大蒜组培快繁与四倍体诱导技术研究

发布时间：2020-09-14 19:05

　　 大蒜为无性繁殖作物,繁殖系数低,且难以采用常规育种方法选育新品种,而化学诱变作为种质创制的重要方法之一,在一些作物上获得了较好的效果。为此,本研究以不同生态区大蒜品种四川‘正月早’、新疆‘新疆紫皮’、山东‘苍山蒲棵’和‘金乡紫皮’为材料,建立了大蒜离体培养植株再生技术体系;探讨了秋水仙素等化学诱变剂对大蒜茎尖试管苗的诱变效果,成功获得了大蒜四倍体材料;进而比较分析了大蒜四倍体和二倍体植株的生长发育特性。主要研究结果如下:1.建立了大蒜茎尖离体培养植株再生与微型鳞茎诱导技术体系。4个大蒜品种茎尖分化成苗率、株高和增殖系数差异极显著,‘苍山蒲棵’较高,‘新疆紫皮’较低。大蒜茎尖初代培养和继代增殖培养培养基(B5)激素配比优化方案分别为:6-BA0.328~0.494 mg/L和NAA 0.105~0.162 mg/L、6-BA 2.088~3.596 mg/L和NAA0.104~0.179 mg/L。生根和微型鳞茎诱导培养中,6-BA是影响‘苍山蒲棵’、‘金乡紫皮’和‘新疆紫皮’生根数量的主要因子,而蔗糖则是影响‘正月早’生根数量、‘苍山蒲棵’和‘金乡紫皮’微型鳞茎膨大的主要因子。2.建立了大蒜愈伤组织诱导与植株再生体系。4个大蒜品种鳞芽基部愈伤组织诱导率差异显著,‘苍山蒲棵’平均愈伤组织诱导率较高,其次是‘金乡紫皮’,‘新疆紫皮’、‘正月早’愈伤组织诱导率较低。4个大蒜品种鳞芽基部愈伤组织诱导率超过90%的培养基(B5)激素配比优化方案为:6-BA0.46~0.694 mg/L+2,4-D1.544~1.842mg/L。不同品种间愈伤组织分化存在差异,‘金乡紫皮’愈伤组织分化不定芽率和不定芽数较多,而分化不定根率较低;‘新疆紫皮’和‘正月早’愈伤组织分化不定芽率和不定芽数较低。在6-BA1.5 mg/L+ZT0.75 mg/L激素配比下愈伤组织不定芽分化率和平均分化芽数较多。3.明确了秋水仙素浓度和处理时间对大蒜的诱变效应。大蒜茎尖经秋水仙素处理后,随处理浓度的升高及时间的延长,试管苗成苗率逐渐降低,4个品种间存在显著差异。经计算机模拟寻优,得出4个大蒜品种试管苗成苗率超过50%和四倍体率超过5%的秋水仙素处理浓度和时间优化方案为0.531%~0.580%和79.8~112.2 h。4.探明了秋水仙素不同处理方式对大蒜茎尖试管苗成苗率和四倍体率的影响。不同处理方式间存在显著差异,固体培养茎尖成苗率较高,其次直接滴注法,液体培养茎尖成苗率较低,而四倍体率以液体培养处理法较高,固体培养处理法较低。液体培养处理法、直接滴注处理和固体培养处理的秋水仙素浓度和处理时间优化方案分别为:0.387~0.694%和67.92~114.432 h、0.417~0.852%和71.136~118.032 h、0.387~0.819%和69.72~114.432 h。5.明确了3种诱变剂氨磺乐灵、二甲戊乐灵和秋水仙素对大蒜的诱变效应,得到处理浓度和时间优化方案分别为:4.170~8.52 mg/L和71.136~118.032 h、4.68~8.9 mg/L和72.96~106.176 h、3865~6940 mg/L和67.92~114.432 h,二甲戊乐灵和氨磺乐灵处理得到的大蒜茎尖成苗率和四倍体率高于秋水仙素。6.4个大蒜品种四倍体植株性状(株高、假茎粗、叶长和叶宽)、蒜薹性状(薹长、薹粗和单薹重)和鳞茎性状(鳞茎横径、鳞茎纵径、单个鳞茎重)显著优于对照二倍体。‘苍山蒲棵’、‘金乡紫皮’、‘新疆紫皮’和‘正月早’四倍体株高分别比对照二倍体增高幅度为34 cm、26 cm、16.4 cm和17.2 cm;四倍体蒜薹单薹重分别比对照增重9.9 g、11.1 g、12.7 g和16.7 g;四倍体鳞茎单头重分别比对照增重46.1 g、47.4 g、44.5 g和26.1 g。7.4个大蒜品种四倍体蒜薹和鳞茎的营养成分显著高于对照二倍体。4个品种中,‘金乡紫皮’四倍体可溶性蛋白含量较对照二倍体变化较大,蒜薹和鳞茎中的含量分别增高36.2%和35%;‘苍山蒲棵’、‘金乡紫皮’、‘新疆紫皮’和‘正月早’四倍体鳞茎中蒜氨酸含量比对照二倍体分别增加2.06 mg/g、2.33 mg/g、1.16 mg/g和1.99mg/g,鳞茎中的硒含量比对照二倍体分别增加90.1 mg/g、62.86 mg/g、125.0 mg/g和85 mg/g。
【学位单位】：山东农业大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2015
【中图分类】：S633.4
【部分图文】：

图 1-2 蒜氨酸标准曲线Fig.1-2 The standard curve of alliin测定方法B5009.93.2010 荧光法测定蒜薹和鳞茎中的硒含量。含量的测定山蒲棵’、‘金乡紫皮’、‘新疆紫皮’、‘正月早’诱变获得3 代及其对照二倍体植株为材料，田间种植与管理同 2.4.1。叶定分别在苗期（4 月 2 日）、抽薹期（‘苍山蒲棵’4 月 22 日、2 日、‘正月早’4 月 14 日、‘新疆紫皮’5 月 7 日）和鳞茎膨大苍山蒲棵’5 月 5 日、‘金乡紫皮’5 月 5 日、‘正月早’4 月 29月 26日)3个时期进行。SPAD-502plus 叶绿素计测定大蒜四倍体和对照二倍体的叶绿素含量无损检测方法测量叶绿素含量，可实现快速测定，以 SPAD 值表

图 1-2 蒜氨酸标准曲线Fig.1-2 The standard curve of alliin测定方法B5009.93.2010 荧光法测定蒜薹和鳞茎中的硒含量。含量的测定山蒲棵’、‘金乡紫皮’、‘新疆紫皮’、‘正月早’诱变获得3 代及其对照二倍体植株为材料，田间种植与管理同 2.4.1。叶定分别在苗期（4 月 2 日）、抽薹期（‘苍山蒲棵’4 月 22 日、2 日、‘正月早’4 月 14 日、‘新疆紫皮’5 月 7 日）和鳞茎膨大苍山蒲棵’5 月 5 日、‘金乡紫皮’5 月 5 日、‘正月早’4 月 29月 26日)3个时期进行。SPAD-502plus 叶绿素计测定大蒜四倍体和对照二倍体的叶绿素含量无损检测方法测量叶绿素含量，可实现快速测定，以 SPAD 值表

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 阎志红;刘文革;赵胜杰;何楠;;利用二硝基苯胺类除草剂离体诱导西瓜四倍体[J];园艺学报;2008年11期

2 于盱;李维林;梁呈元;刘艳;;两个薄荷品种叶片愈伤组织的诱导及增殖[J];植物资源与环境学报;2009年02期

本文编号：2818548