辽藁本DNA条形码鉴定及规范化种植技术研究

发布时间：2017-06-21 12:17

  本文关键词：辽藁本DNA条形码鉴定及规范化种植技术研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：辽藁本(Ligusticum jeholense Nakai et Kitag)是伞形科藁本属(Ligusticum L.)多年生草本植物。以根及根茎入药,始载于《神农本草经》,列为中品,具有抑菌、散风、祛寒、祛湿止痛之功效,主治风寒头痛、寒湿腹痛、风湿肢节痹痛等症,为治疗感冒、头巅顶痛、风湿之要药。由于药材市场对辽藁本野生资源需求旺盛,人们大量采挖,严重破坏其生态环境,使野生资源面临濒危枯竭的境地。而人工种植栽培技术还不完善,不能适应中药现代化生产的要求。本研究旨在通过对辽藁本种源鉴定、快速繁殖、种子生物学特性、关键栽培技术和采收时间的研究,为辽藁本生产质量管理规范(GAP)的建立提供理论依据。主要结论如下：1.八种DNA候选序列(NrITS、ITS2、accD、rbcL、trnH-psbA、ndhJ、rpoC1和rpoB)对不同产地辽藁本和新疆藁本、藁本混淆品的DNA分子鉴定分析表明,NrITS和ITS2序列在这8种候选序列中能较好地区分辽藁本与新疆藁本及其混淆品,trnH-psbA序列对区别辽藁本与其易混淆品有一定参考价值。2.初步建立了辽藁本快速繁殖体系。选择未成熟种胚作为外植体,在MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6BA+0.5 mg/L KT培养基上诱导产生胚性愈伤和不定芽；不定芽能在B5+0.1mg/L NAA+0.1 mg/L 6BA培养基上稳定地增殖生长,增殖倍数可达10以上；无根苗在B5+0.6mg/LNAA培养基上生根率最高,为92.17%；组培苗敞口炼苗一周后,转入蛭石和营养土混合物(v营养土：V蛭石=1：1)中,成活率可达80.00%以上。3.种子发芽试验结果表明,15℃、纸上(TP)发芽可作为辽藁本种子标准发芽参考。光照或黑暗对辽藁本种子萌发没有显著影响,但对子叶转绿有显著影响。百粒法和千粒法均可以用来进行辽藁本种子重量测定。4.种植密度和氮磷钾配方施肥试验结果表明,三种密度处理(A 40 cm×40 cm, B40cm ×30cm、C40cm×25cm)下,A密度和B密度处理下的鲜重、干物质积累量、阿魏酸和藁本内酯含量普遍高于C密度处理,B密度处理下的产量显著高于A密度和C密度处理。氮磷钾配方施肥对辽藁本根中鲜重、干物质积累量、产量和阿魏酸和藁本内酯含量影响显著。综合产量和品质两方面考虑,采用氮磷钾低水平施肥效果较佳。5.三年生植株的株高、地上部和根部鲜重、地上部和根部干物质积累量、产量、阿魏酸和藁本内酯含量在各个生育时期均显著高于二年生植株。三年生根部鲜重在盛果期时达到最大值,与枯萎期相比无显著性差异；根部干物质积累量均在枯萎期时达到最大值；藁本内酯含量均是在盛果期达到最大值；阿魏酸含量则是三年生植株在盛果期时达到最大值,二年生植株在营养生长期含量最高。
【关键词】：辽藁本 分子鉴定 快速繁殖 栽培技术
【学位授予单位】：中国农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S567.239
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-10
• 缩略词10-11
• 第一章 前言11-25
• 1.1 辽藁本资源研究进展11-22
• 1.1.1 藁本属植物资源11-13
• 1.1.2 辽藁本本草特征及药用价值13
• 1.1.3 辽藁本化学成分研究13-15
• 1.1.4 辽藁本药理作用研究15-16
• 1.1.5 辽藁本鉴定研究16-20
• 1.1.6 辽藁本繁殖技术研究20-21
• 1.1.7 辽藁本栽培技术研究21
• 1.1.8 辽藁本采收技术研究21-22
• 1.2 本研究意义与研究目标22-25
• 1.2.1 研究意义22-23
• 1.2.2 研究目标23-25
• 第二章 药用植物辽藁本DNA条形码序列鉴定研究25-49
• 2.1 材料与方法25-30
• 2.1.1 植物材料25-26
• 2.1.2 仪器与试剂26
• 2.1.3 样品DNA提取26-28
• 2.1.4 PCR扩增和测序28-30
• 2.1.5 序列拼接和数据分析方法30
• 2.2 结果与分析30-47
• 2.2.1 序列特点分析30-42
• 2.2.2 种内种间遗传距离考察42-44
• 2.2.3 构建系统发育NJ树44-47
• 2.3 小结47-49
• 第三章 辽藁本组培快繁体系的建立49-57
• 3.1 材料与方法49-51
• 3.1.1 植物材料49
• 3.1.2 试剂及配制49
• 3.1.3 培养基的配制49-50
• 3.1.4 诱导分化培养50-51
• 3.1.5 不定芽增殖培养51
• 3.1.6 生根培养51
• 3.1.7 炼苗移栽51
• 3.1.8 培养条件51
• 3.1.9 数据分析51
• 3.2 结果与分析51-55
• 3.2.1 不同激素处理对叶片和叶柄的诱导影响51-52
• 3.2.2 不同激素处理对未成熟种胚的诱导影响52-53
• 3.2.3 不同激素处理对不定芽增殖的影响53-54
• 3.2.4 不同激素处理对生根的影响54-55
• 3.2.5 组培苗的炼苗移栽55
• 3.3 小结55-57
• 第四章 辽藁本种子生物学特性研究57-63
• 4.1 材料与方法57-58
• 4.1.1 植物材料57
• 4.1.2 试验方法57-58
• 4.1.3 数据分析58
• 4.2 结果与分析58-62
• 4.2.1 扦样58-59
• 4.2.2 净度分析59
• 4.2.3 发芽温度对种子发芽率的影响59-60
• 4.2.4 发芽床对种子发芽率的影响60
• 4.2.5 光照对种子发芽率的影响60-61
• 4.2.6 辽藁本种子发芽技术规程61
• 4.2.7 重量测定61-62
• 4.3 小结62-63
• 第五章 种植密度对辽藁本产量和品质的影响63-69
• 5.1 材料与方法63-65
• 5.1.1 供试材料63
• 5.1.2 试验地点63-64
• 5.1.3 试验设计64
• 5.1.4 田间管理64
• 5.1.5 取样及测定方法64
• 5.1.6 数据分析64-65
• 5.2 结果与分析65-68
• 5.2.1 种植密度对植株高度的影响65
• 5.2.2 种植密度对鲜重的影响65-66
• 5.2.3 种植密度对干物质积累量的影响66-67
• 5.2.4 种植密度对阿魏酸含量的影响67
• 5.2.5 种植密度对藁本内酯含量的影响67-68
• 5.3 小结68-69
• 第六章 氮磷钾配方施肥对辽藁本产量和品质的影响69-77
• 6.1 材料与方法69-72
• 6.1.1 供试材料69
• 6.1.2 试验地点69-70
• 6.1.3 试验设计70-71
• 6.1.4 田间管理71
• 6.1.5 取样及测定方法71
• 6.1.6 数据分析71-72
• 6.2 结果与分析72-76
• 6.2.1 氮磷钾配方施肥对根部鲜重的影响72-73
• 6.2.2 氮磷钾配方施肥对根部干物质积累量和产量的影响73-74
• 6.2.3 氮磷钾配方施肥对阿魏酸含量的影响74-75
• 6.2.4 氮磷钾配方施肥对藁本内酯含量的影响75-76
• 6.3 小结76-77
• 第七章 采收时间对辽藁本产量和品质的影响77-83
• 7.1 材料与方法77-78
• 7.1.1 供试材料77
• 7.1.2 试验地点77
• 7.1.3 试验设计77
• 7.1.4 田间管理77-78
• 7.1.5 取样及测定方法78
• 7.1.6 数据分析78
• 7.2 结果与分析78-81
• 7.2.1 采收时间对植株高度的影响78
• 7.2.2 采收时间对鲜重的影响78-79
• 7.2.3 采收时间对干物质积累量的影响79-80
• 7.2.4 采收时间对阿魏酸含量的影响80
• 7.2.5 采收时间对藁本内酯含量的影响80-81
• 7.3 小结81-83
• 第八章 结论和讨论83-89
• 8.1 DNA条形码技术鉴定辽藁本及其混淆品83
• 8.2 辽藁本组培快繁体系的建立83-84
• 8.3 辽藁本种子质量评价与控制84
• 8.4 辽藁本关键栽培技术研究84-86
• 8.4.1 种植密度对辽藁本产量和品质的影响85
• 8.4.2 氮磷钾配方施肥对辽藁本产量和品质的影响85-86
• 8.5 辽藁本采收时间研究86-89
• 参考文献89-95
• 附录95-107
• 致谢107-109
• 作者简介109

  本文关键词：辽藁本DNA条形码鉴定及规范化种植技术研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：468666