缺磷响应基因OsSQD1在水稻生长发育和磷素吸收利用中的功能研究
发布时间：2021-06-10 15:42
土壤中的磷主要是以无机正磷酸盐（Pi）的形式被植物吸收与利用。然而,土壤中能被植物直接吸收利用的有效磷很低,这也成为限制着植物的生长发育的主要因素之一。因此植物进化出一系列适应低磷胁迫的生理机制,其中就包括在缺磷条件下的植物叶绿体中,磷脂释放无机态的磷,各种糖脂和硫脂[硫代异鼠李糖甘油二脂（sulfoquinovosyldiacylglycerol,SQDG）]会替代磷脂功能,以便适应缺磷环境。SQDG的合成途径在拟南芥中已经得到证实:第一步:尿苷二磷酸葡萄糖（UDP-glucose,UDPG）与亚硫酸盐合成尿苷二磷酸硫代异鼠李糖（UDP-sulfoquinovose,UDP-SQ）:第二步:UDP-SQ中磺基喹诺酮部分转移到二酰甘油合成SQDG。第一步是在尿苷二磷酸硫代异鼠李糖合酶（SQD1）催化作用下进行,第二步由硫代异鼠李糖甘油二脂合酶（SQD2）催化反应。然而到目前为止,水稻中SQD1的生理功能还未有具体报道。本论文通过拟南芥尿苷二磷酸硫代异鼠李糖合酶基因AtSQD1在水稻基因组库中找到了一个同源基因OsSQD1,利用OsSQD1的组织定位、基因完全缺失突变体、基因沉默RNAi...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：165 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１植物对碟素的利用（Ｓｃｈａｃｈｔｍａｎ?ｅｔａｌ．，?１９９８）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｐｌａｎｔ?ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｏｉｌ?Ｐ?（Ｓｃｈａｃｈｔｍａｎ?ｅｔ?ａｌ．，?１９９８）??
图１－３拟南芥、水稻、苹果和毛果杨中ＰＨＴ家族进化树分析（ＳｕｎｅｔａＬ２０１７）??Ｆｉｇ?１－３?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｅｓ?ｏｆ?ＰＨＴ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?ｔｈａｌｉａｎａ?（Ａｔ），?Ｏｔｙｚａ?ｓａｌｉｖａ?（Ｏｓ），??Ｍａｉｎｓ?ｄｏｍｅｓｔｉｃａ?（Ｍｄ），?ａｎｄ?Ｐｏｐｕｌｕｓ?ｔｒｉｃｈｏｃａｒｐａ?（Ｐｔｒ）??３植物硫素营养的研究进展??
?缺磷响应基因０Ｓ５ＱＤＪ影响水稻生长发育和磷素吸收与利用的功能研宄???１．８．１表达载体的构建??根据附录二中的方法提取水稻野生型总ＤＮＡ，在ＮＣＢＩ网站数据库中查找并确??定使用仏风从）／翻译起始位点ＡＴＧ前２０２７ｂｐ的启动子，并利用ＤＮＡＭＡＮ软件分析??其中的酶切位点。表达载体选择１３００ＧＮ载体（图３－１），其中可用的酶切位点为所ｗ／ＩＩＩ??和母７７Ｉ。使用Ｐｒｉｍｅｒ５．０软件设计引物，上游引物序列为５?’??ＡＴＡＡＧＣＴＴＧＧＧＴＧＡＴＴＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴ３?’?，?下游引物为?５?’??ＡＴＧＧＴＡＣＣＣＡＧＧＣＧＡＡＧＧＧＣＴＧＡＡＡＣ３，，弓丨物合成由金斯瑞公司完成，并使用该??引物以基因组ＤＮＡ为模板扩增目的片段。将ＰＣＲ获得的启动子序列连接到??克隆载体ｐＥＡＳＹ－ｂｌｕｎｔ上，酶切验证且测序通过后，用限制性内切酶（／／／ｍ／ＩＩＩ和Ｋ／ｗＩ）??酶切，并用Ｔ４连接酶酶连的方法连接到表达载体１３００ＧＮ上。重组载体需经再次酶??切验证，待测序通过后，可保菌待用，并电转入农杆菌中，测序代用。ＰＣＲ产物的纯??化和回收及大肠杆菌感受态的制备及质粒转化分别见附录五和附录六，农杆菌感受态??的制备与转化见附录九，大肠杆菌和农杆菌的质粒提取见附录十。??３５Ｓ??Ａｉ？ａｌ（?？？３７）?＼??（ｌｏｕｓｓ）?＼??ＡｉＭｌＩ?（１０２２０）?．?＼?￡？？ＲＩ?（？）??Ａ＇ｍａｌ?（！〇２２＜？）?＇ｖ＇?＼?ＮＯＳ??ＡｐａＵ?（９９２２）?｜?＼?ｊ?（２６３）??Ｈｙｇ?ＡｐａＵ?（８４０）??．？Ｖ？ａＵ（９６２〇）?（Ｕ６５）??．－Ｕｗｌ?（９＊４３）
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物对磷缺乏的适应机理[J]. 王燕云,郭剑,陈小兰. 云南民族大学学报(自然科学版). 2008(01)
[2]植物磷转运蛋白基因及其表达调控的研究进展[J]. 王萍,陈爱群,余玲,徐国华. 植物营养与肥料学报. 2006(04)
[3]植物Pht1家族磷转运子的分子生物学研究进展[J]. 杨存义,刘灵,沈宏,严小龙. 分子植物育种. 2006(02)
[4]植物根构型特性与磷吸收效率[J]. 严小龙,廖红,戈振扬,罗锡文. 植物学通报. 2000(06)
本文编号：3222655
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：165 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１植物对碟素的利用（Ｓｃｈａｃｈｔｍａｎ?ｅｔａｌ．，?１９９８）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｐｌａｎｔ?ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｏｉｌ?Ｐ?（Ｓｃｈａｃｈｔｍａｎ?ｅｔ?ａｌ．，?１９９８）??
图１－３拟南芥、水稻、苹果和毛果杨中ＰＨＴ家族进化树分析（ＳｕｎｅｔａＬ２０１７）??Ｆｉｇ?１－３?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｅｓ?ｏｆ?ＰＨＴ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?ｔｈａｌｉａｎａ?（Ａｔ），?Ｏｔｙｚａ?ｓａｌｉｖａ?（Ｏｓ），??Ｍａｉｎｓ?ｄｏｍｅｓｔｉｃａ?（Ｍｄ），?ａｎｄ?Ｐｏｐｕｌｕｓ?ｔｒｉｃｈｏｃａｒｐａ?（Ｐｔｒ）??３植物硫素营养的研究进展??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]植物对磷缺乏的适应机理[J]. 王燕云,郭剑,陈小兰. 云南民族大学学报(自然科学版). 2008(01)
[2]植物磷转运蛋白基因及其表达调控的研究进展[J]. 王萍,陈爱群,余玲,徐国华. 植物营养与肥料学报. 2006(04)
[3]植物Pht1家族磷转运子的分子生物学研究进展[J]. 杨存义,刘灵,沈宏,严小龙. 分子植物育种. 2006(02)
[4]植物根构型特性与磷吸收效率[J]. 严小龙,廖红,戈振扬,罗锡文. 植物学通报. 2000(06)
本文编号：3222655
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