华山松大小蠹解毒酶基因克隆与表达响应
发布时间：2021-11-25 02:59
华山松大小蠹（Dendroctonus armandi）是我国秦岭巴山林区中最具破坏性的森林害虫之一。华山松大小蠹主要危害30年以上的华山松（Pinus armandi）健康木,给华山松天然次生林和人工林带来毁灭性的灾害。小蠹虫利用自身和共生真菌的酶代谢和生理生化作用克服寄主树木的原生性和诱导性抗性,从而完成在寄主树木树干组织内的生存和生活史,其中解毒酶基因不仅能降解寄主树木次生性萜类物质的毒素,还参与小蠹虫体内信息素和激素的合成。本研究以华山松大小蠹为研究对象,通过对华山松大小蠹谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）和羧酸酯酶（Car Es）基因的系统发育,华山松大小蠹GSTs和Car Es基因在不同发育时期的表达,GSTs基因在不同组织部位的表达差异,华山松大小蠹GSTs和Car Es基因对华山松挥发性物质的表达响应,以及华山松大小蠹不同世代间体重、能量物质储存和解毒酶活性的差异等研究,旨在揭示华山松大小蠹主要解毒酶基因表达与克服寄主华山松抗性的机制。研究结果如下:1.华山松大小蠹第一代成虫中雄虫的比例为45.79%,而第二代为39.70%。不同性别和不同世代的华山松大小蠹体重、能量物质储...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：158 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图2-1两代华山松大小蠹雌雄成虫的体重分布
第二章华山松大小蠹三大解毒酶活性差异与生长发育的关系25图2-2不同世代华山松大小蠹的能量物质储备和解毒酶活性A糖原，B甘油三酯，C游离脂肪酸，D细胞色素b5，E还原型谷胱甘肽，F羧酸酯酶在不同世代、性别及世代和性别交互作用的双因素方差分析。Earlyseason：第一代成虫，Lateseason：第二代成虫。每个生理指标测定均进行5个重复，每个重复用虫5头（N=5×5）。（ns无显著性,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001）。Fig.2-2TheenergystoreanddetoxicationenzymesactivityintwogenerationofD.armandiContentofglycogen(A),triglyceride(B),freefattyacid(C),cytochromeb5(D),reducedglutathione(E)andcarboxylesterase(F)activityintwodifferentgenerationadultsofD.armandi.Earlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.Valuesarepresentedasthemean±SE.Measurementsforeachindexwereobtainedfromfivebiologicalreplicates(fivebeetlesforonereplicate)(N=5×5).Thesignificantdifferencebetweensexes,seasonsandS*SinteractionwithTwo-wayANOVA(ns:nosignificant,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).
第二章华山松大小蠹三大解毒酶活性差异与生长发育的关系27相对表达量图2-3不同世代华山松大小蠹雄虫19个细胞色素P450和细胞色素b5基因的表达水平Earlyseason：第一代成虫，Lateseason：第二代成虫。基因相对表达量以2-ΔΔCt取log2后进行作图。每个基因表达量测定均进行3个重复，每个重复用虫3头（N=3×3）。*表达基因相对表达量之间的差异，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。Earlyseason：第一代成虫，Lateseason：第二代成虫。Fig.2-3Quantitativereal-timePCRanalysisoftranscriptlevelsof19cytochromeP450genesandDarmCyt-b5inmalesrelatedtofemalesfromtwoseasonadultsofD.armandiEarlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.2-ΔΔCtvalueswerelog2transformedforplottingasmean±SE.Eachgenetranscriptlevelwasobtainedfromthreebiologicalreplicates(threebeetlesforonereplicate)(N=3×3).*indicatethesignificantdifferencebetweensexesofthesameseasonwithOne-wayANOVA(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).2.3小结通过统计两代华山松大小蠹成虫的性别比例，并对两代雌雄成虫的体重、能量物质储存和解毒酶含量的测定，结果表明第一代和第二代成虫都存在明显的雌性偏好的差异，两代华山松大小蠹成虫性别比例失衡均达到显著水平，并且第二代成虫中的性别比例失衡更加显著。不同性别和不同世代之间的华山松大小蠹的体重、能量物质储存和解毒酶活性均存在显著性差异。与雄虫相比，雌虫具有更大的体重和更多的脂肪储存，这是雌虫为克服寄主抗性，并满足产卵所表现的适应性。不不同解毒酶基因
【参考文献】：
期刊论文
[1]昆虫谷胱甘肽S-转移酶的多样性及其介导的抗药性[J]. 尤燕春,谢苗,尤民生. 应用昆虫学报. 2013(03)
[2]家蚕羧酸酯酶基因Bmae35的克隆、序列分析及表达[J]. 杨微,齐登伟,余泉友,张泽. 昆虫学报. 2011(06)
[3]利用木糖高产谷胱甘肽酵母菌株的诱变选育及培养条件优化[J]. 王晓琼,陈叶福,梁音,杨旭,肖冬光. 现代食品科技. 2011(05)
[4]昆虫谷胱甘肽-S-转移酶的基因组学研究及其介导的抗药性[J]. 房守敏. 蚕学通讯. 2010(04)
[5]秦岭华山松单萜类挥发物的动态变化[J]. 霍燕,陈辉. 西北林学院学报. 2010(05)
[6]高产谷胱甘肽酵母菌株的选育[J]. 杜丽平,肖冬光,时丽萍. 酿酒科技. 2010(02)
[7]棉铃虫和烟青虫性信息素腺体脂肪醇和乙酸酯转化的比较研究[J]. 王鸿雷,赵成华,闫云花,王琛柱. 昆虫学报. 2008(09)
[8]发酵法生产谷胱甘肽研究进展[J]. 朱玉强. 发酵科技通讯. 2008(02)
[9]秦岭细粘束孢对寄主华山松生理生化代谢的影响[J]. 蒲晓娟,陈辉,王胜军. 西北林学院学报. 2008(02)
[10]酵母生产谷胱甘肽的培养条件研究[J]. 贾建萍,周彦钢. 微生物学杂志. 2007(04)
博士论文
[1]华山松大小蠹和共生真菌P450基因差异性表达与解毒功能研究[D]. 代鲁鲁.西北农林科技大学 2016
本文编号：3517271
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：158 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图2-1两代华山松大小蠹雌雄成虫的体重分布
第二章华山松大小蠹三大解毒酶活性差异与生长发育的关系25图2-2不同世代华山松大小蠹的能量物质储备和解毒酶活性A糖原，B甘油三酯，C游离脂肪酸，D细胞色素b5，E还原型谷胱甘肽，F羧酸酯酶在不同世代、性别及世代和性别交互作用的双因素方差分析。Earlyseason：第一代成虫，Lateseason：第二代成虫。每个生理指标测定均进行5个重复，每个重复用虫5头（N=5×5）。（ns无显著性,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001）。Fig.2-2TheenergystoreanddetoxicationenzymesactivityintwogenerationofD.armandiContentofglycogen(A),triglyceride(B),freefattyacid(C),cytochromeb5(D),reducedglutathione(E)andcarboxylesterase(F)activityintwodifferentgenerationadultsofD.armandi.Earlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.Valuesarepresentedasthemean±SE.Measurementsforeachindexwereobtainedfromfivebiologicalreplicates(fivebeetlesforonereplicate)(N=5×5).Thesignificantdifferencebetweensexes,seasonsandS*SinteractionwithTwo-wayANOVA(ns:nosignificant,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).
第二章华山松大小蠹三大解毒酶活性差异与生长发育的关系27相对表达量图2-3不同世代华山松大小蠹雄虫19个细胞色素P450和细胞色素b5基因的表达水平Earlyseason：第一代成虫，Lateseason：第二代成虫。基因相对表达量以2-ΔΔCt取log2后进行作图。每个基因表达量测定均进行3个重复，每个重复用虫3头（N=3×3）。*表达基因相对表达量之间的差异，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。Earlyseason：第一代成虫，Lateseason：第二代成虫。Fig.2-3Quantitativereal-timePCRanalysisoftranscriptlevelsof19cytochromeP450genesandDarmCyt-b5inmalesrelatedtofemalesfromtwoseasonadultsofD.armandiEarlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.2-ΔΔCtvalueswerelog2transformedforplottingasmean±SE.Eachgenetranscriptlevelwasobtainedfromthreebiologicalreplicates(threebeetlesforonereplicate)(N=3×3).*indicatethesignificantdifferencebetweensexesofthesameseasonwithOne-wayANOVA(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).2.3小结通过统计两代华山松大小蠹成虫的性别比例，并对两代雌雄成虫的体重、能量物质储存和解毒酶含量的测定，结果表明第一代和第二代成虫都存在明显的雌性偏好的差异，两代华山松大小蠹成虫性别比例失衡均达到显著水平，并且第二代成虫中的性别比例失衡更加显著。不同性别和不同世代之间的华山松大小蠹的体重、能量物质储存和解毒酶活性均存在显著性差异。与雄虫相比，雌虫具有更大的体重和更多的脂肪储存，这是雌虫为克服寄主抗性，并满足产卵所表现的适应性。不不同解毒酶基因
【参考文献】：
期刊论文
[1]昆虫谷胱甘肽S-转移酶的多样性及其介导的抗药性[J]. 尤燕春,谢苗,尤民生. 应用昆虫学报. 2013(03)
[2]家蚕羧酸酯酶基因Bmae35的克隆、序列分析及表达[J]. 杨微,齐登伟,余泉友,张泽. 昆虫学报. 2011(06)
[3]利用木糖高产谷胱甘肽酵母菌株的诱变选育及培养条件优化[J]. 王晓琼,陈叶福,梁音,杨旭,肖冬光. 现代食品科技. 2011(05)
[4]昆虫谷胱甘肽-S-转移酶的基因组学研究及其介导的抗药性[J]. 房守敏. 蚕学通讯. 2010(04)
[5]秦岭华山松单萜类挥发物的动态变化[J]. 霍燕,陈辉. 西北林学院学报. 2010(05)
[6]高产谷胱甘肽酵母菌株的选育[J]. 杜丽平,肖冬光,时丽萍. 酿酒科技. 2010(02)
[7]棉铃虫和烟青虫性信息素腺体脂肪醇和乙酸酯转化的比较研究[J]. 王鸿雷,赵成华,闫云花,王琛柱. 昆虫学报. 2008(09)
[8]发酵法生产谷胱甘肽研究进展[J]. 朱玉强. 发酵科技通讯. 2008(02)
[9]秦岭细粘束孢对寄主华山松生理生化代谢的影响[J]. 蒲晓娟,陈辉,王胜军. 西北林学院学报. 2008(02)
[10]酵母生产谷胱甘肽的培养条件研究[J]. 贾建萍,周彦钢. 微生物学杂志. 2007(04)
博士论文
[1]华山松大小蠹和共生真菌P450基因差异性表达与解毒功能研究[D]. 代鲁鲁.西北农林科技大学 2016
本文编号：3517271
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