骨保护素通过Fas/FasL死亡受体通路诱导破骨细胞及其前体细胞发生凋亡的研究
发布时间:2021-03-24 17:21
骨保护素(osteoprotegerin, OPG)发现于上世纪九十年代,它作为肿瘤坏死因子受体(TNF)超家族成员之一,能通过阻断核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和RANK结合来完成诱骗受体功能,从而抑制破骨细胞(OCs)的分化和活性。本课题组最新研究发现OPG可诱导体外成熟破骨细胞发生凋亡,这种凋亡可能是OPG抑制成熟破骨细胞活性的主要途径,然而OPG在OCs存活以及凋亡中的确切作用仍不清楚。随着我国养殖业集约化和规模化发展,动物骨营养不良性疾病的发生越来越多,目前仍缺乏高效的防控药物。本文以原代分离小鼠骨髓诱导分化为OCs及破骨细胞前体细胞(OPCs)为研究对象,OCs分化成熟后添加不同浓度OPG,通过TACS-XL Blue法(TUNEL凋亡检测衍生法)、实时荧光定量PCR (QRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation, Co-IP)等技术手段,揭示OPG对OCs和OPCs凋亡中形态、功能、相关基因及关键信号蛋白的影响,以期阐明OPG诱导OCs和OPCs凋亡的分子机制,为相关药物的研发提供理论依据和...
【文章来源】:扬州大学江苏省
【文章页数】:108 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图2-1-1.?Annexin?V-FITC蒙光染色法检测OPG对破骨细胞前体细胞调亡率的影响??
图2-1-2.?Annexin?V-PI流式法检测OPG对OPCs澗t率的影响??"a"和"M"分别表示与对照组相比差异显著(尸<0.0_5)和极适著(尸<0.0/)??Fig.?2-1-2.?Detection?of?apoptosis?in?OPCs?using?Annexin?V?-FITC?fluorescent?stainin"a"?p?<?0.05,?"b?e"片<?0.0/,?compared?with?control?gro叩,using?one-way?ANOVA??对OCs潤t:的影响??浓度(0、20、40、80ng/mL)?OPG作用OCs24h后,TACS-XL臥ue试
:OPG通过Fas/FasL死亡受体通路诱导破骨细胞及其前体细胞发生调亡的研s表面的残留情况。结果表明,无论是否添加RNAKL,弃去培养基面均未见RANKL残留(如图2-2-1?)。另外,前期RANKL的添加的残留。因此,去除培养基中的RANKL后,OPG处理OCs不会受满足了后期实验研究OPG处理对OCs调亡直接影响的要求。??RANKL?DAPI??
【参考文献】:
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞Fas/FasL介导的免疫调节在结肠炎治疗中的作用[J]. 于洋,邵秉一,帅逸,尚冯青,王茜,周志斐,廖立,金岩,杨德琴. 细胞与分子免疫学杂志. 2013(10)
[2]细胞凋亡和继发性坏死的Annexin法定量检测[J]. 彭黎明,江虹,ChrisBradley. 华西医科大学学报. 2001(04)
本文编号:3098089
【文章来源】:扬州大学江苏省
【文章页数】:108 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图2-1-1.?Annexin?V-FITC蒙光染色法检测OPG对破骨细胞前体细胞调亡率的影响??
图2-1-2.?Annexin?V-PI流式法检测OPG对OPCs澗t率的影响??"a"和"M"分别表示与对照组相比差异显著(尸<0.0_5)和极适著(尸<0.0/)??Fig.?2-1-2.?Detection?of?apoptosis?in?OPCs?using?Annexin?V?-FITC?fluorescent?stainin"a"?p?<?0.05,?"b?e"片<?0.0/,?compared?with?control?gro叩,using?one-way?ANOVA??对OCs潤t:的影响??浓度(0、20、40、80ng/mL)?OPG作用OCs24h后,TACS-XL臥ue试
:OPG通过Fas/FasL死亡受体通路诱导破骨细胞及其前体细胞发生调亡的研s表面的残留情况。结果表明,无论是否添加RNAKL,弃去培养基面均未见RANKL残留(如图2-2-1?)。另外,前期RANKL的添加的残留。因此,去除培养基中的RANKL后,OPG处理OCs不会受满足了后期实验研究OPG处理对OCs调亡直接影响的要求。??RANKL?DAPI??
【参考文献】:
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞Fas/FasL介导的免疫调节在结肠炎治疗中的作用[J]. 于洋,邵秉一,帅逸,尚冯青,王茜,周志斐,廖立,金岩,杨德琴. 细胞与分子免疫学杂志. 2013(10)
[2]细胞凋亡和继发性坏死的Annexin法定量检测[J]. 彭黎明,江虹,ChrisBradley. 华西医科大学学报. 2001(04)
本文编号:3098089
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