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SrtR的鉴定及其在猪链球菌中抗氧化应激及毒力的作用研究

发布时间:2021-10-10 14:08
  猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人畜共患病原,能引起人脑膜炎、中毒性休克综合征等临床症状,威胁公共卫生安全;也能引起猪脑膜炎、关节炎等疾病,对养猪业造成较大的经济损失。S.suis逃避宿主免疫防御机制是其致病的关键环节之一。为研究猪链球菌的小鼠感染模型,本实验室此前将一株9型S.suis DN13在小鼠体内连续传代,获得了对小鼠毒力极大增强的菌株。在本研究中以传代获得的强毒菌株在小鼠中研究S.suis的致病机理。从DN13传代后细菌第10代、20代和30代中各随机挑选一个单菌落(分别命名为SS9-P10、SS9-P20和SS9-P30),并测定了对ICR小鼠中LD50数值。结果发现这3个传代菌株毒力比较接近,LD50均在104CFU数量级,而亲本株DN13 107CFU攻毒对小鼠不致死。为了阐明传代菌株毒力增强的分子机理:(1)我们对3个不同代次的传代菌株SS9-P10、SS9-P20、SS9-P30和亲本菌株DN13进行了生物学表型比较研究,结果显示3个传代菌株比亲本菌株DN13抗氧化和高温应激能力、生物被膜形成能力均显著增高(P<0.05),但3个... 

【文章来源】:湖南农业大学湖南省

【文章页数】:104 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

SrtR的鉴定及其在猪链球菌中抗氧化应激及毒力的作用研究


DN13及其传代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30生长曲线

耐受性,菌株,存活率


第二章9型猪链球菌DN13与传代菌株的生物学表型比较研究17首先比较了不同浓度的H2O2处理20min后亲本菌株的存活率。结果0.01MH2O2处理20min后DN13存活率几乎不受影响,而1MH2O2处理20min后几乎没有存活,而在0.1MH2O2处理有将近10%的存活率,故我们选择0.1MH2O2处理20min作为氧化应激处理。相比DN13在0.1MH2O2处理20min后10%以下的存活率,传代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30同样处理条件下存活率超过24%,显著高于DN13(P<0.05),但三个传代菌株之间对H2O2耐受性差异不显著(图2-2)。图2-2.DN13及其传代菌株对H2O2的耐受性Figure2-2.SurvivalpercentageofDN13anditspassagesinresponsetoH2O2S.suis感染宿主过程中会诱导宿主产生炎症,机体体温升高是炎症表现之一。猪可以感染多种哺乳动物,包括人。考虑到人的体温一般不会超过42℃,故以42℃作为高温应激条件。结果在42℃培养下,约63%的DN13可以存活,而三个传代菌株在42℃条件下生长几乎不受影响(图2-3),显著高于DN13(P<0.05)。图2-3.DN13及其传代菌株在42℃的存活率Figure2-3.SurvivalpercentagesofDN13anditspassagesat42C2.4传代菌株对小鼠全血的敏感性与DN13无显著差异哺乳动物血液中,正常情况下是无菌的。血液中含大量具有杀菌活性的物质,如溶菌酶、抗菌肽等。细菌在致病过程中,如果要建立全身性或系统性感染,往往需要通过血液循环系统或淋巴系统,使病原扩散至全身[116]。因此,耐受血液中杀菌物质是细菌建立全身性感染的必要条件。为了研究DN13的传代菌株毒力增强与对血液中杀菌物质耐受性增强有关,我们比较了DN13和它传代菌株对小鼠全血杀菌物质的耐受性试验。结果显示,

存活率,菌株


第二章9型猪链球菌DN13与传代菌株的生物学表型比较研究17首先比较了不同浓度的H2O2处理20min后亲本菌株的存活率。结果0.01MH2O2处理20min后DN13存活率几乎不受影响,而1MH2O2处理20min后几乎没有存活,而在0.1MH2O2处理有将近10%的存活率,故我们选择0.1MH2O2处理20min作为氧化应激处理。相比DN13在0.1MH2O2处理20min后10%以下的存活率,传代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30同样处理条件下存活率超过24%,显著高于DN13(P<0.05),但三个传代菌株之间对H2O2耐受性差异不显著(图2-2)。图2-2.DN13及其传代菌株对H2O2的耐受性Figure2-2.SurvivalpercentageofDN13anditspassagesinresponsetoH2O2S.suis感染宿主过程中会诱导宿主产生炎症,机体体温升高是炎症表现之一。猪可以感染多种哺乳动物,包括人。考虑到人的体温一般不会超过42℃,故以42℃作为高温应激条件。结果在42℃培养下,约63%的DN13可以存活,而三个传代菌株在42℃条件下生长几乎不受影响(图2-3),显著高于DN13(P<0.05)。图2-3.DN13及其传代菌株在42℃的存活率Figure2-3.SurvivalpercentagesofDN13anditspassagesat42C2.4传代菌株对小鼠全血的敏感性与DN13无显著差异哺乳动物血液中,正常情况下是无菌的。血液中含大量具有杀菌活性的物质,如溶菌酶、抗菌肽等。细菌在致病过程中,如果要建立全身性或系统性感染,往往需要通过血液循环系统或淋巴系统,使病原扩散至全身[116]。因此,耐受血液中杀菌物质是细菌建立全身性感染的必要条件。为了研究DN13的传代菌株毒力增强与对血液中杀菌物质耐受性增强有关,我们比较了DN13和它传代菌株对小鼠全血杀菌物质的耐受性试验。结果显示,

【参考文献】:
期刊论文
[1]猪链球菌2型体外刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞的炎症相关细胞因子mRNA转录分析[J]. 汪伟,何孔旺,倪艳秀,吕立新,周俊明,张雪寒,俞正玉,茅爱华,温立斌,王小敏,李彬,郭容利.  江苏农业学报. 2013(03)

博士论文
[1]MsmK调控猪链球菌生长和致病性的研究[D]. 谭美芳.华中农业大学 2016
[2]致仔猪脑膜炎新型猪链球菌的鉴定[D]. 潘子豪.南京农业大学 2014
[3]猪链球菌生物被膜形成及致病机理研究[D]. 汪洋.南京农业大学 2011
[4]深度测序揭示多重耐药猪链球菌R61的耐药机制及线粒体呼吸链蛋白的共进化研究[D]. 杨明.中国科学院北京基因组研究所 2011

硕士论文
[1]9型猪链球菌在小鼠体内的传代适应及比较基因组学研究[D]. 魏榕.湖南农业大学 2016



本文编号:3428526

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