拟穴青蟹（Scylla paramamosain）肌浆蛋白过敏原的致敏性研究

发布时间：2021-05-17 11:18

　　食物过敏作为食品安全的热点问题在全球引起了广泛关注,甲壳类水产品是联合国粮农组织公布的八大类过敏食物之一。拟穴青蟹（Scylla paramamosain）是我国重要的水产资源,但其产量和消费量的增加,也伴随着越来越多的食物过敏问题。对拟穴青蟹引起的食物过敏反应流行病学调查和拟穴青蟹过敏原结构、表位及其致敏性的系统分析是开发低致敏食品和甲壳类水产食物过敏性疾病控制的基础。本研究于2010年至2017年对集美大学在校生发放食物过敏流行病学调查问卷共17324份,对收回的13361份有效问卷统计结果显示,蟹类是该群体中主要的过敏食物,进一步对调查对象中14164名学生的血清学分析表明蟹类过敏比例为4.31%,而拟穴青蟹的肌浆蛋白能够被65.14%的蟹类过敏患者血清中的特异性免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）E识别。精氨酸激酶（arginine kinase,AK）是拟穴青蟹肌浆蛋白中的主要过敏原,本文首先通过X射线衍射获得了分辨率为3.0?的AK晶体结构,基于蛋白质结构的对比分析结果表明,节肢动物中的AK具有保守的一级结构、二级结构和高级结构。基于抗原表位的对比分析结果表明,... 

【文章来源】：集美大学福建省

【文章页数】：151 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
主要符号表
第1章 前言
    1.1 食物过敏概述
        1.1.1 食物过敏的流行病学研究
        1.1.2 食物过敏机理及诊断
        1.1.3 食物过敏的预防与控制
    1.2 食物过敏原
        1.2.1 常见的食物过敏原
        1.2.2 过敏原的抗原表位及其研究方法
        1.2.3 过敏原致敏性的评估方法
    1.3 水产食品过敏原的研究进展
        1.3.1 鱼类过敏原
        1.3.2 甲壳类水产品过敏原
    1.4 本研究的目的意义及主要内容
        1.4.1 研究目的及意义
        1.4.2 主要研究内容
        1.4.3 技术路线
第2章 拟穴青蟹肌浆蛋白过敏原的鉴定及性质分析
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 动物
        2.2.2 过敏患者血清
        2.2.3 主要仪器设备
        2.2.4 主要试剂
        2.2.5 实验所用溶液及配制方法
    2.3 方法
        2.3.1 食物过敏的流行病学调查
        2.3.2 AK的纯化鉴定及晶体结构解析
        2.3.3 肌浆蛋白中新型过敏原的纯化鉴定
        2.3.4 TIM的克隆表达
    2.4 结果与分析
        2.4.1 集美大学在校生的食物过敏情况分析
        2.4.2 AK的纯化鉴定
        2.4.3 AK晶体的培养及结构解析
        2.4.4 不同物种AK的比较分析
        2.4.5 肌浆蛋白新型过敏原的纯化鉴定
        2.4.6 TIM的克隆表达
    2.5 讨论
        2.5.1 流行病学调查数据分析
        2.5.2 AK的结构特征分析
        2.5.3 AK的免疫交叉反应性分析
        2.5.4 肌浆蛋白中四种过敏原理化特性的比较分析
第3章 拟穴青蟹肌浆蛋白四种过敏原的表位分析及致敏性评估
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 过敏原
        3.2.2 动物
        3.2.3 过敏患者血液样本
        3.2.4 主要仪器设备
        3.2.5 主要试剂
        3.2.6 实验所用溶液及配制方法
    3.3 方法
        3.3.1 过敏患者的嗜碱性粒细胞激活试验
        3.3.2 肌浆蛋白过敏原的IgE表位淘选
        3.3.3 TIM与FLNc的表面等离子共振分析
        3.3.4 肌浆蛋白过敏原的Balb/c小鼠过敏模型建立
        3.3.5 过敏小鼠脾脏淋巴细胞分群情况及细胞因子水平的检测
        3.3.6 树突状细胞对过敏原吞噬情况的检测
        3.3.7 统计分析
    3.4 结果与分析
        3.4.1 蟹类过敏患者的BAT验证
        3.4.2 肌浆蛋白过敏原IgE表位的定位分析
        3.4.3 TIM与FLNc的相互作用分析
        3.4.4 小鼠过敏模型的建立
        3.4.5 过敏原对小鼠脾脏淋巴细胞分化的影响
        3.4.6 过敏原对小鼠脾脏淋巴细胞因子的影响
        3.4.7 树突状细胞对四种过敏原的吞噬情况
    3.5 讨论
        3.5.1 四种过敏原对效应细胞激活能力的比较分析
        3.5.2 四种过敏原的IgE表位分析
        3.5.3 TIM与FLNc免疫交叉反应性分析
        3.5.4 四种过敏原体内作用方式的比较分析
第4章 结论
致谢
参考文献
附录
在学期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]拟穴青蟹新型过敏原磷酸丙糖异构酶的鉴定分析[J]. 陈仲玮,费丹霞,杨阳,刘鹏源,蔡秋凤,张凌晶,曹敏杰,刘光明.  集美大学学报(自然科学版). 2016(06)
[2]屋尘螨与粉尘螨变应原交叉反应的分子基础分析[J]. 李喆,张影,徐颖华,辛晓芳.  中国生物制品学杂志. 2015(09)
[3]德国小蠊精氨酸激酶基因的克隆、表达及免疫活性测定[J]. 闫浩,夏立新,陈家杰,刘娇,邓志琼,易海涛,刘小平.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2011(03)
[4]健康人群食物过敏状况的初步调查[J]. 吕相征,刘秀梅,杨晓光.  中国食品卫生杂志. 2005(02)
[5]中国儿童呼吸道及特应性疾病患病情况调查[J]. 陈育智,王红玉,王海俊,马煜,李硕,赵京,钟南山,黄永坚,霍泰辉,赖其伟.  中华结核和呼吸杂志. 2003(03)

博士论文
[1]中国青蟹属种类组成和拟穴青蟹群体遗传多样性的研究[D]. 林琪.厦门大学 2008

硕士论文
[1]凡纳滨对虾死后胰蛋白酶的迁移及其对肌肉蛋白的降解作用[D]. 陈诗妍.广东海洋大学 2015
[2]拟穴青蟹过敏原精氨酸激酶的抗原表位分析研究[D]. 杨阳.集美大学 2015
[3]克氏原螯虾新型过敏原的鉴定与性质研究[D]. 张永霞.集美大学 2015
[4]克氏原螯虾过敏原的性质研究[D]. 陈亨莉.集美大学 2013
[5]拟穴青蟹精氨酸激酶的过敏性及其构效关系的初步研究[D]. 毛海燕.集美大学 2013
[6]蟹类过敏原的BALB/c小鼠模型研究[D]. 李兵.集美大学 2010



本文编号：3191670