骨保护素通过Fas/FasL死亡受体通路诱导破骨细胞及其前体细胞发生凋亡的研究

发布时间：2021-03-24 17:21

　　骨保护素（osteoprotegerin, OPG）发现于上世纪九十年代,它作为肿瘤坏死因子受体（TNF）超家族成员之一,能通过阻断核因子κB受体活化因子配体（RANKL）和RANK结合来完成诱骗受体功能,从而抑制破骨细胞（OCs）的分化和活性。本课题组最新研究发现OPG可诱导体外成熟破骨细胞发生凋亡,这种凋亡可能是OPG抑制成熟破骨细胞活性的主要途径,然而OPG在OCs存活以及凋亡中的确切作用仍不清楚。随着我国养殖业集约化和规模化发展,动物骨营养不良性疾病的发生越来越多,目前仍缺乏高效的防控药物。本文以原代分离小鼠骨髓诱导分化为OCs及破骨细胞前体细胞（OPCs）为研究对象,OCs分化成熟后添加不同浓度OPG,通过TACS-XL Blue法（TUNEL凋亡检测衍生法）、实时荧光定量PCR （QRT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western blot）免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation, Co-IP）等技术手段,揭示OPG对OCs和OPCs凋亡中形态、功能、相关基因及关键信号蛋白的影响,以期阐明OPG诱导OCs和OPCs凋亡的分子机制,为相关药物的研发提供理论依据和... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２－１－１．?Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ蒙光染色法检测ＯＰＧ对破骨细胞前体细胞调亡率的影响??

图２－１－２．?Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＰＩ流式法检测ＯＰＧ对ＯＰＣｓ澗ｔ率的影响??＂ａ＂和＂Ｍ＂分别表示与对照组相比差异显著（尸＜０．０＿５）和极适著（尸＜０．０／）??Ｆｉｇ．?２－１－２．?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ?ｉｎ?ＯＰＣｓ?ｕｓｉｎｇ?Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ?－ＦＩＴＣ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?ｓｔａｉｎｉｎ＂ａ＂?ｐ?＜?０．０５，?＂ｂ?ｅ＂片＜?０．０／，?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏ叩，ｕｓｉｎｇ?ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ??对ＯＣｓ潤ｔ：的影响??浓度（０、２０、４０、８０ｎｇ／ｍＬ）?ＯＰＧ作用ＯＣｓ２４ｈ后，ＴＡＣＳ－ＸＬ臥ｕｅ试

：ＯＰＧ通过Ｆａｓ／ＦａｓＬ死亡受体通路诱导破骨细胞及其前体细胞发生调亡的研ｓ表面的残留情况。结果表明，无论是否添加ＲＮＡＫＬ，弃去培养基面均未见ＲＡＮＫＬ残留（如图２－２－１?）。另外，前期ＲＡＮＫＬ的添加的残留。因此，去除培养基中的ＲＡＮＫＬ后，ＯＰＧ处理ＯＣｓ不会受满足了后期实验研究ＯＰＧ处理对ＯＣｓ调亡直接影响的要求。??ＲＡＮＫＬ?ＤＡＰＩ??

【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞Fas/FasL介导的免疫调节在结肠炎治疗中的作用[J]. 于洋,邵秉一,帅逸,尚冯青,王茜,周志斐,廖立,金岩,杨德琴.  细胞与分子免疫学杂志. 2013(10)
[2]细胞凋亡和继发性坏死的Annexin法定量检测[J]. 彭黎明,江虹,ChrisBradley.  华西医科大学学报. 2001(04)



本文编号：3098089