巨型艾美耳球虫4种侵入相关蛋白分子特性及免疫保护性研究
发布时间：2021-04-06 01:06
鸡球虫病是家禽的肠道胞内寄生原虫病。该病严重影响饲料转化效率,所以造成严重的损失。鸡球虫病目前基本通过使用化学药物进行预防治疗,然而,随着耐药性的产生和食品安全问题日益突出,有效的疫苗预防措施备受关注。本研究选取了四种巨型艾美耳球虫（Eimeria maxima）侵入过程相关的蛋白,进行克隆、表达并评价其免疫保护力,旨在为发现新抗原以及评价其对宿主在抗巨型艾美耳球虫感染过程中所产生的免疫保护力,提供新型疫苗候选保护性抗原。1.巨型艾美耳球虫表面蛋白基因的分子特性研究及免疫保护性研究评估本章研究成功扩增了E.maxima表面蛋白（EmSAG）的开放阅读框（ORF）,序列分析后发现该基因由645对碱基所组成,编码214个氨基酸。随后,将EmSAG基因全长分别亚克隆到pET-32a（+）和pVAX1中。RT-PCR和免疫印迹分析证实靶基因成功转录并在雏鸡体内表达。激光共聚焦试验结果证实,EmSAG在巨型艾美耳球虫的子孢子表面分布,试验结果同时发现EmSAG也存在于裂殖子的表面。动物实验证实,rEmSAG和pVAX1-SAG都可以明显减轻空肠病变,提高相对增重率。EmSAG疫苗可减少雏鸡的卵囊...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：144 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡球虫病的诊治和预防[J]. 彭焕文. 中国动物保健. 2018(01)
[2]用紫茎泽兰叶异丙醇提取物二级组分治疗鸡球虫病的实验[J]. 和晓银. 畜禽业. 2016(07)
[3]中药有效成分抗鸡球虫病研究进展[J]. 付文涛,周变华,黄婷婷,田二杰,曹建文,闫文朝. 动物医学进展. 2016(06)
[4]假蒟提取物对感染柔嫩艾美耳球虫鸡血液指标的影响[J]. 王定发,周璐丽,李韦,周雄,周汉林. 动物医学进展. 2016(02)
[5]青蒿素与抗菌增效剂联合抗鸡球虫效果评价[J]. 马琰,马庆涛,承南,李金贵. 中国家禽. 2016(02)
[6]鸡球虫病防治初探[J]. 唐金茹. 山东畜牧兽医. 2015(05)
[7]寄生虫逃避寄主机制的研究[J]. 胡胜锋. 中山大学研究生学刊（自然科学.医学版）. 2013(04)
[8]林下养鸡常见寄生虫病及其防治措施[J]. 林观文,甘善化. 中国畜禽种业. 2012(10)
[9]聚醚类抗球虫药物的简介[J]. 董雷. 养殖技术顾问. 2012(03)
[10]柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白EtRON2基因的克隆及序列分析[J]. 戚南山,孙铭飞,廖申权,吴彩艳,吕敏娜,袁建丰,余劲术,蔡建平,李祥瑞. 动物医学进展. 2011(12)
博士论文
[1]巨型艾美耳球虫四种微线蛋白的免疫保护性及与鸡肠上皮细胞的结合能力[D]. 黄经纬.南京农业大学 2016
[2]堆型艾美耳球虫新抗原基因鉴定与分子特性研究[D]. 朱惠丽.南京农业大学 2012
[3]堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶DNA疫苗免疫保护作用及免疫机理研究[D]. 宋鸿雁.南京农业大学 2010
硕士论文
[1]柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG21和SAG23的免疫原性研究[D]. 廖玉声.南京农业大学 2008
[2]鸡毒害艾美耳球虫NA4基因免疫调节型DNA疫苗的构建及其免疫保护性研究[D]. 张娜.南京农业大学 2008
本文编号：3120453
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：144 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１艾美耳球虫生活史（引自Ｔａｒｅｋ，?２０１６）??Ｆｉｇ．?１－１?ｌｉｆｅ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?Ｅｉｍｅｒｉａ??
ＰＥ单克隆抗体进行孵育，后转入流式管后上机检测。??１．２．１７数据分析??使用统计软件ｆｆｉＭ?ＳＰＳＳ?（ｖｅｒｓｉｏｎ?２２．０?ｆｏｒ?ｗｉｎｄｏｗｓ）进行数据分析。组间差异显??著性分析使用ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ方法进行比较，组间Ｐ＜０．０５时被认为差异显著。??２结果??２．１?ＥｍＳＡＧ基因的生物信息学分析??通过ＤＮＡＳＴＡＲ软件分析结果显示ＳＡＧ蛋白理论分子量２４．７３?ｋＤ，等电点４．８０８。??使用Ｍｅｇａ?６软件构建进化树，以分析ＥｍＳＡＧ基因的同源性（图３－２），结果显示??ＥｍＳＡＧ与凡纪ＴＡ４和Ｅ?的ＮＡ４基因、ＳＡＧ基因的亲源关系较近，与??其他种的ＳＡＧ基因的亲源关系较远（图３－２）。ＳｉｇｎａｌＰ?４．１在线软件预测该蛋白第１－２１??个氨基酸为信号肽（图３－４）。ＮｅｔＯＧｌｙｃ?４．０?Ｓｅｒｖｅｒ软件预测ＥｍＳＡＧ基因中可能包含??３个糖基化位点（图３－５）?；?ＮｅｔＰｈｏｓ?ｓｅｒｖｅｒ预测ＥｍＳＡＧ基因中包含２３个可能的磷酸??化位点（图３－６）。??Ｐｕｔａｔｉｖｅ?ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?ｄｏｍａｉｎｓ?ｈａｖｅ?ｂｅｅｎ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ，?ｃｌｉｃｋ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｉｍａｇｅ?ｂｅｌｏｗ?ｆｏｒ?ｄｅｔａｉｌｅｄ?ｒｅｓｕｌｔｓ，??１?２５?５０?７５?１０９?１２５?１５０?１７５?２Ｕ?２２５?２３５??Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?里?１?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｌ?１?Ｉ?Ｉ?Ｉ??Ｑｕｅｒｙ?ｓｅｑ．??Ｓｕｐｅｒ?ｆ?ａｎｉｌ
Ｅｉｍｅｒｉａ?ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ???ＸＰ?０１３３３７４６５．１?ＳＡＧ?ｆａｍｉｌｙ?ｍｅｍｂｅｒ?Ｅｉｍｅｒｉａ?ｍａｘｉｍａ???ＸＰ?０１３４４０５２０．１?ＳＡＧ?ｆａｍｉｌｙ?ｍｅｍｂｅｒ?ＬＶｗｍａ?ｎｅｃａｔｒｉｘ??１００?？??９９?ＡＡＡ２９０７５．１?ＴＡ４?ａｎｔｉｇｅｎ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｐａｒｔｉａｌ?ｌｉｉｍｅｒｉａ?ｔｃｎｃｌｌａ???ＡＣＡ８１５３３．１?ＮＡ４?ａｎｔｉｇｅｎ?Ｅｉｍｅｒｉａ?ｎｅｃａｔｒｉｘ??Ｉ?１??０．１??图３－２?ＭＥＧＡ?６．０分析构建ＥｍＳＡＧ同源基因进化树??Ｆｉｇ．?３－２?Ｔｈｅ?ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ＥｍＳＡＧ?ａｎｄ?ｔｈｏｓｅ?ｏｆ?ＳＡＧ?ｆｒｏｍ?ｏｔｈｅｒ?ｓｐｅｃｉｅｓ?ｗａｓ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ?ｕｓｉｎｇ??ｔｈｅ?ＭＥＧＡ?６．０?ｐｒｏｇｒａｍ．??ＴＭＨＭＭ?ｒｅｓｕｌｔ??ＨＥＬＰ?＼＼Ｔｔｈ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒｍａｔｓ??＊?ＫＥＢＳＥＱＵＥＮＣＥ?Ｌｅｎｇｔｈ：?２３５??＊?ＫＥＢＳＥＱＵＥ．ＮＣ！：?Ｈｕｆｆｉｅｒ?ｏｆ?ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ＩＭＨａ：?０??？?ＫＥＢＳＥＱＵＥＮＣＥ?Ｅｘｐ?ｎｕｒｆｃｅｒ?ｏＺ?ＡＡａ?ｉｎ?ＴＫＨｓ：?７．９３３Ｓ５??４?ＫＥＢＳＥＣＵＥＨＣｔ?Ｅｘｐ?ｎｕｉｔｏｅｒ，?ｆｉｒｓｔ?６０?ＡＡａ：?１．２５０Ｓ９??＊?ＷＥＳＳＥＯＵＥＮＣＥ?Ｔｏｔａｌ?ｐｒｅｂ?ｏｆ?Ｎ－ｉｎ：?０．０７４７５??ＫＥＳＳＣＯＴＥＨＣＳ?ＴＭ３ＫＫ２．０?ｏｕｔｓｉｄｅ?１?２３５??ＴＭＨＭＭ?ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ?ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｉｅｓ?
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡球虫病的诊治和预防[J]. 彭焕文. 中国动物保健. 2018(01)
[2]用紫茎泽兰叶异丙醇提取物二级组分治疗鸡球虫病的实验[J]. 和晓银. 畜禽业. 2016(07)
[3]中药有效成分抗鸡球虫病研究进展[J]. 付文涛,周变华,黄婷婷,田二杰,曹建文,闫文朝. 动物医学进展. 2016(06)
[4]假蒟提取物对感染柔嫩艾美耳球虫鸡血液指标的影响[J]. 王定发,周璐丽,李韦,周雄,周汉林. 动物医学进展. 2016(02)
[5]青蒿素与抗菌增效剂联合抗鸡球虫效果评价[J]. 马琰,马庆涛,承南,李金贵. 中国家禽. 2016(02)
[6]鸡球虫病防治初探[J]. 唐金茹. 山东畜牧兽医. 2015(05)
[7]寄生虫逃避寄主机制的研究[J]. 胡胜锋. 中山大学研究生学刊（自然科学.医学版）. 2013(04)
[8]林下养鸡常见寄生虫病及其防治措施[J]. 林观文,甘善化. 中国畜禽种业. 2012(10)
[9]聚醚类抗球虫药物的简介[J]. 董雷. 养殖技术顾问. 2012(03)
[10]柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白EtRON2基因的克隆及序列分析[J]. 戚南山,孙铭飞,廖申权,吴彩艳,吕敏娜,袁建丰,余劲术,蔡建平,李祥瑞. 动物医学进展. 2011(12)
博士论文
[1]巨型艾美耳球虫四种微线蛋白的免疫保护性及与鸡肠上皮细胞的结合能力[D]. 黄经纬.南京农业大学 2016
[2]堆型艾美耳球虫新抗原基因鉴定与分子特性研究[D]. 朱惠丽.南京农业大学 2012
[3]堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶DNA疫苗免疫保护作用及免疫机理研究[D]. 宋鸿雁.南京农业大学 2010
硕士论文
[1]柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG21和SAG23的免疫原性研究[D]. 廖玉声.南京农业大学 2008
[2]鸡毒害艾美耳球虫NA4基因免疫调节型DNA疫苗的构建及其免疫保护性研究[D]. 张娜.南京农业大学 2008
本文编号：3120453
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