Dapper1在肝癌发生发展中的作用及机制研究

发布时间：2017-12-08 12:16

  本文关键词：Dapper1在肝癌发生发展中的作用及机制研究

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【摘要】：第一部分Dapper1在肝细胞癌发生发展中的作用及机制研究研究目的肝癌是一种临床常见的恶性肿瘤,其病因复杂,恶性程度高,异质性强,并且多数患者确诊时已是晚期,往往预后不良。因此,从不同的分子水平和信号通路的异常表达对肝癌进行分子水平的区别有对于肝癌的个体化治疗是至关重要的。肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)的发生和发展过程中涉及到多个促癌信号的激活,Wnt/β-catenin信号通路在调节肝癌细胞分化、增殖、上皮-间质转化和干细胞的更新中起到重要作用。HCC中第二常见的特定位点基因突变即为促癌基因β-catenin的突变,突变比例约占20%-40%,因此Wnt/β-catenin通路的激活被认为是可能用来对HCC进行临床分型的标志之一。Wnt通路的激活过程需要多种蛋白的共同参与,Wnt配体与受体FZD及其共受体LRP5或LRP6结合,募集脚手架蛋白DSH(Disshevelled,DSH),该蛋白使得LRP5或LRP6磷酸化,导致AXIN复合体被激活并大量募集到受体上。随后AXIN被降解,β-catenin降解复合体也随之解离,导致细胞质中β-catenin聚集,游离的β-catenin可以移位到细胞核内,与TCF/LEF家族转录因子集合,诱导下游靶基因的转录,从而产生一系列的生物学效应。而Dapper(Dpr)则是作为能够拮抗Wnt通路中脚手架蛋白DSH功能的一类蛋白被发现。Dpr的同源物包括Dpr1、Dpr2和Dpr3,编码人Dpr1的基因为DACT1,位于第14号染色体上。Dpr1在胚胎发育过程中可以调控Wnt信号通路,另有研究报道了其核转运与核定位信号,证明Dpr1还可通过核浆穿梭在胞核和胞浆中以不同方式调控Wnt通路的活性。肿瘤领域的研究表明Dpr1在肝癌患者癌组织中呈现下调状态,并且这种下调伴随着胞浆中β-catenin的积累,然而Dpr1在肝脏中表达及其在肝细胞癌发生发展中的作用及其机制尚不明确,有待进一步研究探讨。自噬是细胞在基础条件和应激下维持细胞稳态的一种分解代谢方式,在肝脏正常生理机能维持和肝脏疾病的病理进展中起着重要的作用。自噬调节异常与病毒性肝病、非酒精性肝脂肪性变、酒精性肝病、肝纤维化、肝硬化以及肝癌密切相关。目前普遍认为自噬在肝癌的进展过程中起着双重作用,即自噬在肿瘤形成和肿瘤抑制这两个过程中均有作用。目前研究表明自噬相关标志物的发现对于肝细胞癌的诊断和治疗方式的选择具有一定的指导意义。p62是自噬过程中重要的底物与接头分子,在多种肝脏疾病中可以观察到p62的高表达,例如非酒精性脂肪肝、酒精性脂肪肝、肝细胞癌等。大量报道表明p62可以通过调控NRF2信号通路、NF-kB信号通路、mTORC1信号通路、自噬、内质网应激等在维持细胞稳态和肿瘤发生发展中起到重要的作用。目前研究表明过表达p62诱导NRF2与mTORC1的激活以及c-Myc的表达,可以促进小鼠中肝细胞癌的起始。p62累积导致的NRF2瞬时性激活可以保护肝细胞免受氧化应激及环境中毒素的损伤,然而自噬功能受损导致的p62蓄积和持续的NRF2激活则会导致肝癌的形成。因此,如何通过药理学研究开发抑制p62累积及NRF2和mTORC1持续激活的制剂是将来研究抗HCC药物的一个突破点。近期研究表明Dpr1也具有调控细胞自噬的作用,研究表明在中枢神经系统中Dapper1可以通过促进Beclin1-Vps34-Atg14L复合体的形成促进自噬。在前期预实验中我们在体内和体外实验中均发现Dpr1与自噬水平呈现负相关;且在肝细胞特异性敲除Dpr1的小鼠DEN诱癌模型中,Dpr1敲除的小鼠肝癌成瘤性显著增强。Dpr1调节Wnt信号通路的机制已得到较完善的阐释,然而在肝细胞癌背景下Dpr1是否影响肝细胞癌的发生发展,是否调节Wnt信号通路或影响肝脏细胞自噬水平的变化,以及上述通路变化对肝癌发生发展的作用均有待进一步研究探讨。基于以上背景,本课题旨在探讨Dpr1在肝癌发生发展中的作用,相关信号通路变化及其下游效应,进而评估Dpr1作为肝癌临床诊断、预后判断标志物和治疗靶点的潜在价值。研究方法1.通过RT-PCR检测肝细胞癌患者中Dpr1的表达量,初步探讨Dpr1表达量在肝癌形成中的作用。2.将Alb-Cre小鼠与Dpr1-Loxp小鼠杂交,鉴定肝细胞特异性敲除Dpr1的小鼠。利用腹腔注射DEN与CCl4诱导小鼠肝细胞癌,收集诱癌过程中(诱癌1.5月、2月、2.5月及3月)小鼠肝脏样本,诱癌4个月观察小鼠肝脏肿瘤形成情况,初步确定Dpr1在肝癌形成过程中的作用,并比较与肝癌患者中的观察是否一致。3.RT-PCR检测肝癌细胞系中Dpr1表达情况,选择Dpr1低表达的细胞系Huh7及LM3通过慢病毒体系构建Dpr1稳定过表达细胞系。利用该细胞系进行裸鼠皮下荷瘤实验,观察Dpr1过表达细胞与对照细胞成瘤的差异,进一步明确Dpr1对于肿瘤形成的影响。4.分离Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠肝脏原代细胞,通过Western Blot检测原代细胞中自噬相关分子(p62及LC3-II等)表达量。同时在上述稳定过表达Dpr1细胞系中检测自噬相关分子的表达;用Ad-GFP-RFP-LC3II监测自噬流的变化,并对自噬小体及自噬溶酶体进行计数,统计其相对值,明确Dpr1过表达及敲除后对自噬的影响;在培养体系中去血清饥饿培养诱导细胞自噬,明确饥饿诱导条件下Dpr1对自噬的影响。5.在上述DEN诱导肝细胞癌各个时间点的Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠肝脏样本中检测自噬相关分子的表达,探讨在肝细胞癌形成过程中Dpr1对自噬的影响以及与肝细胞癌形成的关系。6.检测上述稳定表达Dpr1细胞系及原代分离的Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠肝细胞在H2O2诱导下细胞衰老表型的差异;利用ROS试剂盒检测上述稳定表达Dpr1细胞系及Dact1hep-/-与WT小鼠原代细胞中ROS的生成并进行标准化量化。7.检测上述DEN诱导肝细胞癌各个时间点的Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠肝脏新鲜组织冰冻切片中细胞衰老情况,探讨在肿瘤形成过程中Dpr1对细胞衰老的关系;通过RT-PCR及Western Blot检测衰老相关分子p53、p21、p16等的表达量,明确Dpr1影响细胞衰老的上游信号通路。8.检测上述DEN诱导肝细胞癌各个时间点的Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠DNA损伤修复关键分子的表达,明确Dpr1在肝细胞癌形成过程中对DNA损伤的影响;通过免疫组织化学检测肝癌癌前病变,高度不典型增生结节标志性分子,观察Dpr1在肿瘤形成前期对癌前病变形成的作用。9.收集Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠DEN加CCl4诱导肝细胞癌2月的新鲜样本,固定后电镜观察两组小鼠自噬小体形成,线粒体、内质网等细胞器形态及糖原累积情况等变化。10.通过Western Blot检测DEN诱导肝细胞癌各个时间点肝脏样本中与自噬、细胞衰老及DNA损伤相关上游通路的关键分子,例如p-Akt信号通路,p62-Nrf2信号通路等。11.通过质粒转染在293T中过表达Dpr1,以及利用Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠原代细胞,观察Dpr1对PTEN降解的调节及其机制。12.利用IP等方法探讨Dpr1与自噬等信号通路中关键分子相互作用的可能性,并利用后续敲除或过表达实验进行功能验证,观察其对上述自噬、衰老、DNA损伤应答等表型的影响。研究结果1.通过RT-PCR检测44例肝细胞癌患者肝癌及癌旁组织样本中Dpr1的表达量,与癌旁组织相比,肝癌组织中Dpr1呈现低表达。2.Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠进行DEN加CCl4诱导肝细胞癌4个月,发现Dact1hep-/-小鼠肝脏成瘤数目明显多于对照小鼠,说明Dpr1敲除后促进小鼠肝脏肿瘤形成,与肝癌患者中观察一致。3.利用慢病毒体系建立MHCC-LM3及Huh7过表达Dpr1及GFP细胞系进行裸鼠皮下荷瘤,4周后发现过表达Dpr1组皮下肿瘤明显小于对照组,表明Dpr1抑制肿瘤的形成。4.Western Blot检测稳定细胞系中自噬相关分子p62,LC3-II的表达,发现过表达Dpr1后,细胞自噬水平升高,而原代分离的Dact1hep-/-肝细胞中自噬水平显著低于WT小鼠肝细胞;利用Ad-RFP-GFP-LC3-II系统检测自噬流也提示随着Dpr1表达量升高,自噬溶酶体/自噬小体比例明显增高,提示自噬能力增强。去血清培养诱导细胞自噬也发现饥饿诱导后Dpr1过表达细胞自噬能力的增强高于对照组。5.利用Western Blot检测DEN诱导肝细胞癌各个时间点Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠肝脏样本中自噬相关分子的表达,发现Dact1hep-/-小鼠肝脏样本中p62表达高于对照组而LC3-II表达量较低,说明诱导肝细胞癌发生的过程中,Dact1hep-/-小鼠肝脏自噬水平均较对照组更低。6.稳定表达Dpr1的肝癌细胞系中利用β-gal染色检测细胞衰老,实验发现Dpr1过表达Huh7肝癌细胞系,衰老细胞比例明显多于对照细胞;而原代分离的Dact1hep-/-小鼠肝细胞中本底情况下衰老细胞比例则少于对照组;原代细胞培养体系中加入H2O2诱导氧化应激及衰老,WT原代肝细胞中随H2O2浓度增高,细胞衰老比例呈增加趋势,而Dact1hep-/-细胞中诱导细胞衰老效果并不显著。利用Mito SOX RED检测细胞中ROS的含量,Dpr1过表达细胞系中ROS含量均明显高于对照组;而原代分离Dpr1hep-/-小鼠肝细胞中ROS含量则明显低于WT小鼠肝细胞;以上表明Dpr1诱导ROS产生,可能是导致细胞衰老的原因之一。7.利用β-gal染色检测上述DEN诱导肝细胞癌各个时间点的Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠肝脏新鲜组织冰冻切片中细胞衰老,Dact1hep-/-小鼠肝细胞中几乎并未观察到β-gal阳性染色,而WT小鼠DEN诱癌2月和3月肝脏组织中则出现大量细胞衰老;DEN诱癌4月形成的肿瘤组织中,两组小鼠均未见明显衰老阳性细胞。RT-PCR检测原代分离Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠肝细胞p53与p21的表达,结果提示WT小鼠肝细胞中p53与p21的表达均略高于Dact1hep-/-小鼠。Western Blot检测DEN诱导肝癌过程不同时间点样本中p53及p21的表达,也发现WT小鼠肝脏组织中p53与p21表达高于Dact1hep-/-小鼠。8.利用Western Blot检测上述DEN诱癌不同时间点Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠石蜡样本切片中DNA损伤关键分子的表达,发现Dact1hep-/-小鼠样本中p-p53、γ-H2AX等DNA损伤标志物表达量显著高于对照组。通过HE及免疫组织化学检测DEN诱导肝细胞癌3个月的小鼠肝脏样本中肝癌前病变标志物,发现Dact1hep-/-小鼠肝脏样本中 HGDN数量显著多于对照组小鼠。9.电镜观察DEN诱癌2月Dact1hep-/-小鼠及对照小鼠样本,发现Dact1hep-/-小鼠组织中自噬小体数量明显少于对照组,且观察到明显糖原累积及内质网肿胀。10.检测DEN诱导肝细胞癌模型各个时间点Dact1hep-/-小鼠与WT小鼠组织样本中p-Akt相关通路变化,发现Dact1hep-/-小鼠样本中p-Akt信号通路明显激活,且PTEN表达量出现下调。11.在293T细胞中梯度过表达Dpr1后可以检测到PTEN表达随Dpr1梯度增加呈现表达升高趋势。293T中过表达Dpr1-myc及对照质粒后加入CHX抑制蛋白合成,发现PTEN降解在Dpr1过表达细胞中减慢。12.293T中同时过表达PTEN-His、HA-Ubiquitin、Dpr1-myc作为实验组,PTEN-His、HA-UB、Pll-GFP作为对照组,IP实验发现Dpr1过表达细胞中His-tag抗体可以成功捕获HA-UB,表明Dpr1过表达后出现泛素化PTEN的累积,可能由于其降解能力减弱所致。结论在DEN诱导肝细胞癌模型中,Dact1hep-/-小鼠肝细胞癌成瘤能力显著高于WT小鼠,提示在该模型中Dpr1对于肝癌形成具有抑制作用。对肝癌患者癌及癌旁样本检测发现,Dpr1在肝癌患者癌组织中低表达,进而明确了Dpr1的抑癌作用。体外实验检测Dact1hep-/-小鼠及WT小鼠原代肝细胞以及Dpr1稳定过表达及对照肝癌细胞系发现,Dpr1干扰后细胞自噬水平显著降低,细胞衰老减慢且DNA损伤加重,以上生物学过程的改变在DEN诱癌过程中共同导致Dact1hep-/-小鼠肝细胞成瘤性增强。进一步的机制探讨发现Dact1hep-/-小鼠成瘤过程中PTEN表达量下调同时p-Akt信号通路活性增强。研究表明Dpr1过表达细胞中出现明显的泛素化PTEN堆积,提示PTEN降解速率减慢,Dpr1可能参与PTEN稳定性的调节。这一效应可能是由于肝细胞自噬受阻后p62介导泛素化PTEN降解减慢所致,具体机制仍需后期实验验证。我们还将通过Dpr1截断体探索其作用的具体位点,阐释Dpr1作用于PTEN的具体分子机制,探讨其对肝癌治疗及预后判断潜在的作用。第二部分HBx调节HMGB1分泌促进肝细胞癌进展的作用及机制研究研究目的肝细胞癌(HCC)是最为常见的肿瘤之一,在肿瘤导致的死亡中位居第三。乙型病毒性肝炎病毒(HBV)感染是公认的HCC的主要危险因子。HBV感染可以引起肝炎-肝纤维化-肝硬化的进展,最终导致肝细胞癌的发生。肝细胞癌患者通常预后不良,而肿瘤肝内转移以及远端转移是影响预后的重要因素。在HBV引起的肝癌患者中接受肝切除术后仍然可能伴有HBV的活化,HBV活性的持续同样影响患者的预后。有资料表明持续的抗病毒治疗可以有效延长患者的生存期,而术后抗病毒治疗也有望减轻病毒的负载,缓解肝脏炎性反应,进而提高患者术后生存率。HBV基因组DNA由4段部分重叠的开放阅读框构成,其中X区域编码HBV x蛋白(HBx),HBx蛋白是一段17kd大小的可溶性蛋白,在宿主细胞的胞核和胞浆广泛分布,在HBV导致的肝癌进展中发挥着重要的作用。一方面,HBx通过促进细胞增殖以及迁移促进肝细胞癌的发生与发展。另外,HBx还可影响转录因子活性,上调Ras/Raf/MAPK、PI3K/Akt等关键信号通路活性促进肝癌的进展。然而,HBx与肝癌发生发展的具体分子机制却仍未被完全阐明。HMGB1作为一种进化上相对保守的染色体结合蛋白被发现,早期报道表明其作为DNA的分子伴侣发挥增强染色体稳定性的作用。近年来的报道表明,HMGB1不仅可以作为败血症晚期系统性炎症反应的调节因子,而且在肝脏缺血再灌注损伤早期被分泌到细胞外而发挥作用。同时,HMGB1与一些恶性肿瘤的预后不良相关,例如肝细胞癌,前列腺癌、乳腺癌、结肠癌等。在缺氧的肿瘤微环境下,肝癌细胞可以释放HMGB1,从而引起下游的炎症级联反应,从而促进肝癌的侵袭与转移。因此,本课题旨在探讨HBx促进肝癌侵袭和转移的具体分子机制以及HMGB1在其中的介导作用。根据本课题组前期的文献阅读和预实验基础,提出以下假设:HBx通过促进肝细胞癌细胞分泌HMGB1,引起下游级联免疫反应从而促进肝癌细胞的侵袭和转移,加速肝癌进展。本课题将首先验证此猜想的科学性,进而深入探讨HBx促进肝癌细胞分泌HMGB1的具体分子机制。HMGB1在患者血清及肝组织的水平或可作为预测肝癌患者预后的指标,同时利用HMGB1中和抗体封闭HMGB1的活性或可作为乙肝相关肝癌患者潜在的治疗策略。因此本课题关于HBx促进促进肝细胞癌细胞分泌HMGB1的作用及机制研究可为临床肝癌患者的分子分型及个体化治疗提供新的依据。研究方法1.收集肝细胞癌患者肝癌与癌旁组织,制作组织芯片,利用免疫组织化学技术检测芯片中组织HMGB1的表达情况,利用组织染色评分软件对胞浆中HMGB1染色进行评分。整理上述组织芯片中患者的临床资料以及随访预后资料,根据HMGB1胞浆着色评分的中位数,将患者分为HMGB1胞浆高表达组(评分高于中位数)和低表达组(评分低于中位数),结合患者总体生存期,复发时间等进行患者预后分析,明确HMGB1与肝癌患者的预后关系;结合患者的临床资料进行生存和复发的单因素及多因素分析;分析患者胞浆HMGB1染色与HBV DNA滴度之间的关系。2.选取不同HBV DNA滴度的肝癌患者,根据HBV复制活跃程度分组:HBV DNA105 IU/m L;103HBV DNA105 IU/m L;HBV DNA103 IU/m L;HBV(-);另外选取与每组人数等量的健康人血清作为对照,利用ELISA检测血清中HMGB1浓度,分析血清中HMGB1浓度与HBV DNA滴度的相关性。3.用RT-PCR检测肝癌患者组织样本中HBx的表达水平,将该样本进行核浆分离,利用Western Blot检测HMGB1在胞浆中的表达量并进行灰度定量,统计学分析肝癌患者胞浆中HMGB1表达与组织中HBx表达量之间的相关性。4.利用慢病毒体系建立肝细胞癌细胞系过表达HBx及对照质粒的稳定细胞系,利用ELISA和Western Blot检测细胞培养上清中HMGB1的分泌水平及时间依赖性。5.利用腺病毒系统感染肝细胞癌细胞系,建立短时的过表达HBx及对照GFP的模型,利用ELISA和Western Blot检测细胞培养上清中HMGB1的分泌水平及时间依赖性;在上述建立的稳定过表达HBx及对照的肝癌细胞系中,利用细胞免疫荧光技术观察过表达HBx后是否存在HMGB1的胞浆转位。6.通过Transwell技术检测肝癌细胞系的侵袭性,在培养体系中加入重组HMGB1蛋白,或HMGB1中和抗体封闭分泌型HMGB1活性后,观察肝癌细胞系侵袭性的变化。7.利用慢病毒系统建立构建过表达HBx-Luc及GFP-Luc的肝癌细胞系,NOD-SCID小鼠尾静脉注射上述表达荧光素酶的细胞系建立肺转移模型,定期通过小动物活体成像系统观察小鼠肿瘤细胞肺转移的情况,比较两组细胞系的肺转移特性;给予PBS或者HMGB1中和抗体进行干预性治疗,比较各组小鼠活体成像信号强弱;处死各组小鼠后,比较大体肺转移瘤大小及个数,收集各组小鼠肺组织样本;对小鼠肺组织进行HE染色,计数各组小鼠肺中微转移灶的数目;同时对肺组织进行免疫组织化学染色,观察各组HMGB1染色情况,比较HBx过表达组与对照组中胞浆内HMGB1的表达量,对比HMGB1中和抗体处理之后,胞浆中HMGB1染色的变化。8.利用细胞内游离钙离子特异性探针,比较HBx过表达稳定细胞系及对照细胞系中细胞内游离钙离子的含量。给予钙离子拮抗剂BAPTA-AM处理细胞系后,比较细胞培养上清中HMGB1的浓度,细胞内游离钙离子浓度的变化以及用Transwell检测细胞的侵袭性。9.在上述小鼠尾静脉肺转移模型中,给予PBS或者BAPTA-AM进行治疗性干预,活体成像系统观察小鼠肺转移瘤形成情况;定期取各组小鼠血清,检测血清中HMGB1的浓度;处死小鼠后比较小鼠肺上转移瘤的数目和大小;对小鼠肺组织进行HE染色,比较各组中肺上微转移灶的数目;对小鼠肺组织进行HMGB1细胞免疫化学染色,比较转移灶中胞浆内HMGB1的分泌。10.在稳定表达HBx的细胞系及腺病毒感染HBx或者对照病毒的细胞系中,培养体系中加入钙离子相关通路的抑制剂,收集细胞培养上清用ELISA检测HMGB1的分泌量;利用Transwell体系,检测加入抑制剂后两组细胞的侵袭性变化;通过上述方法明确HBx调节HMGB1分泌所涉及的钙离子相关性通路。研究结果1.肝癌细胞SMMC-7721及MHCC-LM3过表达HBx后,细胞培养上清中HMGB1分泌明显高于对照组,细胞免疫荧光可观察到明显的HMGB1胞浆转位,提示HBx促进HMGB1的分泌。2.肝癌细胞SMMC-7721及MHCC-LM3培养体系中加入重组HMGB1蛋白后,细胞侵袭性明显增强;肝癌细胞系过表达HBx后,细胞穿膜能力明显增强,而在Transwell体系中加入HMGB1中和抗体后,细胞侵袭性明显减弱到与对照组相似的水平。3.在小鼠尾静脉注射肝癌细胞系肺转移模型中,注射HBx组细胞系小鼠肺活体成像信号明显强于对照组;定期眼球后取血检测血清中HMGB1浓度,发现注射HBx过表达组细胞系的小鼠血清中HMGB1水平更高;给予HMGB1中和抗体干预后,注射HBx过表达组小鼠肺部活体成像信号明显减弱,处死小鼠后肺转移瘤大小和数目均明显低于PBS组;肺组织HE染色中,使用HMGB1中和抗体治疗组小鼠肺部微转移灶数量明显少于对照HBx组小鼠,同时HMGB1免疫组织化学染色中胞浆着色减弱至类似于注射GFP组细胞的水平。以上提示:在体内实验中,阻断HMGB1的活性可以有效减轻HBx过表达肝癌细胞系的转移。4.在过表达HBx及对照质粒的肝癌细胞系中加入细胞内钙离子拮抗剂,可以有效抑制细胞培养上清中HMGB1的分泌并且伴随细胞侵袭能力的减弱;体内实验肺转移模型中,给予BAPTA-AM干预后,小鼠肺转移瘤形成明显减少,胞浆内HMGB1水平也呈现下降趋势。以上提示HBx促进HMGB1的分泌从而影响肿瘤细胞的侵袭转移依赖于细胞内游离钙离子浓度的升高。5.在过表达HBx及对照质粒的肝癌细胞系中加入CAMKK及CAMKIV抑制剂,可以有效抑制细胞培养上清中HMGB1的分泌,同时可观察到HBx过表达组细胞侵袭性下降。提示HBx调节HMGB1分泌是通过Ca2+-CAMKK-CAMKIV通路介导的。6.肝癌患者组织芯片进行HMGB1免疫组织化学染色及胞浆HMGB1着色评分,根据评分中位数将患者分为HMGB1高表达组及HMGB1低表达组,生存分析发现HMGB1高表达提示患者预后不良。同时,肝癌患者血清学检测发现血清中HMGB1水平与患者HBV DNA滴度呈现正相关,与组织芯片中肝癌细胞胞浆中HMGB1水平与患者HBV滴度的相关性分析结果一致。结论本研究证实HBx蛋白通过Ca2+-CAMKK-CAMKIV信号通路调节肝癌细胞中HMGB1的分泌,进而促进肝癌细胞的侵袭转移,导致肝癌患者预后不良。使用HMGB1中和抗体封闭HMGB1的作用或Ca2+-CAMKK-CAMKIV通路的抑制剂均可以有效的抑制HBx促进的HMGB1的分泌,抑制肝癌细胞的转移。肝癌患者血清HMGB1水平或可指导HBV相关肝癌患者预后判断,抑制HMGB1分泌的干预性治疗有望成为HBV相关肝癌患者的潜在治疗靶标。
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.7

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8 彭晨星;microRNA结合位点单核苷酸多态性对肝细胞癌预后影响的相关性研究[D];河北医科大学;2016年

9 田伟;γδT细胞免疫治疗肝细胞癌的实验研究[D];山西医科大学;2016年

10 叶甲舟;RBM8A与肝细胞癌的相关性及对肝细胞癌增殖及凋亡生物学特性的影响[D];广西医科大学;2016年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王飞;CDH17调控肝细胞癌的生物学机制的研究[D];福建医科大学;2015年

2 陈中博;咖啡摄入与肝细胞癌发病风险的Meta分析[D];河北医科大学;2015年

3 张华鹏;核受体辅激活蛋白5在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义[D];郑州大学;2015年

4 郭慧敏;血清sCD25测定在肝细胞癌诊断中的意义[D];郑州大学;2015年

5 凌青霞;双氧化酶1（Duox1）在肝细胞癌中的表达调控及作用研究[D];复旦大学;2014年

6 李会芬;血清Talin-1在肝细胞癌诊断中的作用[D];郑州大学;2015年

7 蒙锦莹;血管生长相关因子的血清浓度与肝细胞癌预后的相关性研究[D];兰州大学;2015年

8 战勇;肝细胞癌术前造影参数与生物学表现相关性及术后复发相关因素讨论[D];中国人民解放军医学院;2015年

9 姚乐;microRNA-32在肝细胞癌中的表达及其临床预后意义[D];河北医科大学;2015年

10 吴华;MACC1在肝细胞癌中的表达与临床意义[D];安徽医科大学;2015年

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本文编号：1266363