小檗碱对压力超负荷诱导大鼠心肌肥厚的作用及机制研究

发布时间：2017-10-12 09:46

  本文关键词：小檗碱对压力超负荷诱导大鼠心肌肥厚的作用及机制研究

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【摘要】：背景：心肌肥厚常发生于高血压、心脏瓣膜疾病等压力负荷过度性疾病,是决定多种心血管疾病预后的独立危险因子。长期压力负荷刺激将导致失代偿性心肌肥厚、心力衰竭、恶性心律失常或心源性猝死。自噬是一种进化上高度保守的细胞内分解代谢的过程,自噬增强是对长期压力后负荷刺激的一种适应性反应。传统中药小檗碱具有心肌保护作用,且在多种细胞上表现出自噬增强的作用,但其心血管保护作用和自噬增强是否相关并不清楚。目的：在本研究中,我们利用主动脉缩窄手术(TAC)建立压力超负荷所致的心肌肥厚大鼠模型,探索中药小檗碱抗心肌肥厚的作用以及具体分子机制。方法：选取体重约200g左右的SD大鼠,分为假手术组(Sham+Vehicle)、主动脉缩窄组(TAC+Vehicle)、小檗碱治疗组(TAC+Berberine)以及小檗碱+3-甲基腺嘌呤治疗组(TAC+Berberine+3-MA)。TAC术后即刻给予小檗碱10mg/kg每日一次,灌胃给药；3-甲基腺嘌呤100mg/kg,每两日一次,腹腔注射给药。术后4周行超声检测大鼠心功能的变化；HE染色、Masson染色和TUNEL染色观察心肌细胞大小变化,纤维化程度以及细胞凋亡情况；RT-qPCR方法检测心肌肥厚标记物的表达情况；透射电镜检测心脏组织的结构变化和自噬小体；Western blotting和免疫组化检测内质网应激相关蛋白、自噬相关蛋白和信号通路的变化情况。结果：我们发现,TAC手术可以明显增加大鼠心肌肥厚、心脏重量与体重比、心肌细胞凋亡、心脏纤维化以及心肌肥厚分子标记物脑利钠肽(BNP, brain natriuretic peptide)的表达,小檗碱可明显改善压力负荷所致的上述心脏的改变。在小檗碱显著改善大鼠心脏肥厚、心肌细胞凋亡以及心功能减退的同时,也可明显增强大鼠心肌组织的自噬作用。进一步将小檗碱与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤合用可阻止小檗碱所致的自噬水平的增加,从而消除了小檗碱的抗心肌肥厚、抑制心肌细胞凋亡以及改善心功能紊乱的作用。此外,小檗碱可显著改善TAC所致的内质网应激的增加,且小檗的这种降低内质网应激的作用也可以被自噬作用抑制剂3-甲基腺嘌呤所消除。同时,我们也检测了自噬上游的信号通路发现小檗碱可明显抑制自噬的上游信号通路中mTOR. ERKl/2以及p38 MAPK的磷酸化。结论：小檗碱可以显著减轻压力超负荷所致的大鼠心肌肥厚和心肌细胞凋亡,且小檗碱的此种依赖增强自噬的心脏保护作用至少部分是由于抑制mTOR、p38和ERK1/2 MAPK信号通路来实现的。
【关键词】：小檗碱 主动脉缩窄 心肌肥厚 自噬作用 内质网应激
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 英文缩略词表4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-14
• 1 大鼠主动脉弓缩窄压力负荷诱导左室心肌肥厚模型的建立及评价14-35
• 引言14
• 材料与方法14-26
• 结果26-32
• 讨论32-35
• 2 小檗碱对大鼠主动脉缩窄所致心肌肥厚和心功能紊乱的保护作用及相关机制35-72
• 引言35-36
• 材料与方法36-52
• 结果52-66
• 讨论66-72
• 小结72-73
• 参考文献73-83
• 综述83-101
• 参考文献92-101
• 攻读学位期间发表文章101-102
• 致谢102

【共引文献】

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1 侯丽颖;孙燕佩;张旭光;赵栋;吴坤;;维生素E琥珀酸酯通过Akt/mTOR信号通路诱导人胃癌细胞SGC-7901发生保护性自噬[J];癌变.畸变.突变;2013年05期

2 陈松峰;邵增务;;自噬相关信号转导通路研究进展[J];国际骨科学杂志;2013年04期

3 刘斌;唐静;袁敏;李世英;;血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬及微管相关蛋白1轻链3的表达[J];第二军医大学学报;2013年09期

4 Jun Cheng;Min Quan;Liang Wu;Qi Wang;;The Role of Autophagy in Hepatitis C Virus Infection[J];Infection International(Electronic Edition);2012年01期

5 王路乔;黄波;程晓曙;;细胞自噬在心血管应激和心脏疾病中的作用[J];广东医学;2013年19期

6 宋霞;程滨;刘谋治;金鑫;姜远英;曹永兵;;小檗碱对多柔比星的增效减毒作用及其机制研究进展[J];现代药物与临床;2014年03期

7 吕杰;李柏青;刘勇;马丽娜;刘婷婷;刘丛森;;幽门螺杆菌对胃黏膜上皮细胞自噬和凋亡的影响[J];蚌埠医学院学报;2014年06期

8 李博;叶明翔;姜秀秀;张艰;;吉非替尼通过自噬促进PC-9肺癌细胞凋亡的实验研究[J];第三军医大学学报;2014年13期

9 李霞;黄文娟;朱素菲;陈维贤;;雷帕霉素诱导细胞自噬促进乙型肝炎病毒的复制[J];第三军医大学学报;2014年12期

10 Yue Liu;Shang-Tao Wan;Ping Zhang;Wen-Xin Zhang;Jian-Ling Zheng;Jian-Xian Lin;Yong-Ping Li;;Expression levels of autophagy related proteins and their prognostic significance in retinocytoma and retinoblastoma[J];International Journal of Ophthalmology;2014年04期

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1 Sheng-nan Wei;Li Chen;;Different regulation of Berberine via regulation of adenosine-5'-monophosphate kinase activity in both non-ischemic and ischemic areas of the rat heart[A];第十一届全国博士生学术年会（生物医药专题）论文集（下册，墙报P25-P48）[C];2013年

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1 杨爱民;Neuronostatin对痛觉、胃肠运动和情绪的影响及脂基化蛋白LC3-Ⅱ的半合成[D];兰州大学;2013年

2 王振波;LC3A在食管鳞癌中的放化疗敏感性预测作用[D];山东大学;2013年

3 刘峗;调控镊钴基纳米材料及纳米基因载体的自噬效应在肿瘤诊疗中的应用[D];中国科学技术大学;2013年

4 耿静;束缚应激加重挤压伤大鼠肾损伤的内质网应激机制[D];河北医科大学;2013年

5 李旭;ROS依赖的内质网应激—自噬反应在醉茄素A诱导人胰腺癌细胞凋亡中的作用研究[D];华中科技大学;2013年

6 杨盛兰;microRNA-30c通过调节自噬参与调控糖尿病心肌病机制的研究[D];华中科技大学;2013年

7 韦颍昕;硒诱导胰腺癌细胞程序性死亡及作用机制研究[D];北京协和医学院;2013年

8 安涛;NRG-1保护阿霉素所致心肌细胞损伤的机制研究[D];北京协和医学院;2013年

9 张伟;NO/cGMP信号通路在新生和未成熟雌性大鼠卵泡形成和发育中的生物学作用及其调控机制研究[D];南京农业大学;2011年

10 李娜;幽门螺杆菌CagA抑制胃上皮细胞自噬及其感染引起的miR-222/146a上调在胃相关疾病发生中的作用机制研究[D];第三军医大学;2013年

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4 张晓飞;骨髓间充质干细胞静脉移植对脑创伤大鼠细胞自噬变化的影响[D];河北医科大学;2013年

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9 董越娟;酒精诱导PC12细胞自噬及其与P62作用的关系[D];河南大学;2013年

10 ASHA JHA;二甲双胍影响子宫内膜癌顺铂敏感性的体外研究[D];天津医科大学;2013年

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本文编号：1018039