usp9x基因在三阴性乳腺癌化疗耐药中的作用及其机制研究

发布时间：2017-12-15 15:06

  本文关键词：usp9x基因在三阴性乳腺癌化疗耐药中的作用及其机制研究

  更多相关文章： 三阴性乳腺癌 耐药 X染色体连锁的泛素特异性蛋白酶9 WP1130 髓样细胞白血病因子-1

【摘要】：实验目的乳腺癌(BreastCancer)是现今女性最常见的恶性肿瘤之一,作为一个特殊的乳腺癌亚型,三阴性乳腺癌(TNBC)侵袭力强、易复发和转移。寻找合适靶点提高TNBC的化疗敏感性是其研究的关键。X染色体连锁的泛素特异性蛋白酶9(usp9x)是一种编码泛素特异性蛋白酶的基因,在包括TNBC在内的多种肿瘤内高表达,其编码的去泛素化酶usp9x作为一种对蛋白泛素化起到逆向调节作用的重要调节因子在肿瘤的发生发展中起了关键作用,能调节靶基因的转录,控制肿瘤细胞生长、分化及凋亡。随着对泛素化酶usp9x研究的深入,其在肿瘤耐药中的作用被逐渐提出。本研究的目的就是观察usp9x在三阴性乳腺癌对顺铂耐药性中的作用及其可能机制。材料与方法本研究用顺铂处理MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三种乳腺癌细胞株,利用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测乳腺癌癌细胞系的细胞活力,细胞增殖检测试剂盒(EdU试验)检测乳腺癌细胞系的增殖情况,蛋白免疫印迹技术(Western-blot)内usp9x蛋白的表达情况。用usp9x抑制剂WP1130抑制乳腺癌细胞株内usp9x的活性,研究单纯顺铂处理和进行顺铂和usp9x抑制剂WP1130联合处理后,MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三种细胞株细胞活力、增殖情况以及细胞内usp9x蛋白的表达情况的变化。用usp9x siRNA干扰乳腺癌细胞系内usp9x的表达,研究单纯顺铂处理和进行顺铂和usp9xsiRNA联合处理后,MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三种细胞株细胞活力的变化,以及usp9x siRNA干扰乳腺癌细胞系内usp9x的表达再联合usp9x抑制剂WP1130处理后MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三种细胞株细胞活力的变化。为探讨usp9x影响乳腺癌耐药的机制,我们在检测各种处理下MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三种细胞株中内usp9x的表达情况的同时也检测了三种细胞株中抗凋亡蛋白Mcl-1的表达情况,并分析了 Mcl-1变化与usp9x表达的关系。结果实验结果发现:(1)顺铂处理后,三种乳腺癌细胞株的细胞活力及增殖情况均下降,乳腺癌细胞系对顺铂的敏感性与usp9x的表达高低负相关;(2)联合应用usp9x活性抑制后,ER阴性的乳腺癌细胞株的细胞活力、增殖情况以及usp9x的表达均下降,即乳腺癌细胞系对顺铂的敏感性增加,而ER阳性的细胞株不受影响;(3)siRNA敲除usp9x后,usp9x的表达均下降,ER阴性的乳腺癌细胞株对顺铂的敏感性增加,而ER阳性的细胞株不受影响;(4)siRNA敲除usp9x后再行usp9x活性抑制处理,则不能增加三种乳腺癌细胞系对顺铂的敏感性(5)usp9x活性抑制处理和siRNA敲除usp9x处理后三种细胞株内usp9x的表达变化与抗凋亡蛋白Mcl-1蛋白的表达变化正相关。结论:uSp9x的高表达会明显降低乳腺癌细胞对顺铂的敏感性。通过降低乳腺癌细胞系内usp9x的活性或抑制乳腺癌细胞系内usp9x的表达,均可以显著增加ER阴性的乳腺癌细胞对顺铂的敏感性,但不能影响ER阳性的乳腺癌细胞对顺铂的反应。uSp9x可能通过影响抗凋亡蛋白Mcl-1途径影响ER阴性的乳腺癌细胞系对顺铂的敏感性。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.9

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄啸原;用“印度阅兵”形容乳腺癌合适吗?[J];诊断病理学杂志;2001年02期

2 张嘉庆,王殊,乔新民;乳腺癌的现状和远景[J];中华外科杂志;2002年03期

3 张维彬,汪波,石灵春;中医药在现代乳腺癌治疗中的运用[J];中国中西医结合急救杂志;2002年01期

4 薛志勇;食物与乳腺癌[J];山东食品科技;2002年04期

5 王旬果,王建军,郑国华;乳腺癌相关标志物的研究进展[J];山东医药;2002年33期

6 陆尚闻;;男人也患乳腺癌[J];环境;2003年12期

7 ;新技术清晰拍摄早期乳腺癌细胞[J];上海生物医学工程;2005年04期

8 田富国;郭向阳;张华一;;乳腺癌诊治研究新进展[J];肿瘤研究与临床;2005年S1期

9 马涛,谷俊朝;血管内皮生长因子与乳腺癌的临床研究进展[J];国外医学(外科学分册);2005年01期

10 郭庆良,谷俊朝;乳腺癌和瘦素相关性研究进展[J];国外医学.外科学分册;2005年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治疗融合蛋白[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

2 郭红飞;;中医治疗乳腺癌的策略[A];江西省中医、中西医结合肿瘤学术交流会论文集[C];2012年

3 庞朋沙;伍会健;;乳腺癌治疗靶标的研究进展[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年

4 陆劲松;邵志敏;吴炅;韩企夏;沈镇宙;;新型维甲酸抑制乳腺癌细胞的生长及诱导凋亡的机制研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

5 刘爱国;胡冰;;乳腺癌临床治疗进展[A];安徽省抗癌协会第四次代表大会暨乳腺癌、肺癌专业委员会成立会议、安徽省肿瘤防治进展学术研讨会论文汇编[C];2001年

6 张嘉庆;王殊;乔新民;;乳腺癌的现状和远景[A];第一届全国中西医结合乳腺疾病学术会议论文汇编[C];2002年

7 刘清俊;;乳腺癌综合治疗的新进展[A];山西省抗癌协会第六届肿瘤学术交流会论文汇编[C];2003年

8 邵志敏;;21世纪乳腺癌治疗的展望[A];第三届中国肿瘤学术大会教育论文集[C];2004年

9 陈松旺;张明;;乳腺癌治疗的回顾与展望[A];西部地区肿瘤学学术会议论文汇编[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凯阳;王兆钺;阮长耿;;组织因子途径抑制物-2在乳腺癌细胞中的表达研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 ;血检有望揭示乳腺癌治疗效果[N];医药经济报;2004年

2 记者 郑晓春;乳腺癌细胞扩散基因被找到[N];科技日报;2007年

3 中国军事医学科学院肿瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新疗法[N];中国妇女报;2002年

4 王艳红;抑制ＤＮＡ修补可消灭乳腺癌细胞[N];医药经济报;2005年

5 詹建;乳腺癌饮食 两个时期不一样[N];中国中医药报;2006年

6 辛君;乳腺癌扩散基因“浮出水面”[N];大众卫生报;2009年

7 记者 毛黎;美发现有效抑制乳腺癌细胞生长的分子[N];科技日报;2010年

8 记者 吴春燕　通讯员 王丽霞;乳腺癌治疗将有新途径[N];光明日报;2011年

9 王乐　沈基飞;我科学家发现导致乳腺癌耐药的新标志物[N];科技日报;2011年

10 刘霞;一种天然分子能阻止乳腺癌恶化[N];科技日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 柴红燕;疾病状态下CYP4Z1和4A的生物学行为及其药物干预研究[D];武汉大学;2012年

2 李凯;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白调控乳腺细胞的分化并影响乳腺癌的预后[D];复旦大学;2014年

3 江一舟;乳腺癌新辅助化疗前后基因变异检测及其功能论证[D];复旦大学;2014年

4 马邵;酪氨酸去磷酸化增强表皮生长因子受体在乳腺癌治疗中靶向性的研究[D];山东大学;2015年

5 姚若斯;精氨酸甲基转移酶PRMT7诱导乳腺癌细胞发生表皮—间质转换及转移的作用机制研究[D];东北师范大学;2015年

6 侯培锋;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上调缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)诱发高致瘤性干细胞样乳腺癌细胞机制研究[D];福建医科大学;2014年

7 李丽丽;分泌蛋白SHON调控乳腺癌细胞EMT的分子机制研究[D];东北师范大学;2015年

8 陈丽艳;PI3K抑制剂联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乳腺癌协同杀伤作用的分子机制研究[D];延边大学;2015年

9 朴俊杰;乳腺癌差异基因筛选及PAIP1对其生物学行为的影响[D];延边大学;2015年

10 汪[?如;染色体6q25.1区域基因多态性与乳腺癌遗传易感性的关联研究[D];南方医科大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杜文英;乳腺癌分子亚型的临床与病理特点[D];郑州大学;2011年

2 贾晓菲;彩色多普勒超声与乳腺癌病理及免疫组化指标的相关性研究[D];内蒙古大学;2015年

3 靳文;乳腺癌全基因组DNA甲基化修饰的研究[D];内蒙古大学;2015年

4 吴坤琳;TLR4/MyD88信号通路对乳腺癌侵袭性影响的实验研究[D];福建医科大学;2015年

5 葛广哲;树，

本文编号：1292387