昆虫病原线虫新种Heterorhabditis beicherriana的分类鉴定及其生物防治的应用探讨与机理研究
发布时间：2021-06-20 09:10
由于昆虫病原线虫是一种专性寄生性天敌,针对不同的害虫使用不同的线虫种或品系进行防治,能够达到最佳的防治效果,所以正确鉴定昆虫病原线虫的种类就显得尤为重要。采用形态学鉴定和ITS区序列分析相结合的方法,通过对新分离的Cherry线虫形态结构、ITSrDNA和28S rDNA基因系统发育等指标分析,最终确定Cherry线虫为异小杆科异小杆属的一个新种,并取名为（Heterorhabditis beicherriana）。此线虫的种名字的拟定是根据拉丁名的法则,"beicherriana"的意义是北京地区“bei”,樱桃园‘’cherr",再加上后缀‘’iana"。本文对其生物学、生态学特性和侵染致死机理进行了研究,以期在田间应用时,让此线虫充分有效发挥生防作用。（1） Cherry线虫对昆虫寄主的侵染力较好,可以作为生防因子开发利用,且可以考虑将其作为相对高温干燥地区地下害虫的生防制剂推广应用。此外,Cherry线虫是可以经诱导休眠贮存的,但是为了保证侵染力,诱导休眠期仍然不宜太长,这可能跟长时间诱导休眠会导致线虫共生菌的失活有关。（2）四个Cherry线虫侵染处理的黄粉虫几乎在各时间点（...
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：128 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
异小杆属代表种嗜菌异小杆线虫的生活史(Johnigk&Ehlers，1999)
图2-1冲洗管制作方法。A:打开小离心管盖子“a”，在盖上打个孔如“b”； B：切去心管的锥形部分，做成一个柱形管如B; D，C:拿块尼龙网蒙在柱形管一端，盖上盖子，形成“e’’； “f’用于盛放最后准备进行临界点干燥的线虫样品。1.4分子生物学鉴定按照Joyce[-8]描述的方法处理用于PcR扩增的线虫样品:首先用70%的乙醇消毒载玻片，后把单条线虫成虫(或侵染期线虫)放在含有10微升线虫裂解液(50mM KCI，lOmM TrisPH.3, 2.5m MMgCl2. 0.45 % NP40, 0.45 Tween 20. 0.01%gelatin 和 60 ug/ml 蛋白酶 K)的PI载玻片上。用来NP40和Tween 20帮助降解线虫蛋白质”用刀片将线虫切成W段后连同裂液?起转移到放置在冰上灭菌的0.5毫升的离心管里，然后放在负80°C(或? Oe)冰箱里处10分钟,接着65r处理1小时，然后95°C处理10分钟来灭活线虫裂解液中的蛋白酶K,将解物在冰上冷却后于12,000离心2分钟,取2微升裂解物上淸来进行PCR反应[19]。剂：2.5mM Mgcb, Tween20, 75% 乙醇，0.5M EDTA, Tis, HAc, dNTP (北京强辛博生物技术有限公司），Proteinase K, Tap酶（北京强辛博瑞生物技术有限公司）；
:位论文 第三章i：!^虫病原线lU Helewrlwbditis beicherncma的生物7:表3-2 Cherry线虫在50.5 RH%T?燥环境小丁?燥后的侵染力able 3-2 Infectivity of H. heicherriana after drying in 50.5 RH %对照 T燥7 h存活线虫 T燥9 h存活线虫蜡率 人蜡￠5死f：率 卞JJJ 人■死f：率 卞^m^^ C%3.3 0.0 100.0 0.0 100.10.0 6.7 33.3 3.3 66.76.7 73.3 4.4 50.0 34.93.3 83.3 10.7 63.3 32.100.0 90.0 10.0 66.7 33. 100.0 ^ 23.habditis heicherriana 不同温度下的运动能力线虫迁入率
【参考文献】：
期刊论文
[1]根结线虫侵染对黄瓜生长和内源激素含量的影响[J]. 刘庆安,夏凯,叶梅荣,张远兵. 中国农学通报. 2010(18)
[2]不同措施对黄瓜根结线虫的控制效果与效益[J]. 陈志杰,李英梅,张锋,张淑莲,王琦,杨兆森,雷虹. 西北农业学报. 2010(08)
[3]电生功能水对保护地番茄叶霉病防治效果[J]. 郑磊,刘海杰,郝建雄,杨合斌,李里特. 植物保护. 2010(01)
[4]共生菌毒素对亚洲玉米螟和玉米小斑菌杀虫抑菌活性的测定[J]. 王欢,丛斌,董辉,刘彦群,杨吉. 玉米科学. 2009(06)
[5]22种中草药提取物杀根结线虫活性[J]. 刘晟,张敏,顾玲,苏康宇,宋吉青. 农药. 2009(08)
[6]“植物源线虫速杀剂”防治烟草根结线虫病的田间试验[J]. 刘涛,赵世民,王廷晓,陈彦春,蒋士君. 烟草科技. 2009(06)
[7]昆虫病原线虫共生菌对甜菜夜蛾和辣椒炭疽病菌的生物活性测定[J]. 王欢,丛斌,刘彦群,董辉,隋欣. 中国蔬菜. 2009(12)
[8]南方根结线虫侵染黄瓜幼根组织病理学观察[J]. 刘奇志,李娜,王丽,谢德燕. 中国农业大学学报. 2008(04)
[9]昆虫病原线虫资源概况和分类技术进展[J]. 丘雪红,韩日畴. 昆虫学报. 2007(03)
[10]蔬菜根结线虫综合防治研究进展[J]. 郭永霞,金永玲. 中国农学通报. 2007(03)
本文编号：3238906
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：128 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
异小杆属代表种嗜菌异小杆线虫的生活史(Johnigk&Ehlers，1999)
图2-1冲洗管制作方法。A:打开小离心管盖子“a”，在盖上打个孔如“b”； B：切去心管的锥形部分，做成一个柱形管如B; D，C:拿块尼龙网蒙在柱形管一端，盖上盖子，形成“e’’； “f’用于盛放最后准备进行临界点干燥的线虫样品。1.4分子生物学鉴定按照Joyce[-8]描述的方法处理用于PcR扩增的线虫样品:首先用70%的乙醇消毒载玻片，后把单条线虫成虫(或侵染期线虫)放在含有10微升线虫裂解液(50mM KCI，lOmM TrisPH.3, 2.5m MMgCl2. 0.45 % NP40, 0.45 Tween 20. 0.01%gelatin 和 60 ug/ml 蛋白酶 K)的PI载玻片上。用来NP40和Tween 20帮助降解线虫蛋白质”用刀片将线虫切成W段后连同裂液?起转移到放置在冰上灭菌的0.5毫升的离心管里，然后放在负80°C(或? Oe)冰箱里处10分钟,接着65r处理1小时，然后95°C处理10分钟来灭活线虫裂解液中的蛋白酶K,将解物在冰上冷却后于12,000离心2分钟,取2微升裂解物上淸来进行PCR反应[19]。剂：2.5mM Mgcb, Tween20, 75% 乙醇，0.5M EDTA, Tis, HAc, dNTP (北京强辛博生物技术有限公司），Proteinase K, Tap酶（北京强辛博瑞生物技术有限公司）；
:位论文 第三章i：!^虫病原线lU Helewrlwbditis beicherncma的生物7:表3-2 Cherry线虫在50.5 RH%T?燥环境小丁?燥后的侵染力able 3-2 Infectivity of H. heicherriana after drying in 50.5 RH %对照 T燥7 h存活线虫 T燥9 h存活线虫蜡率 人蜡￠5死f：率 卞JJJ 人■死f：率 卞^m^^ C%3.3 0.0 100.0 0.0 100.10.0 6.7 33.3 3.3 66.76.7 73.3 4.4 50.0 34.93.3 83.3 10.7 63.3 32.100.0 90.0 10.0 66.7 33. 100.0 ^ 23.habditis heicherriana 不同温度下的运动能力线虫迁入率
【参考文献】：
期刊论文
[1]根结线虫侵染对黄瓜生长和内源激素含量的影响[J]. 刘庆安,夏凯,叶梅荣,张远兵. 中国农学通报. 2010(18)
[2]不同措施对黄瓜根结线虫的控制效果与效益[J]. 陈志杰,李英梅,张锋,张淑莲,王琦,杨兆森,雷虹. 西北农业学报. 2010(08)
[3]电生功能水对保护地番茄叶霉病防治效果[J]. 郑磊,刘海杰,郝建雄,杨合斌,李里特. 植物保护. 2010(01)
[4]共生菌毒素对亚洲玉米螟和玉米小斑菌杀虫抑菌活性的测定[J]. 王欢,丛斌,董辉,刘彦群,杨吉. 玉米科学. 2009(06)
[5]22种中草药提取物杀根结线虫活性[J]. 刘晟,张敏,顾玲,苏康宇,宋吉青. 农药. 2009(08)
[6]“植物源线虫速杀剂”防治烟草根结线虫病的田间试验[J]. 刘涛,赵世民,王廷晓,陈彦春,蒋士君. 烟草科技. 2009(06)
[7]昆虫病原线虫共生菌对甜菜夜蛾和辣椒炭疽病菌的生物活性测定[J]. 王欢,丛斌,刘彦群,董辉,隋欣. 中国蔬菜. 2009(12)
[8]南方根结线虫侵染黄瓜幼根组织病理学观察[J]. 刘奇志,李娜,王丽,谢德燕. 中国农业大学学报. 2008(04)
[9]昆虫病原线虫资源概况和分类技术进展[J]. 丘雪红,韩日畴. 昆虫学报. 2007(03)
[10]蔬菜根结线虫综合防治研究进展[J]. 郭永霞,金永玲. 中国农学通报. 2007(03)
本文编号：3238906
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