新城疫病毒通过内质网压力应激反应诱导细胞凋亡研究

发布时间：2022-01-07 22:19

　　新城疫病毒（Newcastle Disease Virus,NDV）是一种呈球形、有囊膜的RNA病毒,具有单股、负链、不分节段的RNA基因组。该病毒也是引起家禽养殖业重大经济损失的一种禽类病毒。NDV作为一种很重要的溶瘤病毒,能够在肿瘤细胞中选择性复制,引起肿瘤细胞凋亡。目前研究表明,NDV感染诱导内源性和外源性细胞凋亡,且通过诱导死亡配体TNFα和TRAIL的表达介导外源性细胞凋亡。然而,NDV感染如何引起内源性细胞凋亡还没有系统、具体的报道。内质网（endoplasmic reticulum,ER）压力应激,也称为未折叠蛋白反应（unfold protein response,UPR）,是指在营养不足、钙离子失衡、病毒感染等不同的生理和/或病理条件下,导致未折叠或错误折叠蛋白在内质网腔中的蓄积,以及内质网功能的紊乱所引起的应答反应。3种跨内质网膜的ER应激感受蛋白已被鉴定,包含PKR样ER调节激酶（protein kinase RNA（PKR）-like ER kinase,PERK）、转录激活因子6（activating transcription factor 6,ATF6）和... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：83 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

NDV感染诱导CHOP表达Fig.2.1InductionofCHOPduringNDVinfection

NDV感染诱导CHOP表达及入核Fig.2.2TheexpressionandnucleartranslocationofCHOPduringNDVinfection.

中国农业科学院博士学位论文第二章新城疫病毒感染通过CHOP信号通路介导细胞凋亡研究20而高浓度则抑制PKR活性(IC50:696nM)(Axtenetal.,2012)。WesternBlot检测样品中eIF2α、p-eIF2α、CHOP、NDVNP和β-actin蛋白水平的变化。NDV感染时，低剂量的GSK260641不影响eIF2α磷酸化(Liao,etal.,2016a)。如图2-3所示，与DMSO对照组相比，高剂量GSK260641处理组eIF2α的磷酸化水平显著减少（0.1倍），且CHOP表达水平降低至0.2倍。以上结果显示，NDV感染可以通过激活PKR-eIF2α信号通路，诱导表达CHOP蛋白。图2-3磷酸化的eIF2α诱导CHOP表达Fig.2.3CHOPisinducedbyphosphorylationofeIF2α2.2.2NDV感染下调抗凋亡蛋白BCL-2和MCL-1BCL-2家族蛋白可以分为抗凋亡蛋白BCL-2、Mcl-1，BCL-XL，BCL-w和BFL1/A1；促凋亡效应蛋白Bax、Bak，以及Bim、Bid、PUMA和NOXA等只含有BH3结构域的促凋亡蛋白3类。BCL-2家族蛋白能够通过调控线粒体内、外膜的通透性，激活一系列下游信号通路，引起细胞凋亡(BrunelleandLetai,2009)。研究表明，NDV感染能够诱导内源性细胞凋亡和外源性细胞凋亡，并且通过诱导表达死亡配体TNFα和TRAIL，引起死亡受体介导的外源性细胞凋亡(Liao,etal.,2016a)。CHOP可以通过下调表达抗凋亡BCL-2家族蛋白，引起线粒体源的细胞凋亡(McCullough,etal.,2001)。为了验证NDV感染是否调控BCL-2家族，我们用NDVHerts/33毒株感染HeLa细胞，且分别于感染后0h、4h、8h、12h、16h、20h和24h收取细胞样品。WesternBlot结果表明，NDV感染后16h和20h，抗凋亡蛋白BCL-2和MCL-1分别降低0.5、0.1倍，而BCL-xL变化不明显（如图2-4）。同时，病毒感染后16h、20h和24h，在蛋白水平，促凋亡BH3-only蛋白BIM和Puma没有明显变化，而效应凋亡蛋白BAX有轻微减少分别为0.8、0

【参考文献】：
期刊论文
[1]Diverse Functions of VDUP1 in Cell Proliferation,Differentiation,and Diseases[J]. Sang Yong Kim,Hyun-Woo Suh,Jin Woong Chung,Suk-Ran Yoon,Inpyo Choi.  Cellular & Molecular Immunology. 2007(05)



本文编号：3575372