藏獒犬IFN-γ,IFN-α和IL-18基因克

发布时间：2021-04-30 07:21

　　干扰素（Interferon,IFN）是机体细胞受到病毒等生物诱导剂刺激而产生的一类分泌型糖蛋白类细胞因子,而白细胞介素18（Interleukin-18,IL-18）是一种具有促炎作用的细胞因子,由机体活化的单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等产生,能诱导IFN-γ等细胞因子的分泌,具有促进T细胞增殖、增强Th1型细胞、NK细胞及CTL细胞的细胞毒效应,与临床自身免疫性疾病及心血管系统疾病等多种疾病的发生发展呈现相关性,IFN和IL-18都具有抗病毒、抗寄生虫和细菌感染、抗肿瘤、免疫调节等多种生物学功能。因此,本实验开展藏獒犬IFN-γ、IFN-α和IL-18的相关研究,采用分子克隆和基因工程等技术获得了3个基因,体外制备了藏獒犬3个基因的重组蛋白,验证了其生物学活性,并开展了临床相关实验,丰富了犬细胞因子的知识,对犬疾病的检测和防控以及保障人类健康有着重要的意义,在犬疾病的防控上有着广阔的应用前景。第一,从藏獒犬血液中分离淋巴细胞,利用脂多糖（LPS）与植物血凝素（PHA）联合刺激淋巴细胞后提取RNA,经RT-PCR扩增IFN-γ、IFN-α和IL-18基因全长片段,将扩增到的基因分别... 

【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省

【文章页数】：96 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
SUMMARY
缩略语表
第一章 犬干扰素研究进展
    1 IFN概述
        1.1 IFN分类
        1.2 犬IFN理化特性及基因组成
        1.3 IFN的空间结构及受体研究
        1.4 IFN生物学活性及作用机制
    2 犬IFN基因工程研究
        2.1 犬Ⅰ型IFN基因工程研究
        2.2 犬Ⅱ型IFN基因工程研究
        2.3 犬Ⅲ型IFN基因工程研究
        2.4 犬长效IFN研究
    3 犬IFN临床应用
        3.1 治疗犬病毒性传染病
        3.2 治疗犬皮肤性疾病
        3.3 治疗眼科及其他疾病
    4 犬IFN应用展望
第二章 白细胞介素18研究进展
    1 IL-18概述
        1.1 IL-18的发现、结构、特性
        1.2 IL-18受体及信号传导途径
        1.3 IL-18结合蛋白
    2 IL-18生物学作用
        2.1 IL-18抗肿瘤作用
        2.2 IL-18抗感染作用
        2.3 IL-18免疫调节作用
    3 IL-18与临床疾病的关系
        3.1 IL-18与自身免疫性疾病
        3.2 IL-18与心血管系统疾病的关系
        3.3 IL-18与神经系统疾病的关系
        3.4 IL-18与肿瘤疾病的关系
        3.5 IL-18与糖尿病等其他疾病的关系
    4 IL-18应用展望
    5 本研究的目的及意义
第三章 藏獒犬IFN-γ和 IFN-α基因克隆与序列分析
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 试验结果
        2.1 淋巴细胞的体外刺激活化
        2.2 RT-PCR扩增藏獒犬IFN-γcDNA
        2.3 重组质粒的酶切及PCR鉴定
        2.4 藏獒犬IFN-γ序列测定及分析
        2.5 藏獒犬IFN-α序列测定及分析
    3 讨论
第四章 藏獒犬IFN-γ和 IFN-α基因的表达、纯化及活性鉴定
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 试验结果
        2.1 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重组表达质粒的鉴定
        2.2 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重组蛋白Western bloting分析
        2.3 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重组蛋白纯化分析
        2.4 藏獒犬IFN-γ抗病毒活性检测
        2.5 藏獒犬IFN-α抗病毒活性检测
        2.6 藏獒犬IFN-α抗病毒临床应用
    3 讨论
第五章 藏獒犬IL-18基因克隆、表达及生物学活性鉴定
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 试验结果
        2.1 藏獒犬IL-18基因的克隆
        2.2 藏獒犬IL-18基因序列测定及分析
        2.3 藏獒犬IL-18基因比较分析及进化分析
        2.4 pET-30a-IL-18 重组质粒的鉴定
        2.5 pET-30a-IL-18 重组蛋白表达及Western bloting分析
        2.6 pET-30a-IL-18 重组蛋白纯化结果
        2.7 藏獒犬IL-18基因生物学活性鉴定
    3 讨论
全文结论
参考文献
致谢
作者简介
攻读博士学位期间发表论文
导师简介1
导师简介2


【参考文献】：
期刊论文
[1]Ⅲ型干扰素的研究进展[J]. 郭富城,常秋燕,李林杰,马鹏,李凌浩,王悦萦,马晓霞,马忠仁,陈士恩.  黑龙江畜牧兽医. 2018(17)
[2]藏獒犬白介素18基因的克隆及原核表达[J]. 宋世斌,胡永浩,何强,敬淑燕,仝保全.  畜牧兽医杂志. 2018(04)
[3]犬干扰素α1和胸腺肽α1融合蛋白在毕赤酵母GS115中的表达[J]. 田春玲,马玉忠,秦建华,汪恩强.  河北农业大学学报. 2018(01)
[4]白细胞介素-18在部分自身免疫性疾病中的作用[J]. 李慕聪,邢东明.  微生物学免疫学进展. 2017(06)
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[7]干扰素在宠物病毒性疾病治疗上的使用效果分析[J]. 汪恭富,冯杰,马妍.  畜牧与兽医. 2015(09)
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博士论文
[1]白介素18调控瓣膜间质细胞钙化的实验研究[D]. 朱锦富.南京医科大学 2018
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[4]白介素18对胰腺癌免疫治疗作用及其机制的研究[D]. 郭兴军.华中科技大学 2015
[5]白细胞介素-18及相关标志物在深静脉血栓形成中的表达变化与作用机理研究[D]. 李光第.昆明医科大学 2015
[6]犬Ⅲ型干扰素的功能特点及B型流感病毒NEP蛋白出核功能研究[D]. 范文辉.广西大学 2015
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硕士论文
[1]血浆NLRP3及其下游因子IL-1β、IL-18与2型糖尿病合并急性冠脉综合征的相关性[D]. 刘旦旦.延安大学 2019
[2]递送柔嫩艾美耳球虫EtMIC2蛋白与IL-18共表达核酸疫苗侵入型乳酸菌免疫保护效果研究[D]. 张赞.吉林农业大学 2019
[3]IL-18-607C/A位点的基因多态性与儿童肠道病毒71型脑炎的相关性研究[D]. 宋杰.青岛大学 2019
[4]Caspase-1，IL-1β和IL-18调控在云芝糖肽（PSP）诱导的Molt-4细胞死亡机制中的作用研究[D]. 黄誉娴.上海师范大学 2019
[5]犬β干扰素的表达及其抗细小病毒复制的研究[D]. 黄梦秋.贵州大学 2019
[6]白细胞介素-18影响咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型皮肤炎症的研究[D]. 牛雪丽.中国医科大学 2019
[7]IL-2、IL-18、TNF-α与神经型布氏杆菌病的相关性研究[D]. 王虹富.内蒙古医科大学 2019
[8]IL-18在主动脉夹层患者组织和血浆中的表达及临床意义[D]. 胡海莹.河北工程大学 2019
[9]血浆IL-18在血管性认知障碍患者中的表达及意义[D]. 王景峰.南京医科大学 2018
[10]白介素-18参与小鼠脑卒中后抑郁样行为的机制研究[D]. 赵辰宇.苏州大学 2018



本文编号：3169079