大于显性效应;Beinhart1000-1的2对主基因存在相当的负向加性效应,为-0.8935,且多基因的显性效应大于加性效应。两个杂交组合F2群体主基因遗传率分别为64.72%和63.88%,表明赤星病的抗性遗传以主基因效应为主,同时受环境影响较大。2、烟草赤星病抗性QTL定位:对净叶黄×NC82组合,在前人研究基础上,设计引物加密标记,利用筛选的10对多态性标记对1548株扩大F2群体及F2:3群体进行表型鉴定和基因型分析,重新计算了目标区段内标记的遗传距离;进而将赤星病抗性基因相关主效QTL进一步精细定位在标记J9-4a到PT60177之间,距离5.5c M;利用中国烟草基因组数据库,在相应物理距离4.5Mp内发现53个候选基因。3、携带目标区段的近等基因系培育:在定位基础上,以NC82为轮回亲本,配置BC2F1回交群体,利用121对引物分别对该群体进行前景选择和背景选择,根据主效位点两侧标记,获得8个携带目标区段的BC2F1单株个体,然后对8株BC2F1进行全基因组基因型分析,最终确定9-2-28单株背景回复率最高,NC82遗传背景回复率达到93.40%。选择该株系继续与轮回亲本NC82回交,目前已经获得背景回复率较高且携带目标区段的BC3F1单株。4、主效QTL在不同烟草种质中的分布:利用标记J9-4a和PT60177分析试验定位的赤星病抗性主效QTL在196份不同烟草种质中的分布,发现携带显性位点的材料与其余材料之间抗性具有显著性差异;携带与主效QTL连锁的显隐性位点的材料占携带变异基因总材料的比重均较高;以PT60177标记分析,其显性位点百分比较低,为26.37%,说明不同的烟草材料在对该主效位点的利用程度上不同,且显性位点在烟草赤星病抗性育种中具有较高的研究潜力。
【关键词】:
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S435.72
【目录】:
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本文编号:176249
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