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催乳汤对产后缺乳模型大鼠的治疗作用及其机制研究

发布时间:2017-04-11 15:08

  本文关键词:催乳汤对产后缺乳模型大鼠的治疗作用及其机制研究,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:为了研制对临床母猪产后缺乳综合征具有良好预防和治疗效果的中药催乳方剂,本试验研究首先在溴隐亭致产后缺乳大鼠模型的基础上,以母鼠每小时泌乳量、仔鼠每窝总增重等作为指标筛选出了催乳效果显著的中药新方剂催乳汤,并对催乳汤的剂-效关系进行研究确定了最佳治疗剂量;然后利用ELISA方法、HE染色法、免疫组织化学染色法、Western Blot方法和荧光定量PCR法等研究方法,通过治疗母鼠体内的血清催乳素浓度变化、乳腺结构变化、催乳素和催乳素受体在治疗母鼠乳腺中的分布及蛋白量变化、乳汁主要成分合成的关键蛋白和jak2-stat5信号通路、PI3K/Akt/mTOR信号通路的主要细胞因子在治疗母鼠乳腺中的表达变化等方面,对催乳汤对溴隐亭致产后缺乳大鼠模型的治疗作用及其作用机理进行了研究,相关试验结果如下: (1)溴隐亭致大鼠产后缺乳模型的最适造模剂量为1.6mg/kg,对溴隐亭致产后缺乳模型大鼠治疗效果最好的催乳汤组成为:黄芪25g,党参15g,当归10g,熟地20g,白术10g,漏芦10g,通草5g,甘草5g,其最适治疗剂量为1000mg/kgo (2)治疗组母鼠的血清和乳腺组织催乳素浓度、乳腺指数均比模型组显著的升高,和空白对照组没有显著差异;乳腺外观和组织结构从相比模型组的退化状态恢复到近似正常状态。 (3)治疗组母鼠乳腺中催乳素受体蛋白含量和基因表达均显著高于模型组,和空白对照组没有显著差异;治疗组母鼠乳腺小叶间结缔组织中催乳素和催乳素受体的分布与模型组和空白对照组相比均无明显变化,乳腺分泌小叶中治疗组催乳素的分布低于模型组但高于空白对照组,治疗组催乳素受体的分布高于模型组,与空白对照组无明显变化。 (4)治疗组母鼠乳腺中的β-酪蛋白、α-乳清蛋白、FAS、ACC、SCD的表达比模型组显著升高,β-半乳糖基转移酶基因表达比模型组显著降低,除β-酪蛋白基因表达显著低于空白对照组外,SCD基因表达显著高于空白对照组,α-乳清蛋白、FAS、ACC、β-半乳糖基转移酶的基因表达与空白对照组无显著差异。 (5)jak2-stat5信号通路中,治疗组母鼠乳腺jak2基因表达比模型组显著降低,Stat5、CyclinDI、CIS的基因表达均比模型组显著升高,其中CIS基因表达还显著高于空白对照组,jak2、Stat5、 CyclinDl基因表达与空白对照组无显著差异:PI3K/Akt/mTOR信号通路中除AKT1基因表达比模型组显著升高并与空白对照组无差异外,PI3K、mTOR基因表达均与模型组和空白对照组无显著差异,PTEN基因表达和模型组无差异且显著低于空白对照组。 上述结果说明催乳汤可以显著提高产后缺乳模型大鼠的血清催乳素浓度,使退化乳腺恢复到接近正常状态,显著提高乳腺中的催乳素及受体的分布和蛋白含量,并显著提高乳蛋白、乳糖和乳脂合成相关基因的表达;催乳汤在乳腺内主要通过jak2-stat5信号通路发挥治疗作用,与PI3K/Akt/mTOR信号通路无明显关系,仅与Akt有明显相关。
【关键词】:产后缺乳 溴隐亭 催乳汤 乳腺
【学位授予单位】:中国农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S853.7
【目录】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-7
  • ~.略词表7-13
  • 第一章 引言13-24
  • 1 母猪产后缺乳的发病原因13-15
  • 1.1 母猪因素13-14
  • 1.2 饲养管理不当14
  • 1.3 饲料质量不佳14
  • 1.4 疾病原因14-15
  • 1.5 应激性因素15
  • 1.6 气候环境因素15
  • 2 母猪产后缺乳的发病机理15-16
  • 2.1 催乳素分泌不足15-16
  • 2.2 催乳素作用抑制16
  • 2.3 催产素障碍16
  • 3 母猪产后缺乳的解决方法16-19
  • 3.1 代乳母猪法17
  • 3.2 药物治疗17-19
  • 4 催乳素、催乳素受体及其介导的乳腺泌乳相关信号通路研究进展19-23
  • 4.1 催乳素的生物学作用19-20
  • 4.2 催乳素受体20-21
  • 4.3 催乳素受体激活后启动的下游信号转导21-23
  • 5 本研究的目的和意义23-24
  • 第二章 产后缺乳大鼠模型的制备24-31
  • 1 引言24
  • 2 材料与方法24-27
  • 2.1 试验材料24-25
  • 2.2 试验方法25-27
  • 3 试验结果27-28
  • 3.1 母鼠每小时泌乳量比较27
  • 3.2 仔鼠每窝总增重比较27-28
  • 4 讨论28-30
  • 5 小结30-31
  • 第三章 治疗产后缺乳的中药方剂筛选31-38
  • 1 引言31
  • 2 材料与方法31-33
  • 2.1 试验材料31-32
  • 2.2 试验方法32-33
  • 3 试验结果33-35
  • 3.1 母鼠每小时泌乳量比较33-34
  • 3.2 仔鼠每窝总增重比较34-35
  • 4 讨论35-37
  • 4.1 各方剂组方比较35-36
  • 4.2 各方剂治疗效果比较36-37
  • 5 小结37-38
  • 第四章 不同剂量催乳汤对产后缺乳大鼠的治疗效果38-45
  • 1 引言38
  • 2 材料与方法38-40
  • 2.1 试验材料38
  • 2.2 试验方法38-40
  • 3 试验结果40-42
  • 3.1 母鼠每小时泌乳量40-41
  • 3.2 仔鼠的总净增重41-42
  • 4 讨论42-43
  • 4.1 催乳汤与催奶灵散的比较分析42
  • 4.2 不同剂量催乳汤的效果比较42-43
  • 5 小结43-45
  • 第五章 催乳汤对产后缺乳大鼠PRL浓度及乳腺的影响45-58
  • 1 引言45
  • 2 材料与方法45-52
  • 2.1 试验材料45-47
  • 2.2 试验方法47-52
  • 3 试验结果52-55
  • 3.1 催乳素浓度标准曲线绘制52
  • 3.2 母鼠血清和乳腺中催乳素含量比较52-53
  • 3.3 乳腺外观比较53-54
  • 3.4 乳腺指数比较54-55
  • 3.5 母鼠乳腺结构比较55
  • 4 讨论55-57
  • 4.1 催乳汤提高催乳素浓度的作用55-56
  • 4.2 催乳汤对乳腺的作用56-57
  • 5 小结57-58
  • 第六章 催乳汤对产后缺乳大鼠乳腺中催乳素及其受体分布的影响58-67
  • 1 引言58
  • 2 材料与方法58-61
  • 2.1 试验材料58-59
  • 2.2 试验方法59-61
  • 3 试验结果61-64
  • 3.1 产后缺乳大鼠乳腺中催乳素分布比较61-63
  • 3.2 产后缺乳大鼠乳腺中催乳素受体分布比较63-64
  • 4 讨论64-66
  • 4.1 乳腺中催乳素的分布64-65
  • 4.2 乳腺中的催乳素受体的分布65-66
  • 5 小结66-67
  • 第七章 催乳汤对产后缺乳大鼠乳腺中PRLR表达的影响67-78
  • 1 引言67
  • 2 材料与方法67-73
  • 2.1 试验材料67-70
  • 2.2 试验方法70-73
  • 3 试验结果及分析73-75
  • 3.1 RNA鉴定结果73
  • 3.2 荧光PCR产物溶解曲线分析73
  • 3.3 PRLR基因表达图73-74
  • 3.4 PRLR蛋白表达结果74-75
  • 4 讨论75-77
  • 5 小结77-78
  • 第八章 催乳汤对产后缺乳大鼠乳腺中乳成分相关基因表达的影响78-84
  • 1 引言78
  • 2 材料与方法78-80
  • 2.1 试验材料78-79
  • 2.2 试验方法79-80
  • 3 试验结果及分析80-82
  • 3.1 催乳汤对产后缺乳大鼠乳腺中乳蛋白基因表达的影响80
  • 3.2 催乳汤对产后缺乳大鼠乳腺中乳糖相关基因表达的影响80-81
  • 3.3 催乳汤对产后缺乳大鼠乳腺中乳脂相关基因表达的影响81-82
  • 4 讨论82-83
  • 5 小结83-84
  • 第九章 催乳汤对产后缺乳大鼠乳腺中JAK2-STAT5途径和PI3K/AKT/mTOR途径信号通路的影响84-91
  • 1 引言84
  • 2 材料与方法84-86
  • 2.1 试验材料84-85
  • 2.2 试验方法85-86
  • 3 试验结果及分析86-88
  • 3.1 jak2-stat5途径相关基因表达结果86-87
  • 3.2 PI3K/Akt/mTOR途径相关基因表达结果87-88
  • 4 讨论88-90
  • 5 小结90-91
  • 第十章 结论与创新点91-92
  • 1. 本试验研究主要结论91
  • 2. 本试验研究创新点91
  • 3. 有待于解决的问题91-92
  • 参考文献92-101
  • 致谢101-103
  • 作者简介103

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号:299341

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